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藿香正氣水

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【關(guān)鍵詞】減味藿香正氣水;藥效物質(zhì)基礎(chǔ);厚樸酚

Abstract:ObjectiveTostudyonthepharmacodyamicmaterialbasisofJianweiHuoxiangZhengqiliquid.MethodsRegressionandcorrelationanalysiswereappliedtointerrelatetheareasof40peaksandinhibitionratesofrabbits''''isolatedduodenumactivatedbyacetylcholine.ResultsPearson''''scorrelationcoefficientsandregressionequationof40peakswereachived.ConclusionThechemicalsubstancesforX3andX25aredefinedasthepharmacodyamicmaterialbasisofJianweiHuoxiangZhengqiliquid.ThechemicalsubstanceforX25ismagnolol.CortrxMagnoliaeOfficinalisisthemaincrudedruginJianweiHuoxiangZhengqiliquid.

Keywords:JianweiHuoxiangZhengqiliquid;pharmacodyamicmaterialbasis;magnolol

減味藿香正氣水是在湖南省中醫(yī)研究院彭志輝[1]等人用正交設(shè)計(jì)法對(duì)藿香正氣水組方研究的基礎(chǔ)上減味得到,從原來(lái)的11味降低到5味,包括厚樸、陳皮、蒼術(shù)、半夏、廣藿香油。減味藿香正氣水對(duì)家兔離體十二指腸具有很強(qiáng)的抑制率[1]。本文以減味藿香正氣水40個(gè)色譜峰的相對(duì)峰面積為自變量,對(duì)乙酰膽堿刺激的家兔離體十二指腸的抑制率為因變量,進(jìn)行相關(guān)分析和回歸分析,探討其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。

1儀器與材料

1.1儀器肌肉張力換能器JZ100型(高碑店市新航機(jī)電設(shè)備有限公司),電子分析天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司天平儀器廠),電熱恒溫箱(北京長(zhǎng)源實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠),氧氣吸入器(江蘇魚(yú)躍醫(yī)療設(shè)備有限公司),氧氣瓶(深圳中宏工業(yè)氣體有限公司),Agilent1100型高效液相色譜儀。

1.2藥物減味藿香正氣水根據(jù)中國(guó)藥典2005版全方制備方法減味制備成1g·mL-1的藥液。厚樸、陳皮、蒼術(shù)、半夏由深圳一致藥材公司提供,廣藿香油購(gòu)自江西吉水贛州香料油廠(批號(hào)20020302),氯乙酰膽堿購(gòu)自上?;瘜W(xué)試劑廠,Tyrodes液自制。

1.3試劑乙腈和甲醇為色譜純(德國(guó)Merk公司);氯仿為分析純(汕頭光華化學(xué)試劑廠);水為超純水(>18兆歐),并經(jīng)0.45μm水系濾膜過(guò)濾;厚樸酚和甲基橙皮苷購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所。

1.4動(dòng)物家兔購(gòu)自中山大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心,合格證號(hào)SCXK2003011。

2方法與結(jié)果

2.110份減味藿香正氣水的制備厚樸3~9g,陳皮3~9g,蒼術(shù)3~9g,半夏3~9g,廣藿香油30~90μL(廣藿香藥典用量3~9g,廣藿香油在藿香正氣水中體積用量為其他藥材質(zhì)量的0.01倍,經(jīng)計(jì)算為30~90μL),進(jìn)行均勻設(shè)計(jì),得到10個(gè)組方。厚樸、陳皮、蒼術(shù)用60%(體積分?jǐn)?shù))乙醇作溶劑,在室溫浸漬24h后進(jìn)行滲濾,分別收集滲濾液各400mL,在40℃減壓濃縮至小體積;生半夏用冷水浸泡,每8h換水1次,泡至透心,并按照27∶320的質(zhì)量比加入干姜,加10倍質(zhì)量的蒸餾水煎煮2次,第1次3h,第2次2h,合并水煎液,常溫減壓濃縮至小體積;廣藿香油用乙醇適量溶解。以上所得到的醇提液、水煎液和廣藿香油乙醇液合并混勻,用60%(體積分?jǐn)?shù))乙醇適量調(diào)整,得到生藥材質(zhì)量濃度為1g·mL-1的10個(gè)樣品,于4℃冰箱冷藏。

2.2對(duì)乙酰膽堿刺激的離體兔腸的抑制實(shí)驗(yàn)[2]選健康普通家兔,體重(2.5±0.7)kg,雌雄兼用,禁食12h,自由飲水。將動(dòng)物擊昏后剖開(kāi)腹腔,剪取10~15cm腸管,迅速放入盛有Tyrodes液的平皿中洗凈并浸浴,當(dāng)腸管活動(dòng)明顯時(shí),將其剪成約2cm的腸段標(biāo)本,兩端對(duì)角穿線,放在盛有100mL臺(tái)氏液的電熱恒溫箱中(37±0.5)℃水浴,上端連接張力換能器,下端系于L型鉤上,同時(shí)通入氧氣(1~2個(gè)氣泡/s)。標(biāo)本負(fù)荷1g,平衡30min待系統(tǒng)穩(wěn)定后,開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。描記5min正常曲線后,向浴管中加入氯乙酰膽堿(22mg·L-1),使終質(zhì)量濃度達(dá)到10-6g·mL-1,腸管立即收縮。待收縮達(dá)到峰值后,用臺(tái)式液洗滌3次,使腸管收縮恢復(fù)至基線水平,反復(fù)操作,使峰值穩(wěn)定在同一收縮高度作為對(duì)照值,然后給藥,觀察記錄曲線變化5min,換腸平滑肌,重復(fù)實(shí)驗(yàn)。更換腸管及藥液時(shí)更新臺(tái)氏液。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。記錄給藥前的平均收縮振幅和給藥后的平均收縮振幅,求算給藥之后的平均抑制率(%)。

2.3高效液相指紋圖譜共有色譜峰的確定[3]色譜條件:柱溫,25℃;流速,1.0mL·min-1;色譜柱,ZorbaxC18(4.6mm×250mm,5μm);內(nèi)標(biāo),甲基橙皮苷;進(jìn)樣量,10μL

氯仿提取物的檢測(cè)波長(zhǎng)254nm,梯度洗脫條件為水乙腈(0.01min78∶22;10min76∶24;35min65∶35;45min60∶40;65min50∶50;80min35∶65;85min78∶22)。

殘?jiān)崛∥锏臋z測(cè)波長(zhǎng)294nm,梯度洗脫條件為水乙腈甲醇(0.01min98∶1∶1;5min94∶5∶1;15min89∶10∶1;25min87∶12∶1;40min87∶12∶1;55min74∶25∶1;60min98∶1∶1)。

按照液相色譜條件對(duì)10份處方樣品進(jìn)行測(cè)定,其中IS為參照物色譜峰,見(jiàn)圖1。確定其中40個(gè)色譜峰為共有峰,得到與參照物色譜峰的相對(duì)峰面積。表1列出其中主要色譜相對(duì)峰面積值和10個(gè)樣品對(duì)離體兔腸的平均抑制率。

2.4以40個(gè)色譜峰的相對(duì)峰面積為自變量(X),對(duì)乙酰膽堿刺激的家兔離體十二指腸的抑制率為因變量(Y),進(jìn)行相關(guān)分析和回歸分析,相關(guān)分析結(jié)果見(jiàn)表2?;貧w方程為:Y=-11.029+157.199X3+2.764X25

A.氯仿提取物圖譜;B.氯仿萃取后提取物圖譜

圖1減味藿香正氣水(樣品5)HPLC圖譜(略)

Fig.1HPLCchromatogramsofJianweiHuoxiangZhengqiliquid(No.5)

表110個(gè)樣品共有色譜峰的相對(duì)峰面積和平均抑制率(略)

Tab.1Relativepeakareasandmeaninhibitionratesofcommonpeaksin10samples

表240個(gè)色譜峰的相對(duì)峰面積與抑制率相關(guān)分析結(jié)果(相關(guān)系數(shù))(略)

Tab.2Pearson''''scorrelationcoefficientsbetweenvaluesfrompharmacologicalexperimentand40independent

3結(jié)論

以40個(gè)減味藿香正氣水共有色譜峰為自變量,以對(duì)乙酰膽堿刺激的離體兔十二指腸的抑制率為因變量,進(jìn)行相關(guān)分析和回歸分析,色譜峰X3和X25與藥理作用呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)為正,并且X3相關(guān)系數(shù)顯著;從回歸方程可以得出,色譜峰X3和X25所代表的化學(xué)成分其量的增加能增強(qiáng)對(duì)乙酰膽堿刺激的家兔離體兔腸的抑制作用強(qiáng)度。確定色譜峰X3和X25所代表的化學(xué)物質(zhì)為減味藿香正氣水對(duì)家兔離體兔十二指腸抑制的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的一部分。其中,色譜峰X25所代表的化學(xué)成分為厚樸酚,這與藥味最佳配比研究中以厚樸為主藥相符。

【參考文獻(xiàn)】

[1]彭志輝,陳立峰,趙淑慎.正交設(shè)計(jì)法對(duì)藿香正氣水組方的研究[J].湖南中醫(yī)雜志,1995,11(2):38-41.

[2]李康,袁勁松,蘇薇薇,等.減味藿香正氣水藥味最佳配比的研究[J].遼寧中醫(yī)雜志,2006,33(7):792-793.

[3]李康,袁勁松,蘇薇薇,等.減味藿香正氣水指紋圖譜分析方法研究[J].遼寧中醫(yī)雜志,2006,33(12):1617-1618.

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