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食用菌多糖提取工藝

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食用菌多糖提取工藝

摘要:以平菇子實(shí)體為對象,探討了食用菌子實(shí)體多糖提取工藝,考察了料水比、浸提時(shí)間、浸提溫度、醇析濃度等因素對提取結(jié)果的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,水法提取的最佳工藝條件為:1:40料水比,100℃,提取3.0h,80%乙醇醇析;堿法提取的最佳工藝為:0.7mol/L氫氧化鈉,1:60料液比,100℃,提取5h,80%乙醇醇析。

關(guān)鍵詞:食用菌多糖;提取工藝;平菇

0前言

食用菌多糖被稱為“生物應(yīng)答效應(yīng)物”(BiologicalResponseModifier,簡稱BRM)。是一種能夠增強(qiáng)人體免疫功能的生物活性物質(zhì),對于遺傳性的疾病具有一定的治療效果。

本文以平菇子實(shí)體為研究對象,以水和堿為提取介質(zhì),探討了多糖的提取工藝,考察了主要影響因素對提取結(jié)果的影響,在單因子實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行了正交試驗(yàn),確定了最佳的提取工藝,以期能給食用菌子實(shí)體多糖的提取研究提供一些基礎(chǔ)性的參考。

1材料和方法

1.1材料

2.1.1原料

鮮灰平菇(唐平1號)子實(shí)體,從當(dāng)?shù)毓睫r(nóng)處選購。

2.2.2儀器及設(shè)備

2XZ-0.5真空泵、HH.S21-4數(shù)顯水浴鍋、101-0BS干燥箱、752型分光光度計(jì)、托盤扭力天平、美的多功能食物攪拌器、FC104電子天平、海爾冰柜等。

1.2方法

2.2.1實(shí)驗(yàn)方案

本實(shí)驗(yàn)采用溶劑浸提法,首先干燥平菇子實(shí)體,粉碎過篩,選擇合適的提取溶劑,考察提取時(shí)間、提取溫度、料液比、溶劑濃度、乙醇加量等因素對提取結(jié)果的影響,在單因子實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn),并確定最佳提取工藝。

2.2.2實(shí)驗(yàn)流程

(1)熱水浸提法:

原料→烘干(80℃,干燥4h以上)→粉碎→過篩(80目)→水浴浸提→真空抽濾→濃縮→除蛋白→醇沉多糖→脫色→干燥→稱重測含量

(2)氫氧化鈉提取法:

原料→烘干(80℃,干燥4h以上)→粉碎→過篩(80目)→浸提(NaOH溶液,96℃水浴種浸提2h)→真空抽濾→濃縮→除蛋白→醇沉多糖→脫色→干燥→稱重測含量

2.2.3多糖的測定:

粗多糖:采用稱重法,取潔凈平皿干燥至恒重,其重量記為M1,將粗多糖置于平皿中干燥至恒重,重量為M2,原料重為M,則:

粗多糖含量(%)=[(M2-M1)/M]╳100%

多糖:采用苯酚-硫酸法,以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2結(jié)果與討論

2.1熱水浸提法

影響熱水浸提法提取多糖的因素很多,主要有料水比,提取時(shí)間,提取溫度,乙醇醇析濃度等因素,為此分別進(jìn)行單因子試驗(yàn),在單因子試驗(yàn)基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn),并優(yōu)化了提取工藝,按L9(34)設(shè)計(jì)了四因素,三水平的正交試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1,表2所示。

由各因子平均指標(biāo),初步選定最優(yōu)方案為A1B3C3D3,即料水比為1:40,100℃,3.0h,80%乙醇醇析。2.2氫氧化鈉浸提法

由于堿法與水法的作用原理不完全相同,所以各因素的影響程度也不一樣,所得多糖的性質(zhì)、含量也不一樣,為此就各個(gè)因素分別進(jìn)行單因子試驗(yàn)。在此基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)正交試驗(yàn),選擇最優(yōu)方案,按L16(45)設(shè)計(jì)五因素,四水平試驗(yàn),結(jié)果見表3,表4。

3結(jié)論

4.1用熱水浸提多糖的最佳工藝條件是:料水比1:40,100℃,浸取3.0h,80%乙醇醇沉。平菇多糖的得率可達(dá)4.07%,比一般平菇多糖的提取率3.0%左右高出30個(gè)百分點(diǎn)。

4.2用堿法提取多糖的最佳工藝條件是:0.7mol/L氫氧化鈉,60倍堿量,100℃,浸提5h,80%乙醇醇析。此方法下提取的平菇多糖量可高達(dá)23.67%。

4.3水法和堿法對利用平菇提取多糖有較好的效果,可推廣應(yīng)用在不同食用菌多糖的提取中,這對于開發(fā)食用菌多糖的工業(yè)化生產(chǎn)有很大的參考價(jià)值,也為進(jìn)一步純化分析多糖及藥理研究打下基礎(chǔ)。

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