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【摘要】目的觀察金花茶種子不同提取物對(duì)激素相關(guān)性腫瘤體外抑制作用。方法采用噻唑藍(lán)比色法(MTT)檢測(cè)金花茶種子不同提取物對(duì)人宮頸癌HeLaS3細(xì)胞和人前列腺癌PC3細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果金花茶種子乙醇提取物、正丁醇部分和水溶部分都顯示了較強(qiáng)的抑制人宮頸癌HeLaS3細(xì)胞和人前列腺癌PC3細(xì)胞增殖的作用，其IC50分別為85.88，67.62，55.71μg/ml和63.06,56.20,68.53μg/ml，且抑制作用和樣品濃度呈量效關(guān)系。結(jié)論金花茶種子乙醇提取物的正丁醇部分和水溶部分在體外對(duì)激素相關(guān)性腫瘤具有抑制作用，為其抗癌活性的有效部位。

【關(guān)鍵詞】金花茶;宮頸癌;前列腺癌;HeLaS3細(xì)胞;PC3細(xì)胞

金花茶Camelliachrysantha(Hu)Tuyama系山茶科Theaceae山茶屬CamelliaLinn.金花茶組SectionchrysanthaChang植物，被列為國(guó)家一級(jí)、世界二級(jí)珍稀保護(hù)植物［1］。金花茶不僅有較高的觀賞價(jià)值，而且具有一定的藥用價(jià)值和營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。其葉和花為壯族民間用藥，主要用于治療咽喉炎、痢疾、高血壓病、便血、月經(jīng)不調(diào)［2,3］。金花茶葉是一種含有豐富營(yíng)養(yǎng)成分的山茶，含有多種微量元素和氨基酸，而咖啡堿含量低［4］。我們?cè)趯?duì)山茶屬植物抗腫瘤活性的研究中發(fā)現(xiàn)，金花茶種子的乙醇提取物具有較強(qiáng)的抗腫瘤作用。本研究將通過(guò)考察金花茶種子乙醇提取物不同萃取部位對(duì)人宮頸癌HeLaS3細(xì)胞和人前列腺癌PC3細(xì)胞增殖的影響，探討其抗癌活性的有效部位及量效關(guān)系。

1材料與方法

1.1金花茶的提取分離金花茶種子采集于廣西南寧，由廣西林業(yè)科學(xué)研究院高級(jí)工程師梁盛業(yè)鑒定。取金花茶種子100g，粉碎后用95%乙醇回流提取3次，3h/次，合并提取液，減壓濃縮成浸膏，加適量水分散，依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取，各萃取液分別濃縮至浸膏，得醋酸乙酯部分、正丁醇部分和水溶部分，減壓濃縮并真空干燥后得到各部分的浸膏，各浸膏用DMSO配成各濃度溶液備用。

1.2細(xì)胞系和培養(yǎng)液人宮頸癌HeLaS3細(xì)胞株和人前列腺癌PC3細(xì)胞株從HumanSciencesResearchResourceBank(日本人類科學(xué)基金會(huì),東京,日本)獲得，HeLaS3細(xì)胞培養(yǎng)于含有10%熱滅活小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液中，PC3細(xì)胞培養(yǎng)于含有10%熱滅活小牛血清的DMEM培養(yǎng)液中，37℃，5%CO2，飽和濕度條件下培養(yǎng)。選取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.3體外細(xì)胞增殖抑制實(shí)驗(yàn)噻唑藍(lán)比色法(MTT)檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況，將HeLaS3細(xì)胞和PC3細(xì)胞分別種于96孔培養(yǎng)板，每個(gè)孔細(xì)胞數(shù)為5×103，分別培養(yǎng)于RPMI1640培養(yǎng)液和DMEM培養(yǎng)液中，在37℃，5%CO2條件下培養(yǎng)24h。培養(yǎng)24h后，以PBS沖洗細(xì)胞，然后分別加入新的培養(yǎng)液和系列濃度的待測(cè)樣品。經(jīng)初步篩選后確定實(shí)驗(yàn)組設(shè)6個(gè)藥物濃度組，每組藥物的終濃度分別為5，10，20，40，80，160μg/ml，對(duì)照組加入同樣濃度的二甲基亞砜（DMSO），培養(yǎng)24h。培養(yǎng)結(jié)束前4h每孔加入20mlMTT溶液（5g/ml），離心，棄上清液，加入200mlDMSO充分溶解結(jié)晶物，酶標(biāo)儀測(cè)490nm處吸光度值。因?yàn)槲舛戎蹬c培養(yǎng)液中活細(xì)胞數(shù)成正比，所以通過(guò)吸光度值可以計(jì)算細(xì)胞存活百分率。

1.4統(tǒng)計(jì)分析以對(duì)照組中細(xì)胞存活率為100%，樣品組與其相比所得相對(duì)值為細(xì)胞存活百分率，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以±s表示，采用統(tǒng)計(jì)學(xué)t檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較分析，P<0.05為差異有顯著性。

2結(jié)果

用濃度分別為5，10，20，40，80，160μg/ml的金花茶種子的不同提取物處理HeLaS3細(xì)胞和PC3細(xì)胞，觀察不同濃度的樣品對(duì)HeLaS3細(xì)胞和PC3細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)金花茶種子乙醇提取物、正丁醇部分和水溶部分都顯示了較強(qiáng)的抑制HeLaS3細(xì)胞和PC3細(xì)胞增殖的作用（見(jiàn)表1），其IC50分別為85.88，67.62，55.71μg/ml和63.06，56.20，68.53μg/ml。其中，正丁醇部分和水溶部分的高濃度組（160μg/ml）對(duì)HeLaS3細(xì)胞和PC3細(xì)胞增殖的抑制率均達(dá)60%以上，且抑制率隨樣品濃度的加大而增加（各濃度組與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01），呈現(xiàn)出劑量效應(yīng)關(guān)系。表1金花茶各提取物對(duì)HeLaS3細(xì)胞和PC3細(xì)胞增殖的影響（略）

3討論

我們采用重組人雌（孕）激素受體基因酵母法對(duì)金花茶種子乙醇提取物進(jìn)行了雌（孕）激素活性試驗(yàn)，證明它們都具有明顯的雌（孕）激素活性，同時(shí)又有較強(qiáng)的抗雌（孕）激素活性，對(duì)雌（孕）激素受體具有雙向調(diào)節(jié)作用，是一種非常理想的選擇性雌（孕）激素調(diào)節(jié)劑［5,6］，引發(fā)我們對(duì)其抗激素相關(guān)性腫瘤（GonadalHormonesDependentTumour,GHDT）的研究。因?yàn)榫哂写萍に貥幼饔玫乃幬锬苤苯幼饔糜诖萍に厥荏w，通過(guò)影響激素平衡來(lái)抑制某些激素相關(guān)性腫瘤。

我們首先考察了金花茶不同植物部位抑制HeLaS3細(xì)胞和PC3細(xì)胞增殖的活性，在金花茶種子乙醇提取物、花蕾乙醇提取物、葉乙醇提物和葉水提取物中，金花茶種子乙醇提取物顯示了較強(qiáng)的抑制HeLaS3細(xì)胞和PC3細(xì)胞增殖的活性，為了確定其抗癌活性的有效部位，我們考察了金花茶種子乙醇提取物不同萃取部位對(duì)HeLaS3細(xì)胞和PC3細(xì)胞增殖的影響，結(jié)果表明金花茶種子乙醇提取物的正丁醇部分和水溶部分具有較強(qiáng)的抑制HeLaS3細(xì)胞和PC3細(xì)胞增殖的活性，初步確定為抗癌活性的有效部位。對(duì)有效部位化學(xué)成分的定量分析結(jié)果表明，正丁醇部分含總皂苷19.08%，總多酚6.92%，總黃酮5.36%，水溶部分含總皂苷17.36%，總多酚5.15%，總黃酮1.66%，其中哪些成分是抗癌活性的物質(zhì)基礎(chǔ)及其作用機(jī)理還有待進(jìn)一步研究。超級(jí)秘書網(wǎng)：

【參考文獻(xiàn)】

［1］梁盛業(yè),陸敏珠.中國(guó)金花茶栽培與開發(fā)利用［M］.北京:中國(guó)林業(yè)出版社,2005:1.

［2］黃燮才.金花茶開發(fā)利用概況及前景預(yù)測(cè)［J］.中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志,1994,1(6):10.

［3］王永奇,吳小娟,李紅冰,等.藥用山茶屬植物的研究［J］.大連大學(xué)學(xué)報(bào),2006,27(4):47.

［4］韋霄,蔣水元,蔣運(yùn)生,等.珍稀瀕危植物金花茶研究進(jìn)展［J］.福建林業(yè)科技,2006,33(3):169.

［5］吳小娟,李劍,劉蕓,等.重組雌激素受體基金酵母法對(duì)山茶子抗骨質(zhì)疏松活性部位的研究［J］.遼寧中醫(yī)藥雜志,2008,35(7):126.

［6］吳小娟,李劍,劉蕓,等.重組雌激素受體基金酵母法對(duì)山茶子拮抗孕激素作用的研究［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2008,19(8):1817.