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解救美羊羊

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解救美羊羊范文第1篇

關(guān)鍵詞:媒介素養(yǎng);媒介素養(yǎng)教育;大學(xué)生;高職生

一、關(guān)于我國(guó)大學(xué)生媒介素養(yǎng)狀況的調(diào)查研究

2012年,尹力發(fā)表了《回顧與反思:國(guó)內(nèi)高校媒介素養(yǎng)教育研究述評(píng)》一文,文章中回顧與反思了我國(guó)近些年的高校媒介素養(yǎng)教育研究成果,文章主要從高校媒介素養(yǎng)的實(shí)證調(diào)研、途徑與模式、高校媒介教育的不同環(huán)境下的狀況以及其他學(xué)科與高校媒介素養(yǎng)教育的交叉性與互動(dòng)性等四個(gè)維度進(jìn)行了闡述,在探討不足的同時(shí)又提出了我國(guó)高校媒介素養(yǎng)教育的展望和建議[2]。《2010年以來國(guó)內(nèi)大學(xué)生媒介素養(yǎng)教育研究綜述》一文的作者陳勇分析了我國(guó)未來媒介素養(yǎng)研究的趨勢(shì),他指出我國(guó)的大學(xué)生媒介素養(yǎng)教育研究仍處于發(fā)展階段,全面發(fā)展的態(tài)勢(shì)已比較明朗,未來也將會(huì)出現(xiàn)多元化的研究方法、領(lǐng)域和視覺[3]。姜燕在《微博時(shí)代高職院校媒介素養(yǎng)教育探討》的文章中指出媒介素養(yǎng)在微博時(shí)代的表現(xiàn)是傳統(tǒng)媒介素養(yǎng)的延伸,可以通過選擇、批判、理解、評(píng)估、反應(yīng)和思辨及生產(chǎn)和創(chuàng)造海量的微博碎片化信息來綜合體現(xiàn)[4]?!毒W(wǎng)絡(luò)新聞?dòng)绊懴麓髮W(xué)生網(wǎng)絡(luò)媒介素養(yǎng)教育研究》是由孟維穎撰寫的碩士學(xué)位論文,她在文中指出媒介素養(yǎng)教育在紛繁復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)媒介環(huán)境中的重要性,需要我們以學(xué)習(xí)為主要陣地來抵制在理解、使用和駕馭傳媒及內(nèi)容的偏差[5]。《媒介化生存——中國(guó)青年媒體素質(zhì)研究》是我國(guó)首批關(guān)于媒介素養(yǎng)教育的專著之一,在書中學(xué)者呂巧平對(duì)集中在兩個(gè)城市的8所大學(xué)和1996名在校大學(xué)生進(jìn)行了實(shí)證調(diào)查研究,探討了在大學(xué)生中開展媒介素養(yǎng)教育的必要性和可行性,這一專著的面世,積極推動(dòng)了我國(guó)高校媒介素養(yǎng)教育的研究實(shí)踐,同時(shí)對(duì)我國(guó)高校媒介素養(yǎng)教育的具體實(shí)施具有重要的探索意義。

二、關(guān)于媒介素養(yǎng)教育本土化研究

蔡尚偉、李朗以中國(guó)大眾傳媒的發(fā)展歷程為線索撰寫了《1949年以前的中國(guó)媒介素養(yǎng)教育萌芽——媒介素養(yǎng)教育的本土化考察》一文,文章探討了我國(guó)大眾媒介意識(shí)從初步培養(yǎng)、正式開始到發(fā)展形勢(shì),探討了學(xué)術(shù)界在以前關(guān)于媒介素養(yǎng)和媒介素養(yǎng)教育的研究,文中也初步考察了我國(guó)1949年以前的媒介素養(yǎng)萌芽,以此主線來探索研究我國(guó)媒介素養(yǎng)的本土化研究道路[6]?!段幕曇爸械闹黧w性建構(gòu)——對(duì)中國(guó)青少年媒介素養(yǎng)教育本土化的思考》的作者牛鴻英指出,青少年能從實(shí)用層面來了解、消費(fèi)和運(yùn)用媒介不足以體現(xiàn)中國(guó)青少年媒介素養(yǎng)的基本目標(biāo),還應(yīng)該引導(dǎo)青少年通過運(yùn)用媒介,充分利用媒介來促進(jìn)形成他們獨(dú)特文化,成為具有文化價(jià)值觀念的主體性的人。中國(guó)青少年媒介素養(yǎng)教育更應(yīng)該承載民族復(fù)興的重任,這才是我國(guó)的本土化策略,而不是我們偏安一隅的被動(dòng)防守,更不是僭越全球的妄自尊大[7]。趙世環(huán)認(rèn)為:“媒介素養(yǎng)教育應(yīng)盡快與國(guó)際接軌,成為大學(xué)的通識(shí)教育[8]?!睂O麗娜等學(xué)者發(fā)表的《大學(xué)生媒介素養(yǎng)教育的國(guó)際視野與本土化研究》一文中提出要從本土化人的視角,立足我國(guó)國(guó)情,對(duì)我國(guó)的媒介素養(yǎng)教育展開研究,要完善中國(guó)特色的媒介素養(yǎng)教育體系,并把“保護(hù)主義”與“非保護(hù)主義”相結(jié)合[9]。學(xué)者李冬霞在《我國(guó)網(wǎng)民新媒介素養(yǎng)研究綜述》中指出,目前學(xué)術(shù)界尋求媒介素養(yǎng)教育理論的突破和創(chuàng)新應(yīng)該立足于教育學(xué)、心理學(xué)、政治學(xué)、社會(huì)學(xué)等多個(gè)學(xué)科領(lǐng)域[10]。目前,西方媒介素養(yǎng)教育的優(yōu)秀理論研究促進(jìn)了我國(guó)的大學(xué)生媒介素養(yǎng)教育,我們也根據(jù)我國(guó)的國(guó)情進(jìn)行了本土化的改造,體現(xiàn)出了媒介素養(yǎng)教育普適性和特殊性相融合的特征[11]。

解救美羊羊范文第2篇

關(guān)鍵詞:新傳媒時(shí)代;媒介;人力資源;培訓(xùn)

在社會(huì)化媒體盛行的當(dāng)今社會(huì),除了資本、技術(shù)設(shè)備、受眾市場(chǎng)這些競(jìng)爭(zhēng)因素外,人才也是媒介發(fā)展過程中至關(guān)重要的因素,扮演著中流砥柱的角色,“媒體竟?fàn)幍年P(guān)鍵和核心是人,媒體競(jìng)爭(zhēng)就是人才競(jìng)爭(zhēng)”[1]這已是業(yè)界的共識(shí)。但是我國(guó)媒介行業(yè)在對(duì)待人才上一直是“重管理,輕培養(yǎng)”。

一、當(dāng)前我國(guó)媒介人才培養(yǎng)的現(xiàn)狀概述

以來,我國(guó)文化傳媒事業(yè)實(shí)行“事業(yè)性質(zhì),企業(yè)管理”的發(fā)展模式,受體制優(yōu)勢(shì)和國(guó)家政策的扶持,各媒介組織對(duì)人才大都是按照國(guó)家事業(yè)單位的辦法來進(jìn)行管理,對(duì)于媒介人才培養(yǎng)缺乏足夠的認(rèn)識(shí)。

近些年,各種新媒體異軍突起,打破了以往的傳媒格局。以微博、微信為代表的社會(huì)媒體迅猛發(fā)展,它不僅改變了傳統(tǒng)的傳播模式,也大大解放了受眾的被動(dòng)地位,這使得各個(gè)媒介對(duì)受眾市場(chǎng)的爭(zhēng)奪更加激烈;同時(shí),中外合作交流與經(jīng)濟(jì)貿(mào)易的發(fā)展,國(guó)外許多文化產(chǎn)品和媒介企業(yè)紛紛進(jìn)入中國(guó)傳媒市場(chǎng),這更加激發(fā)了各傳媒集團(tuán)間的競(jìng)爭(zhēng)。

鑒于此,媒介集團(tuán)乃至整個(gè)媒介行業(yè)開始從各個(gè)方面進(jìn)行改革,以提高自身的競(jìng)爭(zhēng)力,作為媒介行業(yè)發(fā)展的核心動(dòng)力,媒介人才受到業(yè)界的重視,對(duì)于媒介優(yōu)秀人才爭(zhēng)奪也更加的激烈。但是因?yàn)樵缙诮?jīng)驗(yàn)的不足,許多媒介機(jī)構(gòu)在人才培養(yǎng)上一般都是直接借鑒或套用其他產(chǎn)業(yè)的管理辦法,早在21世紀(jì)之初,就有學(xué)者指出:“許多新聞單位中的人事部門觀念保守,而且還在沿用幾十年一貫制的人事組織管理模式,人力資源管理已成為傳媒業(yè)的薄弱環(huán)節(jié)?!盵2]雖然也取得了一些成效,但是隨著媒介產(chǎn)業(yè)的迅速發(fā)展,也暴露了諸多的局限性,許都研究成果大都是側(cè)重于已有人才資源的管理和整合上,而對(duì)于潛在的媒介人才資源開發(fā)和培訓(xùn)討論不足,整個(gè)行業(yè)缺乏自成體系的理論指導(dǎo),這種“重管理,輕培養(yǎng)”的模式依然盛行。

二、媒介人才“重管理、輕培養(yǎng)”原因分析

社會(huì)化媒體環(huán)境里媒介人才培養(yǎng)的重要性日益凸顯,但是目前我國(guó)對(duì)媒介人才培訓(xùn)有所欠缺,這種現(xiàn)實(shí)存在的矛盾,不利于我國(guó)媒介產(chǎn)業(yè)的發(fā)展和壯大。

一方面媒介人才培訓(xùn)成本較高,作為企業(yè)化管理的媒介組織因?yàn)榭紤]到成本投入,很少會(huì)組織專門的培養(yǎng),即使有其范圍也是有限。而從媒介人才自身來說,他們的文化素質(zhì)、專業(yè)技能的起點(diǎn)普遍較高,鑒于時(shí)間、精力等各種因素的限制,就業(yè)之后個(gè)人從事脫產(chǎn)培訓(xùn)的意愿相對(duì)較低,但是媒介行業(yè)和組織又要求媒介人才不斷的學(xué)習(xí),掌握新技能,這使得兩者存在一定的矛盾性。有學(xué)者分析指出:許多媒介人才因?yàn)槊浇榻M織忽視人才培訓(xùn)或者不重視人才潛能積累和開發(fā),以致得不到應(yīng)有的培養(yǎng),最后不得不選擇離開,或投奔重視人才培養(yǎng)的媒介,或者離職深造。[3]另一方面,我國(guó)的媒介組織在人力資源的管理上仍然實(shí)行的是雙軌制和行政化層級(jí)管理的模式。這使得媒介組織的大部分的精力和培訓(xùn)都投放在少數(shù)體制內(nèi)的人員上面,而對(duì)于數(shù)量眾多的編外人員仍然側(cè)重于管理上。傳統(tǒng)觀念認(rèn)為許多被選為培訓(xùn)對(duì)象的媒介人才,或是單純的為了獲取某種技能,或是為了獲取某種利益,作為一項(xiàng)任務(wù)而應(yīng)付草草的應(yīng)付了之,很難實(shí)現(xiàn)培訓(xùn)真正的效果和目的。

三、提高媒介人才培養(yǎng)的策略

加強(qiáng)對(duì)媒介人力資源的培訓(xùn)既是完善媒介人力資源管理的重要內(nèi)容,也是提升自身競(jìng)爭(zhēng)力的重要方面。有學(xué)者指出:媒介行業(yè)是一項(xiàng)依靠智力的工作,任何一家媒體一旦形成人才優(yōu)勢(shì),勢(shì)必會(huì)在短時(shí)間內(nèi)創(chuàng)造出強(qiáng)大的影響力?!盵4]具體來說,可以從以下幾個(gè)方面進(jìn)行媒介人才培養(yǎng)。

1、改變傳統(tǒng)觀念,提高對(duì)人才培養(yǎng)的重視度

當(dāng)今,無(wú)論是媒介管理者還是普通工作人員乃至媒介行業(yè)都應(yīng)該轉(zhuǎn)變那種人才培養(yǎng)是“賠本的買賣”的觀念,提高對(duì)人才培養(yǎng)重要性的認(rèn)識(shí),雙方都要舍得花錢花時(shí)間。對(duì)于人才培養(yǎng)的目的和所能帶來競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)都有一個(gè)清晰的認(rèn)識(shí)。因?yàn)楝F(xiàn)代意義上的人才培養(yǎng)不僅僅是現(xiàn)有人才在業(yè)務(wù)和專業(yè)技能的提升,而是對(duì)已有媒介人才資源的再度開發(fā),是媒介組織或?qū)θ瞬诺囊环N肯定與厚望,以實(shí)現(xiàn)媒介組織與人員在情感、事業(yè)、價(jià)值等層面上的高度融合。從管理層面上講,這也是激勵(lì)機(jī)制的一種形式,更有助于提高員工對(duì)企業(yè)組織的忠誠(chéng)度。

2、增強(qiáng)培養(yǎng)功能意識(shí),謀求與媒介集團(tuán)的“三維”契合

眾所周知,媒介也是一個(gè)更新?lián)Q代很快的信息產(chǎn)業(yè),這需要員工緊跟時(shí)代的步伐,掌握最新的行業(yè)動(dòng)態(tài),而人才培養(yǎng)是他們快速獲取知識(shí)的最佳途徑。作為參加培養(yǎng)的媒介人才,應(yīng)當(dāng)適應(yīng)培養(yǎng)功能角色的轉(zhuǎn)變,不僅僅是把培養(yǎng)局限在獲取某種特定技能上,而是從自身的實(shí)際情出發(fā),結(jié)合自己的業(yè)務(wù)需要,有計(jì)劃有方向的去學(xué)習(xí)、總結(jié),以實(shí)現(xiàn)知識(shí)技能的積累和創(chuàng)造;同時(shí)樹立危機(jī)意識(shí),積極的應(yīng)對(duì)未來工作中出現(xiàn)的各種風(fēng)險(xiǎn),既增強(qiáng)現(xiàn)有的業(yè)務(wù)能力,又為能滿足以后的工作需求,通過培養(yǎng)實(shí)現(xiàn)與媒介組織在“感情、事業(yè)、價(jià)值”三個(gè)維度上的契合。

3、加強(qiáng)與高校的合作,提高自身的理論水平

高校是培養(yǎng)媒介人力資源的搖籃,也是媒介產(chǎn)業(yè)發(fā)展的后援地。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),目前國(guó)內(nèi)注冊(cè)高校中開設(shè)新聞學(xué)及相關(guān)專業(yè)的院校約占85%。雖然一些學(xué)者認(rèn)為我國(guó)高校的新聞傳播教育事業(yè)尚有一些弊端,但是高校在媒介人才培養(yǎng)上仍然具有其他媒介機(jī)構(gòu)無(wú)法比擬的優(yōu)勢(shì)?,F(xiàn)代高校積不僅聚了傳媒業(yè)內(nèi)諸多的學(xué)術(shù)大家,而且還是許多前言理論的開拓者,是相關(guān)理論的集散地。媒介集團(tuán)可以和具有媒介專業(yè)方面研究的高校合作,共同培養(yǎng)人才,使參加培訓(xùn)的人員通過參與高校開辦的學(xué)術(shù)探討和講座,或是系統(tǒng)的課程學(xué)習(xí),進(jìn)行“回爐”再教育,甚于還能與業(yè)內(nèi)的專家學(xué)者交流討論,借鑒和學(xué)習(xí)他們的研究成果和經(jīng)驗(yàn),結(jié)合自身的工作實(shí)踐,不斷提升理論修養(yǎng),為以后的實(shí)際工作提供理論指導(dǎo)和支持。

現(xiàn)代意義上的媒介人才已不是單純的指從事媒介工作的相關(guān)人員,而是指從事媒介生產(chǎn)和管理的人員的腦力和體力的總和。而優(yōu)秀的人才資源是長(zhǎng)期學(xué)習(xí)和積累的結(jié)果,制定合理的人才培訓(xùn)戰(zhàn)略規(guī)劃,提高新聞從業(yè)人員的綜合素質(zhì),是媒介產(chǎn)業(yè)科學(xué)發(fā)展的有力保證。[5]我國(guó)的媒介人才培養(yǎng)應(yīng)該得到長(zhǎng)期深入的規(guī)劃。(作者單位:湖南大學(xué)新聞傳播與影視文化藝術(shù)學(xué)院)

參考文獻(xiàn):

[1] 高德蒙.傳媒人力資源市場(chǎng)化的困境[J].傳媒,2004,(2).

[2] 曹鵬.人力資源管理已是傳媒業(yè)最薄弱的環(huán)節(jié)[J].新聞?dòng)浾撸?002,(7).

[3] 宋寒.媒介人才流失的原因及對(duì)策[J].傳媒觀察,2009(06)

解救美羊羊范文第3篇

(大連海洋大學(xué),遼寧 大連 116023)

摘要:采用中性蛋白酶對(duì)海馬粉進(jìn)行酶解獲得酶解液,并對(duì)酶解液的抗氧化活性、抑菌活性和抗疲勞活性進(jìn)行了測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,海馬酶解液對(duì)DPPH的清除率為:雄海馬45.2%,雌海馬36%;清除羥自由基率為:雄海馬81.7%,雌海馬80.0%;超氧陰離子清除率為:雄海馬46.0%,雌海馬34.4%。海馬酶解液同時(shí)具有抑菌活性,通過濾紙片法可以看出海馬酶解液對(duì)大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌和變形桿菌的抑制性比較強(qiáng),而對(duì)金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的抑制性較弱。海馬酶解液還具有抗疲勞活性,通過小鼠負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)檢測(cè)海馬中性蛋白酶酶解液的抗疲勞活性,實(shí)驗(yàn)組游泳時(shí)間平均為143 min,而對(duì)照組的游泳時(shí)間為91 min,相比之下實(shí)驗(yàn)組比對(duì)照組高出52 min。進(jìn)一步的研究結(jié)果還表明,海馬酶解液具有增加小鼠游泳耐力、增加小鼠血清中SOD活力、降低血清中MDA和尿素以及降低血乳酸的作用。

關(guān)鍵詞 :海馬;中性蛋白酶;抗氧化活性;抑菌活性;抗疲勞活性

利用海洋生物資源進(jìn)行藥物開發(fā)的系統(tǒng)研究始于20世紀(jì)60年代。70-80年代開始了大規(guī)模篩選,并發(fā)現(xiàn)了多種有生物活性的化合物,到20世紀(jì)90年代,則有多個(gè)海洋生物新藥進(jìn)入臨床實(shí)驗(yàn)。海馬(Hippocampus)作為刺魚目海龍科動(dòng)物,還是一種具有較高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的名貴中藥,具有強(qiáng)身健體、補(bǔ)腎壯陽(yáng)、舒筋活絡(luò)、消炎止痛、鎮(zhèn)靜安神、止咳平喘等藥用功能,在中藥經(jīng)典著作中均有記載,歐洲從18世紀(jì)就已經(jīng)開始將海馬入藥。海馬中含有豐富的氨基酸、蛋白質(zhì)、微量元素及高碳多烯不飽和脂肪酸;具有抗癌作用、性激素樣作用、抗疲勞作用和提高機(jī)體免疫力、提高心肌細(xì)胞的收縮功能等,有待在食品、醫(yī)藥等方面進(jìn)行研究開發(fā)[1]。

目前,市場(chǎng)上有許多關(guān)于海馬壯陽(yáng)功效的產(chǎn)品,如泌陽(yáng)春海馬膠囊,實(shí)驗(yàn)表明具有明顯提高機(jī)體性功能的藥理作用[1]。但是關(guān)于海馬的抗氧化活性和抗疲勞活性報(bào)道的較少,報(bào)道較多的是海馬的性激素樣作用,例如用5種海馬的乙醇提取物,研究表明,灌服5種海馬的乙醇提取物后,雄性小鼠的數(shù)和成活率增加,但對(duì)正常小鼠的性腺和性器官幾乎無(wú)影響。

本實(shí)驗(yàn)先利用中性蛋白酶對(duì)海馬進(jìn)行酶解,對(duì)海馬酶解液進(jìn)行抗氧化活性、抑菌活性和抗疲勞活性分別進(jìn)行了測(cè)定。

1實(shí)驗(yàn)部分

1.1儀器與試劑

1.1.1試劑與材料海馬(克氏海馬)為雌、雄海馬,均購(gòu)自大連美羅大藥房;硫酸銅、硫酸鉀、濃硫酸、氫氧化鈉、硼酸溶液、冰醋酸均為分析純;中性蛋白酶(250 g,Beijing Solarbio);乙腈(色譜純,百靈威科技有限公司); N,N-二甲基甲酰胺(分析純,天津博迪化工股份有限公司)。

金黃色葡萄球菌(Staphylococcus),變形桿菌(Bacterium Proteus),枯草桿菌(Bacillus Subtilis),大腸桿菌(Escherichia coli),產(chǎn)氣桿菌(clostridium perfingens)均來自大連海洋大學(xué)食品工程學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室;超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)20130406)、丙二醛(MDA)測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)20130406)、尿素氮(BUN)測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)20130410)、乳酸(LD)測(cè)定試劑盒(生產(chǎn)批號(hào)20130417) 購(gòu)于南京建成生物研究所。DPPH,濃H2SO4,Tris-HCl緩沖溶液,95%乙醇,水楊酸,鹽酸,鄰苯三酚,磷酸二氫鈉,磷酸氫二鈉,中性蛋白酶,胰蛋白酶酶解,牛肉膏,瓊脂,無(wú)水乙醇,氯化鈉,葡萄糖,鹽酸,氫氧化鈉等均為分析純,20只昆明小鼠(清潔級(jí),大連醫(yī)科大學(xué)提供),PBS緩沖液,鼠糧,木屑,鉛絲。緩沖溶液和實(shí)驗(yàn)室用水均用Milli-Q凈化處理器制備。

1.1.2儀器與設(shè)備Milli-Q超純水凈化儀(Millipore公司,美國(guó))。高速多功能粉碎機(jī)(上海冰都有限公司)。Pb-10型pH計(jì)(德國(guó)賽得利斯Sartorius)。TGL-16M高速臺(tái)式冷凍離心機(jī)(長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司),數(shù)顯恒溫水浴鍋(常州國(guó)華電器有限公司)。消化爐(Buchi Digestion Unit K-424),蒸餾儀(Buchi Distillation Unit K-350)。SP-752紫外分光光度計(jì)(上海光譜有限公司),旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠),YXQ-SG42-280手提式壓力蒸汽滅菌鍋,超凈工作臺(tái)(SW-CJ-1F),電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠)。

1.2海馬樣品的制備及溶液配制方法

將海馬雌雄分開,剪碎,用高速粉碎機(jī)將其粉碎,得到雌雄海馬粉末樣品,碎屑,稱重,將其裝入棕色廣口瓶中,備用。

準(zhǔn)確稱取0.500 0 g的海馬粉末,加入配制好的磷酸鹽緩沖溶液100 mL,加入一定量的酶,在水浴鍋里反應(yīng)一定時(shí)間,反應(yīng)完后放入100 ℃的水浴鍋中滅酶10 min,等冷卻到室溫后將酶解液過0.45 μm濾膜過濾,4 ℃冰箱中保存,作為樣品儲(chǔ)備液備用。

1.3海馬中蛋白質(zhì)以及灰分含量的測(cè)定

1.3.1海馬中蛋白質(zhì)含量的測(cè)定將海馬樣品進(jìn)行消化:將樣品進(jìn)行分組,雄海馬粉末,雄海馬碎屑,雌海馬粉末,雌海馬碎屑。分別準(zhǔn)確稱取海馬樣品0.500 0 g,小心移入干燥潔凈的500 mL消化管,然后加入研細(xì)的硫酸銅0.500 0 g,硫酸鉀10.000 0 g和濃硫酸20 mL,空白組除了不加樣品外其他和實(shí)驗(yàn)組一樣,輕輕搖勻后放入電路中加熱,至液體變?yōu)樗{(lán)綠色透明后停止。

樣品的蒸餾與滴定:分別將消化完全的消化液冷卻后,完全轉(zhuǎn)入100 mL容量瓶中,加蒸餾水至刻度,搖勻。準(zhǔn)確移取消化稀釋液10 mL于蒸餾儀內(nèi)的消化管中,再加入10 mL,400 g/L氫氧化鈉溶液使其呈強(qiáng)堿性。蒸餾儀中的冷凝管下端預(yù)先插入盛有10 mL,40 g/L硼酸吸收液的液面下,吸收液中帶有混合指示劑,蒸餾5 min后停止。餾出液用0.1 mol/L HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至微紅色為終點(diǎn)。同時(shí)做空白試驗(yàn)。

結(jié)果計(jì)算:海馬種中蛋白質(zhì)的含量按下式計(jì)算:

式中: c——HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,mol/L;

V1——滴定樣品吸收液時(shí)消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積,mL;

V2——滴定空白吸收液時(shí)消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積,mL;

m——樣品質(zhì)量,g;

M——0.5N2摩爾質(zhì)量,14.01g/moL;

F——氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù)(F=6.25)。

1.3.2海馬中灰分含量的測(cè)定分別準(zhǔn)確稱取雄海馬粉末、碎屑各1 g,雌海馬粉末、碎屑各1 g于已知質(zhì)量的坩堝中,經(jīng)預(yù)處理后的海馬置于調(diào)溫電爐上以小火加熱使試樣充分碳化至無(wú)煙為止。將碳化好裝有試樣的坩堝用坩堝鉗移至高溫爐中,在(550±25)℃下灼燒4 h,待高溫爐爐溫降至200 ℃以下后取出坩堝,冷卻至室溫。

結(jié)果計(jì)算:海馬中灰分的含量按下式計(jì)算:

灰分

式中:X——樣品中總灰分的含量;

m1——空坩堝的質(zhì)量,g;

m2——樣品加空坩堝的質(zhì)量,g;

m3——?dú)埢壹涌折釄宓馁|(zhì)量,g。

1.4海馬酶解液的活性研究

1.4.1海馬酶解液抗氧化活性的研究海馬酶解液清除DPPH的能力:準(zhǔn)確量取2 mL海馬酶解液,然后加入2 mL所配制的DPPH溶液并混合均勻后,25 ℃水浴反應(yīng)30 min,移入比色皿中517 nm測(cè)其吸光度Ai,同時(shí)測(cè)定2 mL樣液加入2 mL乙醇25 ℃水浴反應(yīng)30 min后的吸光度Aj,2 mL的DPPH加2 mL的乙醇25 ℃反應(yīng)30 min的吸光度A0。則海馬酶解液的DPPH清除率按下式計(jì)算:

式中:Ai——樣品加入DPPH后溶液的吸光度。

Aj——樣品加入乙醇后溶液的吸光度。

Ao——空白溶液的吸光度。

海馬酶解液清除羥自由基的能力:準(zhǔn)確量取海馬酶解液2 mL,然后加入3 mmol/L的FeSO4 2 mL,6 mmol/L的水楊酸-乙醇2 mL,最后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.75%的雙氧水2 mL啟動(dòng)反應(yīng),在37 ℃反應(yīng)30 min,以蒸餾水為參比,在510 nm下測(cè)吸光度,考慮到樣本本身的吸光度Ai,取蒸餾水2 mL,3 mmol/L的FeSO4 2 mL,6 mmol/L的水楊酸-乙醇2 mL和樣液2 mL作為本底吸收Aj, 取蒸餾水2 mL,3 mmol/L的FeSO4 2 mL,6 mmol/L的水楊酸-乙醇2 mL,最后加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3.75%的雙氧水2 mL啟動(dòng)反應(yīng),37 ℃反應(yīng)30 min的吸光度A0。則海馬酶解液對(duì)羥基自由基的清除率按下式計(jì)算:

式中:Ai——樣品中加入FeSO4,水楊酸-乙醇和雙氧水后溶液的吸光度。

Aj——樣品中加入FeSO4,水楊酸-乙醇后溶液的吸光度,即本底吸收。

Ao——不加樣品,空白溶液的吸光度。

海馬酶解液清除超氧離子自由基的能力:取海馬酶解液1 mL加入pH為8.2,0.05 mol/L的tris-HCl緩沖溶液4.5 mL,在25 ℃水浴中保溫20 min后,加入0.5 mL 25 mmol/L鄰苯三酚,混勻后,在25 ℃中保溫5 min,用1 mL 8 mmol/L的HCl終止反應(yīng)。以蒸餾水作為空白對(duì)照為A0,在320 nm下測(cè)吸光度值A(chǔ)i,考慮到樣本本身的吸光度,加入0.05 mol/L的tris-HCl緩沖溶液4.5 mL,在25 ℃水浴中保溫20 min后,加入0.5 mL的水,混勻后,在25 ℃中保溫5 min,用1 mL 8 mmol/L的HCl終止反應(yīng),在320 nm下測(cè)吸光度值A(chǔ)j。則海馬酶解液對(duì)超氧陰離子自由基的清除率按下式計(jì)算:

式中:Ai——樣品加入tris-HCl緩沖溶液,鄰苯三酚和HCl后溶液的吸光度。

Aj——樣品加入tris-HCl緩沖溶液,HCl后溶液的吸光度,即本底吸收。

Ao——不加樣品,空白溶液的吸光度。

1.4.2海馬酶解液的抑菌活性

培養(yǎng)基的制作:取牛肉膏3 g,蛋白胨10 g,NaCl 5 g,瓊脂15~20 g,水1 L,調(diào)pH值到7.0~7.2之間,加熱融化,然后在121 ℃滅菌20 min后備用。

菌懸液的配制:從經(jīng)過活化的菌體斜面上挑取一環(huán)菌體接種于相應(yīng)的液體培養(yǎng)基上,放入恒溫震蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,分別吸取各供試液0.5 mL,加入無(wú)菌水稀釋,備用。

平涂法接種:在無(wú)菌操作臺(tái)里,將融化好的培養(yǎng)基均勻的倒在平板上,等培養(yǎng)基冷卻好后,在培養(yǎng)皿的底部用記號(hào)筆劃出均勻的區(qū)域,點(diǎn)燃酒精燈,將三角玻璃棒進(jìn)行滅菌,在將酒精燈旁分別用移液槍取出100 μL的五種菌懸液,用三角玻璃棒將菌懸液均勻的涂布在培養(yǎng)基上。

濾紙片法測(cè)海馬酶解液的抑菌活性:經(jīng)平涂接種發(fā)后,當(dāng)培養(yǎng)基上的菌懸液完全滲透到培養(yǎng)基上時(shí),用無(wú)菌鑷子將小濾紙片輕輕的貼在平板上,濾紙片一旦貼上就不可拿起,然后取酶解液樣品和75%乙醇(作為陽(yáng)性對(duì)照)各10 μL滴在濾紙片上,每個(gè)平板貼6張濾紙片,一張為空白對(duì)照,每張濾紙片的間距不得少于24 mm。待干后將放有樣品的培養(yǎng)皿倒過來放在恒溫培養(yǎng)箱里培養(yǎng)24 h后觀察抑菌圈的大小。

1.4.3海馬酶解液的抗疲勞活性實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)與給藥:昆明種小鼠20只,體重18~22 g。隨機(jī)分為兩組,分組后飼養(yǎng)觀察3 d,剔除不合格個(gè)體后按小鼠體重平均分為兩組給藥,空白對(duì)照組灌胃PBS緩沖液0.2 mL/d,陽(yáng)性對(duì)照組灌胃中性蛋白酶的海馬酶解液0.2 mL/d。連續(xù)灌胃15 d,實(shí)驗(yàn)期間小鼠自由攝食飲水。

酶解液對(duì)小鼠游泳時(shí)間的影響以及體內(nèi)指標(biāo)的變化:給藥第15 d后,末次灌胃半小時(shí)后進(jìn)行負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)。小鼠負(fù)重為小鼠體重5%的鉛絲,將兩組小鼠分別放入兩個(gè)水溫(25±1) ℃、水深40 cm的水槽中同時(shí)游泳,記錄小鼠從入水至運(yùn)動(dòng)疲勞發(fā)生時(shí)的游泳時(shí)間。以小鼠頭部沒入水面以下7 s不再上浮判定為疲勞。

1.4.3.1小鼠血清SOD和MDA的測(cè)定小鼠連續(xù)灌胃15 d,在末次灌胃30 min后,小鼠自由游泳5 min后取出,斷頭取血。血樣置冰箱靜置后,3 500 r/min離心10 min,取上清液,分別按照SOD測(cè)定試劑盒MDA測(cè)定試劑盒說明書方法測(cè)定實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組血清中SOD和MDA含量。

1.4.3.2小鼠肌乳酸、血清尿素含量的計(jì)算取斷頭取血的血樣,3 500 r/min離心10 min,取上清液,按照LD測(cè)定試劑盒說明書方法測(cè)定LD。按照BUN測(cè)定試劑盒說明書方法測(cè)定斷頭取血所得的血清中BUN含量。

2結(jié)果與討論

2.1海馬中蛋白質(zhì)含量測(cè)定

海馬中蛋白質(zhì)含量測(cè)定結(jié)果見表1,由結(jié)果可以看出雄海馬粉末蛋白質(zhì)含量為55.83%,雌海馬粉末的蛋白質(zhì)含量為49.00%。蛋白質(zhì)在人體含量的多少?zèng)Q定了物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的高低的重要指標(biāo),從表中可以看出海馬蛋白質(zhì)含量高達(dá)52?42%,但是本實(shí)驗(yàn)采用的蛋白質(zhì)含量的測(cè)定方法為凱氏定氮法,屬于元素分析的范疇,因此,從測(cè)定結(jié)果看蛋白質(zhì)含量較高,但是考慮到海馬體內(nèi)還含有其他的含氮生物分子,該結(jié)果只是作為隨后的氨基酸分析的依據(jù)。

2.2海馬中灰分含量測(cè)定

海馬中灰分含量測(cè)定結(jié)果見表2。結(jié)果表明,雌雄海馬的灰分分別為12.3%,12.6%。雌雄海馬的灰分含量相差不大,雌雄海馬灰分的平均含量為12.45%。

2.3海馬中性蛋白酶酶解液的活性研究

2.3.1海馬酶解液抗氧化活性

2.3.1.1海馬酶解液對(duì)DPPH的清除率從表3可以看出海馬酶解液對(duì)DPPH有一定的清除能力,其清除能力與多肽和水解的氨基酸有關(guān)。其中,雄海馬的中性蛋白酶酶解液對(duì)DPPH的平均清除率為45.2%;雌海馬的中性蛋白酶酶解液對(duì)DPPH的平均清除率為36.0%。

2.3.1.2海馬酶解液對(duì)羥基自由基的清除率通過表4可以看出海馬酶解液對(duì)·OH有顯著的清除效果。其中,雄海馬的中性蛋白酶酶解液對(duì)·OH的清除率為81.7%;雌海馬的中性蛋白酶酶解液對(duì)·OH的清除率為80.03%;可以看出,雄海馬酶解液對(duì)·OH的清除率要好于雌海馬酶解液。

2.3.1.3海馬酶解液對(duì)超氧陰離子自由基的清除率通過表5可以看出,海馬酶解對(duì)O2-有一定的清除能力。其中,雄海馬的中性蛋白酶酶解液對(duì)O2-的清除率為46.0%;雌海馬的中性蛋白酶酶解液對(duì)O2-的清除率為34.4%。通過比較表3-12兩組數(shù)據(jù)可以看出,雄海馬酶解液對(duì)O2-的清除率要高于雌海馬酶解液。

2.3.2抑菌活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果通過表6的數(shù)據(jù)可以看出,海馬酶解液對(duì)大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌和變形桿菌的抑制性比較強(qiáng),而對(duì)金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的抑制性不是很強(qiáng)。其中對(duì)變形桿菌抑制作用最強(qiáng)的是雄海馬的中性蛋白酶酶解液;對(duì)枯草桿菌抑制作用最強(qiáng)的是雄海馬的中性蛋白酶酶解液;對(duì)產(chǎn)氣桿菌的抑制,雌雄海馬的中性蛋白酶酶解液作用強(qiáng)度基本相同;對(duì)大腸桿菌的抑制作用最強(qiáng)的是雄海馬的中性蛋白酶酶解液;但是每一種樣品都不可能對(duì)所有菌種均有抑制作用,整體來看海馬中性蛋白酶酶解液有一定的抑菌活性,可以用于進(jìn)一步的研究。

從上面四組表格可以看出這樣一個(gè)共性:雄海馬的抗氧化活性和抑菌活性均優(yōu)于雌海馬,原因可能是雄海馬有育兒的義務(wù),體內(nèi)的優(yōu)質(zhì)蛋白要高與雌海馬。這與前面測(cè)得的雄海馬的蛋白質(zhì)含量高于雌海馬的結(jié)果是一致的。

2.3.3抗疲勞活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果灌服海馬酶解液對(duì)小鼠游泳時(shí)間的影響見表7,可以看出,連續(xù)灌服海馬酶解液15 d對(duì)小鼠的體重略有變化,但是不是很顯著。從表中可以看出,灌服海馬酶解液的實(shí)驗(yàn)組小鼠的游泳時(shí)間達(dá)到143 min,極顯著高與對(duì)照組93 min。小鼠游泳時(shí)間的延長(zhǎng),表明海馬酶解液能延緩運(yùn)動(dòng)性疲勞出現(xiàn)的時(shí)間。但是僅憑運(yùn)動(dòng)時(shí)間還不足以說明海馬酶解液具有運(yùn)動(dòng)性抗疲勞的作用,還需要一些生化指標(biāo)來說明。

2.3.3.1海馬酶解液對(duì)小鼠血清SOD、MDA的影響總超氧化物歧化酶(Total Superoxide Dismutase,T-SOD)是一種新型的酶制劑,廣泛存在于需氧原核生物和真核生物中,能夠清除體內(nèi)的活性氧自由基。在機(jī)體代謝過程中會(huì)產(chǎn)生大量的活性氧和自由基,它可攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸,引起脂質(zhì)過氧化作用,并因此形成脂質(zhì)過氧化物。如醛基、酮基、羥基以及新的氧自由基等。可見超氧化物歧化酶對(duì)機(jī)體起到保護(hù)免受損傷的作用。同時(shí)可測(cè)定丙二醛(Maleic Dialdehyde,MDA)的含量以此來反映機(jī)體脂質(zhì)過氧化的程度,間接地反映出細(xì)胞損傷的程度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表8。

從表8的數(shù)據(jù)可知,實(shí)驗(yàn)組小鼠血清中SOD活力比對(duì)照組高了13.5%。實(shí)驗(yàn)組小鼠血清中MDA含量比對(duì)照組降低了42.53%。運(yùn)動(dòng)可以引起脂質(zhì)過氧化反應(yīng)從而產(chǎn)生自由基,自由基對(duì)肌肉細(xì)胞造成損害,從而產(chǎn)生疲勞。SOD酶能清除超氧陰離子自由基(O2-·),保護(hù)細(xì)胞免受損傷,因此能夠降低疲勞的程度。灌服海馬酶解液的小鼠血清中SOD含量明顯增加,因此有助于減少自由基的堆積,延緩疲勞。MDA是脂質(zhì)自由基氧化產(chǎn)物之一,它的高低間接反應(yīng)了機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度。灌服海馬酶解液的小鼠血清中MDA含量的減少,也表明海馬酶解液有助于降低自由基氧化過程,抵抗機(jī)體的疲勞。因此,灌服海馬酶解液的小鼠延緩了疲勞的出現(xiàn)。

2.3.3.2海馬酶解液對(duì)小鼠肌乳酸含量及血清尿素的影響尿素是人體內(nèi)蛋白代謝的主要終產(chǎn)物,它構(gòu)成了血液中絕大部分的非蛋白氮。血中尿素氮來源于肝臟,通過腎臟隨尿液排除體外。腎臟功能衰竭、腎炎、泌尿道梗阻等可使血液尿素氮含量升高。而乳酸含量越多,疲勞程度越重[2]。結(jié)果見表9。

從表9的數(shù)據(jù)可知,實(shí)驗(yàn)組小鼠乳酸含量比對(duì)照組降低4.8%。實(shí)驗(yàn)組小鼠血清尿素含量比對(duì)照組降低3.0%。動(dòng)物劇烈運(yùn)動(dòng)后,無(wú)氧糖酵解過程產(chǎn)生的乳酸堆積,是產(chǎn)生疲勞的一個(gè)重要原因。灌服海馬酶解液的實(shí)驗(yàn)組乳酸堆積程度小于對(duì)照組,提示海馬酶解液具有加速乳酸清除代謝的作用。血清中尿素含量隨著運(yùn)動(dòng)負(fù)荷的增加而增加,機(jī)體對(duì)負(fù)荷適應(yīng)能力越強(qiáng),血清中尿素含量就越少。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,灌服海馬酶解液的實(shí)驗(yàn)組血清中尿素含量低于對(duì)照組,表明海馬酶解液在一定程度上可以提高小鼠運(yùn)動(dòng)負(fù)荷能力,抵抗疲勞。

3結(jié)論

海馬的粉末經(jīng)過中性蛋白酶酶解后含有豐富的多肽和氨基酸,這些多肽和氨基酸具有抗氧化活性。實(shí)驗(yàn)證明海馬酶解液對(duì)DPPH的清除率為:雄海馬45.2%,雌海馬36%;清除羥自由基率為:雄海馬81.7%,雌海馬80.0%;超氧陰離子清除率為:雄海馬46.0%,雌海馬34.4%。海馬酶解液同時(shí)具有抑菌活性。通過濾紙片法可以看出海馬酶解液對(duì)大腸桿菌,產(chǎn)氣桿菌和變形桿菌的抑制性比較強(qiáng),而對(duì)金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的抑制性不是很強(qiáng)。海馬酶解液還具有抗疲勞活性。通過小鼠負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)檢測(cè)海馬中性蛋白酶酶解液的抗疲勞活性,實(shí)驗(yàn)組游泳時(shí)間平均為143 min,而對(duì)照組的游泳時(shí)間為91 min,相比之下實(shí)驗(yàn)組比對(duì)照組高出52 min。研究結(jié)果還表明了海馬酶解液具有增加小鼠游泳耐力、增加小鼠血清中SOD活力、降低血清中MDA和尿素以及降低血乳酸的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,海馬可作為海洋藥物開發(fā)的潛在優(yōu)質(zhì)原料。

參考文獻(xiàn):

[1]

黃建設(shè),龍麗娟. 海洋天然產(chǎn)物及其生理活性的研究進(jìn)展[J].海洋通報(bào),2001,20 (4):83-90

解救美羊羊范文第4篇

1.對(duì)當(dāng)前教育改革創(chuàng)新的要求。媒介現(xiàn)已滲入社會(huì)的各個(gè)方面,對(duì)人們生活的影響有目共睹。然而,在迎接多媒體網(wǎng)絡(luò)信息時(shí)代到來的同時(shí),應(yīng)站在歷史的角度,辯證地看待傳統(tǒng)教育,提出教育改革的新思路。媒介素養(yǎng)教育就是為適應(yīng)時(shí)代需求而生的教育改革新思路、新理念。今天如果我們?nèi)狈?duì)媒介作用的認(rèn)識(shí),我們就不可能對(duì)當(dāng)前世界政治發(fā)展進(jìn)程、經(jīng)濟(jì)發(fā)展進(jìn)程、文化特點(diǎn)乃至我們自己,甚至對(duì)現(xiàn)行的教育有個(gè)比較清醒的認(rèn)識(shí)。

2.未成年人離不開媒介。青少年已經(jīng)成為我國(guó)網(wǎng)民中的主力軍,是各家網(wǎng)絡(luò)和網(wǎng)絡(luò)商家的目標(biāo)受眾群。2006年7月,中國(guó)互聯(lián)網(wǎng)絡(luò)信息中心(CNNIC)在京“第十八次中國(guó)互聯(lián)網(wǎng)絡(luò)發(fā)展?fàn)顩r統(tǒng)計(jì)報(bào)告”,報(bào)告顯示,截至2006年6月30日止,我國(guó)上網(wǎng)用戶總數(shù)為12300萬(wàn)。從網(wǎng)民結(jié)構(gòu)上看,網(wǎng)民中18~24歲的青年人所占比例最高,達(dá)到38.4%;而18歲以下的青少年就占到了14.9%。媒介對(duì)未成年人產(chǎn)生的直接或間接影響是巨大的。傳統(tǒng)社會(huì)里,未成年人的社會(huì)學(xué)習(xí)和教育主要依靠家庭和學(xué)校,而在現(xiàn)代社會(huì),這一社會(huì)化的過程則有很大改變,媒體從某種程度上取代了家庭和學(xué)校,幫助完成這一社會(huì)化的過程?,F(xiàn)在的孩童多數(shù)是在電視機(jī)前、電腦前度過童年和青少年時(shí)期的。近年人們對(duì)媒體給孩子們?cè)斐傻牟涣加绊懕憩F(xiàn)出憂心忡忡,公共輿論普遍認(rèn)為孩子出現(xiàn)的早熟、消費(fèi)主義、暴力、價(jià)值觀混亂等不良傾向,媒介有著不可推卸的責(zé)任。美國(guó)研究人員發(fā)現(xiàn),1歲至3歲的兒童電視看得越多,到了7歲時(shí),注意力不集中的情況就越嚴(yán)重。網(wǎng)絡(luò)媒介對(duì)現(xiàn)代文化的塑造和人們價(jià)值觀念的形成起到不可估量的作用,青少年因缺乏及時(shí)的引導(dǎo)和有效教育,從而患上了“道德缺血癥”、“法律癡呆癥”和“網(wǎng)絡(luò)癡迷癥”。面對(duì)這些頑癥,治愈他們的有效方案就是通過媒介素養(yǎng)教育的途徑,賦權(quán)于青少年,使其擁有較好的網(wǎng)絡(luò)素養(yǎng)。有了較好的網(wǎng)絡(luò)素養(yǎng),青少年可具備理解當(dāng)代文化的能力和解析網(wǎng)絡(luò)信息的掌控能力;有了網(wǎng)絡(luò)素養(yǎng),青少年好似穿上了“防彈衣”。它能減少網(wǎng)絡(luò)不良信息的傷害,網(wǎng)絡(luò)素養(yǎng)賦予廣大青少年良好的判斷力、思辨力,以及生存于網(wǎng)絡(luò)時(shí)代的技能,從而成為積極的網(wǎng)絡(luò)使用者。

3.青少年本身的心理和行為特征。由于青少年對(duì)客觀世界和自我心理世界缺乏足夠的認(rèn)識(shí)和分析判斷能力,思考上也具有較大的非理性,因而會(huì)產(chǎn)生缺乏思考的膚淺行為和過激行為。比如:熱衷于追逐新事物,沉湎于網(wǎng)絡(luò)游戲、叛逆行為,與家長(zhǎng)老師對(duì)立,使用暴力解決問題,甚至出現(xiàn)性道德滑坡走上犯罪道路。媒介素養(yǎng)教育以培養(yǎng)人思辨能力和積極參與能力為宗旨,通過接受媒介素養(yǎng)教育作為媒介的消費(fèi)者,青年人面對(duì)媒介不僅能具備解釋媒體和做出明智的判斷的能力,而且能自己動(dòng)手制作媒介產(chǎn)品,從而成為積極的、能力不俗的社會(huì)參與者。

二、關(guān)于開展中學(xué)生媒介素養(yǎng)教育的建議

1.借鑒加拿大媒介素養(yǎng)教育的成功實(shí)踐。加拿大是世界上為數(shù)不多的多元文化國(guó)家,加拿大各省都已經(jīng)將媒介素養(yǎng)教育納入學(xué)校課程教育計(jì)劃中。加拿大媒介素養(yǎng)的成功實(shí)踐對(duì)我國(guó)有著強(qiáng)烈的教育意義。加拿大的媒介素養(yǎng)教育主要包括:一項(xiàng)是培養(yǎng)學(xué)生的“自我認(rèn)同能力”,即幫助他們區(qū)分虛擬與現(xiàn)實(shí)、個(gè)人與世界的關(guān)系,認(rèn)識(shí)媒體價(jià)值和自我價(jià)值,并懂得自我價(jià)值不應(yīng)為媒體所主導(dǎo)。同時(shí),還要增強(qiáng)學(xué)生作為媒介消費(fèi)者的自覺意識(shí)。另一項(xiàng)是培養(yǎng)學(xué)生的“公民意識(shí)”。

2.對(duì)未成年人要有科學(xué)準(zhǔn)確的認(rèn)識(shí)。對(duì)未成年人進(jìn)行媒介素養(yǎng)教育,首先要對(duì)他們有科學(xué)準(zhǔn)確的認(rèn)識(shí)。要認(rèn)識(shí)到未成年人群體是社會(huì)生產(chǎn)的生力軍和后備力量,兒童和青少年的概念具有基礎(chǔ)性和未來性,他們身上具有天然的發(fā)展性和進(jìn)步性,所以我們要以發(fā)展的視角觀察他們的特性、需求和問題。傳統(tǒng)的觀念對(duì)社會(huì)總體進(jìn)行人群劃分,一直將未成年人置于社會(huì)弱勢(shì)群置。在社會(huì)發(fā)展進(jìn)程中,青少年面臨著許許多多的困惑、限制、壓力和選擇,缺乏參與社會(huì)的有效途徑和經(jīng)驗(yàn),因此媒介素養(yǎng)教育要賦權(quán)于他們,通過他們接觸媒體、思考媒體、解讀媒介訊息、參與制作媒介產(chǎn)品的實(shí)際經(jīng)驗(yàn),發(fā)揮他們的能動(dòng)性和潛在能力。

解救美羊羊范文第5篇

【摘要】 目的探討牡蠣酶解液的抗氧化活性。方法用普魯士藍(lán)反應(yīng)法測(cè)定牡蠣酶解液還原能力,在DPPH體系、Fenton體系和鄰苯三酚自氧化體系中分別檢測(cè)牡蠣酶解液清除二苯代苦味酰自由基(DPPH·)、羥基自由基(·OH)和超氧陰離子(O2―·)的能力,并考察牡蠣酶解液在Fe2+誘發(fā)卵黃脂蛋白過不飽和脂肪酸(PUFA)過氧化體系中的抗氧化作用。結(jié)果牡蠣酶解液清除DPPH·和·OH的EC50分別為7.313和1.330 mg/ml;牡蠣酶解液(17.800 mg/ml)對(duì)超氧自由基和卵黃脂蛋白脂質(zhì)過氧化的抑制率分別為19.86%和82.97%。結(jié)論牡蠣酶解液具有顯著的清除DPPH·和·OH作用,且活性與劑量呈正相關(guān),并對(duì)卵黃脂蛋白脂質(zhì)過氧化也顯示出了較強(qiáng)的抑制作用。

【關(guān)鍵詞】 牡蠣 酶解 自由基 抗氧化

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,適量的自由基在免疫反應(yīng)、細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡和其它生化代謝過程中起著重要的作用,然而過量的自由基則在機(jī)體中引起一系列生物學(xué)反應(yīng),導(dǎo)致組織細(xì)胞、亞細(xì)胞和分子結(jié)構(gòu)的破壞,并隨著破壞層次逐漸擴(kuò)展造成功能損傷,引起心血管疾病、癌癥和衰老等,它是構(gòu)成很多疾病的病理學(xué)基礎(chǔ)。因此合理地使用抗氧化劑可以有效地預(yù)防和治療某些疾病,延緩衰老。

合成抗氧化劑往往具有一定的毒副作用,使得它們的使用受到嚴(yán)格控制。而天然抗氧化劑副作用較小,因此,尋找高效、價(jià)廉、低毒甚至無(wú)毒的天然抗氧化劑的工作備受人們關(guān)注。目前,抗氧化活性肽是天然抗氧化劑研究熱點(diǎn)之一,而且現(xiàn)在大部分抗氧化活性肽是通過蛋白酶在溫和條件下水解蛋白質(zhì)而獲得,食用安全性高,比較符合現(xiàn)代人所追求的健康飲食的理念。

牡蠣(oyster)俗稱海蠣子、蠔等,是世界上第一大養(yǎng)殖貝類,也是我國(guó)四大養(yǎng)殖貝類之一。牡蠣肉的主要營(yíng)養(yǎng)成分為蛋白質(zhì)和糖原,含量分別為50.63%和22.41%;其氨基酸組成完善,8種必需氨基酸含量占氨基酸總量的40%,而且還含有豐富的?;撬?。此外,牡蠣肉中還含有多種礦物質(zhì)和微量元素,其中鋅和硒的含量豐富[1]。我國(guó)牡蠣資源豐富,且其蛋白質(zhì)含量高,是采用酶解法制備生物活性肽的良好原料。本文就牡蠣酶解液的抗氧化活性進(jìn)行全面地評(píng)估,為我國(guó)的牡蠣資源充分開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與儀器

1.1 材料牡蠣(購(gòu)于南寧海鮮批發(fā)交易市場(chǎng));胰蛋白酶(1:250,牛胰,Amresco分裝);二苯代苦味?;?DPPH,1, 1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl,購(gòu)自Sigma公司);番紅O(Safranin O,AMRESCO,上海生工生物工程有限公司);2-硫代巴比妥酸(生化試劑,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司);鐵氰化鉀、硫脲、H2O2 、EDTA二鈉鹽、焦性沒食子酸等均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 儀器LAMBDA BIO 20型紫外-可見分光光度計(jì)(美國(guó)PE公司);DS-1高速組織勻漿機(jī)(上海標(biāo)本模型廠);TOMY RS-20Ⅱ型高速冷凍離心機(jī)(TOMY SEIKO CO.,LTD);HH-W600型三用恒溫水箱(江蘇省金壇市醫(yī)療儀器廠)。

2 方法

2.1 牡蠣酶解液的制備[2]新鮮牡蠣去殼、洗凈,得新鮮牡蠣肉,按料水比1∶3(mg∶ml)比例加入預(yù)冷的雙蒸水,高速勻漿,加酶量為2%,在pH 8.0(用0.2N NaOH調(diào)節(jié)),45℃條件下,酶解6 h后,沸水浴滅活10 min,冷卻,最后以7 000~8 000 r/min,4℃離心30 min,取上清液分裝,即得牡蠣酶解液,冷藏備用。

牡蠣酶解液的蛋白含量測(cè)定采用Folin-酚試劑法[3]。

2.2 牡蠣酶解液還原能力的測(cè)定[4]采用普魯士藍(lán)反應(yīng)法測(cè)定牡蠣酶解液的還原能力。其原理為:

K3Fe (CN)6 + 樣品 K4Fe (CN)6 + 樣品氧化物

K4Fe (CN)6 + Fe3+ K4[Fe (CN)6]3 (藍(lán)色)

在波長(zhǎng)700 nm條件下測(cè)定吸光值A(chǔ)(A越大,則樣品的還原能力越強(qiáng))。

取不同濃度的牡蠣酶解液稀釋液(3.625,7.250,10.875,14.500,18.125 mg/ml)1.0 ml,再加入0.2 mol/L,pH6.6的磷酸鹽緩沖液1.0 ml及1%的鐵氰化鉀〔K3 Fe(CN)6〕溶液1.0 ml,于50℃水浴反應(yīng)20 min后急速冷卻,再加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的三氯乙酸(TCA)溶液1.0 ml,振蕩均勻后,3 000 r/min離心10 min,取上清液2.5 ml,加入蒸餾水2.0 ml及質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%三氯化鐵溶液0.5 ml,混合均勻,靜置10 min后于700 nm測(cè)定其吸光值。

2.3 牡蠣酶解液在DPPH體系中抗氧化性的測(cè)定[5]DPPH·(二苯代苦味?;杂苫?在有機(jī)溶劑中是一種穩(wěn)定的自由基,其結(jié)構(gòu)中含有3個(gè)苯環(huán),1個(gè)氮原子上有1個(gè)孤對(duì)電子,呈紫色,在517 nm有強(qiáng)吸收。有自由基清除劑存在時(shí),DPPH·的單電子被配對(duì)而使其顏色變淺,在最大吸收波長(zhǎng)處的吸收度變小,而且這種顏色變淺的程度與配對(duì)電子數(shù)是成化學(xué)計(jì)量關(guān)系的,因此可用與檢測(cè)自由基的清除情況,從而評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)樣品的抗氧化能力。

取不同濃度的牡蠣酶解液稀釋液(1.780,3.560,5.340,7.120,8.900 mg/ml)2 ml,加入1×10-4 mol/L DPPH無(wú)水乙醇溶液 2 ml,混勻后在室溫下避光反應(yīng)30 min,在517 nm下測(cè)定吸光度Ai,空白組以等體積無(wú)水乙醇溶液代替DPPH溶液,對(duì)照組以等體積蒸餾水代替樣品溶液,并以等體積蒸餾水和無(wú)水乙醇混合液空白調(diào)零。

清除率計(jì)算:清除率(%) = [1- (Ai-Aj)/A0] ×100%

式中:A0-對(duì)照組吸光度;Ai-樣品組吸光度;Aj-空白組吸光度。

2.4 牡蠣酶解液在Fenton體系中抗氧化性的測(cè)定[6]在Fenton反應(yīng)體系中,·OH由EDTA-Na2-Fe(Ⅱ)-H2O2產(chǎn)生,由于·OH可特異性地使番紅O(Safranin O)褪色,根據(jù)褪色程度用比色法來衡量·OH的含量。

取0.15 mol/L,pH 7.4的磷酸緩沖液1.5 ml,110μg/ml的番紅溶液0.2 ml,2 mmol/L的EDTA-Na2-Fe(Ⅱ) 0.7 ml,再分別加入不同濃度的樣品溶液0.8 ml,最后加入體積分?jǐn)?shù)為1.5%的H2O2 0.8ml以啟動(dòng)反應(yīng),混勻后于37℃水浴保溫30 min,在波長(zhǎng)520 nm處測(cè)吸光度A。空白組以等體積的去離子水代替樣品溶液;對(duì)照組以等體積的去離子水代替樣品溶液和EDTA-Na2-Fe(Ⅱ)溶液。清除率E (%)按下式計(jì)算,并以羥基自由基特異性清除劑—硫脲作陽(yáng)性對(duì)照。

E (%) = (A樣品-A空白)/(A對(duì)照-A空白)×100%

式中:A樣品-樣品組吸光度;A空白-空白組吸光度;A對(duì)照-對(duì)照組吸光度。

2.5 牡蠣牡蠣酶解液在鄰苯三酚體系中抗氧化性的測(cè)定[7~9]鄰苯三酚在弱堿性(Tris-HCL緩沖溶液pH為8.20)環(huán)境中自身氧化分解產(chǎn)生O-2·和有色中間物(在320 nm處有最大吸收峰),O-2·對(duì)自氧化又起催化作用,依據(jù)有色中間物生成量的多少,可判斷O-2·生成量的多少。也由此出現(xiàn)的一系列顏色變化,可以利用分光光度法進(jìn)行測(cè)定。當(dāng)有抑制劑存在時(shí),可清除氧自由基,從而阻止中間產(chǎn)物的積累,根據(jù)吸光度數(shù)值的變化可求出抗氧化劑的活性。

取50 mmol/L ,pH 8.20 Tris-HCl緩沖液4.5 ml(其中含有2 mmol/L EDTANa2),加入0.1 ml不同濃度的樣液,于25℃保溫10 min,然后加入25℃預(yù)溫的4.5 mmol/L的鄰苯三酚(用10 mmol/L HCl配制)0.2 ml,混勻后迅速于干燥的比色皿中,在320 nm下每隔半分鐘測(cè)定一次OD值,以等體10 mmol/L HCl代替鄰苯三酚溶液為空白調(diào)零,對(duì)照組以等體積去離子水代替樣品。作吸光度隨時(shí)間變化曲線的回歸方程,其斜率為鄰苯三酚的自氧化速率V,按下式計(jì)算樣品對(duì)O-2·的抑制率。

抑制率 (%) = ( V對(duì)照- V樣品)/ V對(duì)照×100%

式中:V對(duì)照-對(duì)照組鄰苯三酚自氧化速率(OD/min);V樣品-樣品組鄰苯三酚自氧化速率(OD/min)。

2.6 牡蠣酶解液在Fe2+誘發(fā)卵黃脂蛋白過不飽和脂肪酸(PUFA)過氧化體系中抗氧化活性(AOA)的測(cè)定[10,11]卵黃中磷脂C-2位上所含極低密度脂蛋白(VLDL)和低密度脂蛋白(LDL)過不飽和脂肪酸(PUFA)在鐵離子的催化下,經(jīng)振蕩,能誘發(fā)過氧化,產(chǎn)生烷氧基(LO·)和烷過氧基(LOO·)物質(zhì),再引發(fā)鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。在加熱的條件下,過氧化產(chǎn)物可與硫代巴比妥酸(TBA)反應(yīng)產(chǎn)生紅色化合物,并在波長(zhǎng)為532 nm處有強(qiáng)吸光度。當(dāng)有抗氧化劑存在時(shí),可清除過氧化產(chǎn)物,從而阻斷鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的發(fā)生,使得該卵黃脂蛋白脂質(zhì)過氧化體系的過氧化產(chǎn)物生成受阻,根據(jù)吸光度數(shù)值的變化可求出抗氧化劑的活性。

選用1∶25的卵黃懸液(卵黃用等體積的0.1 mol/L,pH 7.45的磷酸緩沖液PB配成1∶1懸液,磁力攪拌10 min,再用PB稀釋成1∶25的懸液置于冰箱中備用)并吸取0.2 ml,加入不同濃度的牡蠣酶解液稀釋液0.1 ml,加入25 mmol/L FeCl2 0.2 ml,用0.1 mol/L,pH 7.45的PB補(bǔ)充至2 ml,37℃培養(yǎng)12 h ,取出后加入0.5 ml 20%的三氯醋酸(TCA),靜置10 min,以3500 r/min離心10 min,取2.0 ml上清液加入0.8%TBA(2-硫代巴比妥酸)1.0 ml,加塞,放入沸水浴中15 min,冷卻后,于532 nm處比色測(cè)定吸光值(A),對(duì)照管除不加樣品液外,其它試劑同前,所測(cè)吸光值為A0,空白管調(diào)零,空白管以2.0 ml PB代替,樣品對(duì)卵黃脂蛋白脂質(zhì)過氧化的抑制率用AOA表示:AOA(%)=(A0-A) / A0×100%。

3 結(jié)果

3.1 牡蠣酶解液還原能力依據(jù)“2.2”還原能力的測(cè)定方法,在700 nm處的吸光度越大,樣品的還原能力越強(qiáng)。由表1和圖1可知,牡蠣酶解液在其濃度范圍內(nèi)隨著濃度的增加而增大;與陽(yáng)性對(duì)照—硫脲相比,其還原能力較弱。

而一般情況下,樣品的還原能力與抗氧化能力呈正相關(guān),所以牡蠣酶解液的抗氧化能力隨其濃度的增加而增強(qiáng)。表1 牡蠣酶解液的還原能力

3.2 牡蠣酶解液在DPPH體系中抗氧化性依據(jù)“2.3” DPPH體系測(cè)定方法,(Ai-Aj)為樣品組中單電子未被配對(duì)的DPPH·的吸光度值,該值越小,樣品清除DPPH·的能力越強(qiáng)。由表2可知,牡蠣酶解液清除DPPH·的能力隨濃度增大而增強(qiáng)。

牡蠣酶解液清除DPPH自由基的能力以EC50來衡量,EC50的定義為:使得DPPH自由基的清除率達(dá)到50%時(shí)需要的樣品液的濃度,通過回歸方程可求出EC50。依據(jù)回歸方程Y= 6.42X + 3.048 7,r=0.993 7求得牡蠣酶解液清除DPPH·的EC50為7.313 mg/ml。表2 牡蠣酶解液對(duì)DPPH·的清除作用(

3.3 牡蠣酶解液在Fenton體系中抗氧化性依據(jù)Fenton體系反應(yīng)原理,樣品組在520 nm處測(cè)定的吸光度值越大,其清除·OH的能力越強(qiáng),其在該體系中抗氧化能力越強(qiáng)。由表3可知,牡蠣酶解液和硫脲清除·OH的能力隨它們的濃度增大而增強(qiáng)。

牡蠣酶解液和硫脲對(duì)·OH的清除作用的回歸方程分別為Y = 29.261X + 11.078 ,r=0.975 0和Y = 7.826 9X + 13.725,r=0.990 2。 求得牡蠣酶解液和硫脲清除·OH的EC50分別為1.330 mg/ml和4.635 mg/ml,表明牡蠣酶解液對(duì)·OH有較強(qiáng)的清除作用,而且其清除·OH能力強(qiáng)于陽(yáng)性對(duì)照藥物硫脲。表3 牡蠣酶解液和硫脲對(duì)·OH的清除作用

3.4 牡蠣酶解液在鄰苯三酚體系中抗氧化性依據(jù)“2.5”鄰苯三酚自氧化體系的測(cè)定方法,在波長(zhǎng)320 nm處測(cè)定的吸光度越小,樣品的抗氧化能力越強(qiáng)。由圖2可知,超氧陰離子自由基的產(chǎn)生和鄰苯三酚產(chǎn)生有色物質(zhì)的變化隨著時(shí)間的變化而保持相對(duì)的穩(wěn)定。不同濃度的牡蠣酶解液對(duì)鄰苯三酚的自氧化均有一定的抑制作用,且隨著牡蠣酶解液濃度的增加而增大,其抑制率分別為4.29 %,9.66%,13.95%,17.35%,19.86%。由此可知牡蠣酶解液在鄰苯三酚體系中抗氧化性能力較弱,當(dāng)樣品為牡蠣酶解液母液時(shí),抑制率僅達(dá)19.86%。

圖2 牡蠣酶解液對(duì)超氧陰離子(O-2·)的抑制作用

3.5 牡蠣酶解液在Fe2+誘發(fā)卵黃脂蛋白過不飽和脂肪酸(PUFA)過氧化體系中抗氧化活性由表4及圖3可知牡蠣酶解液對(duì)PUFA過氧化體系的抑制作用隨樣品濃度的增大,抗氧化活性也明顯增加。當(dāng)樣品為牡蠣酶解液母液時(shí),抑制率AOA(%)值達(dá)到(82.97±0.25)%。

表4 牡蠣酶解液對(duì)卵黃脂蛋白脂質(zhì)過氧化的抑制作用(±s)

濃度C/mg·ml-1OD532抑制率(%)7.1201.159±0.00210.55±0.5510.6801.030±0.01820.53±0.7714.2400.647±0.00950.09±1.0817.8000.221±0.00282.97±0.25對(duì)照1.296±0.010

4 結(jié)論

牡蠣酶解液顯示出了一定的還原能力,證明其具有一定的抗氧化活性。

牡蠣酶解液清除·OH的效果強(qiáng)于硫脲,其清除·OH的能力是硫脲的3.5倍;牡蠣酶解液在DPPH體系中也具有較強(qiáng)的清除DPPH自由基的能力。

圖3 牡蠣酶解液對(duì)卵黃脂蛋白脂質(zhì)過氧化的抑制作用

在Fe2+誘發(fā)卵黃脂蛋白過不飽和脂肪酸(PUFA)過氧化體系中有明顯的抑制作用。

【參考文獻(xiàn)】

[1] 汪何雅,楊瑞金,王 璋,等.牡蠣的營(yíng)養(yǎng)成分及蛋白質(zhì)的酶法水解[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2003,27(2):163.

[2] 譚雯文,周延華,梁海秋,等.牡蠣蛋白的純化及酶解條件的研究[J].現(xiàn)代食品科技,2006,22(2):79.

[3] 吳耀生,周素芳,賴祥進(jìn),等. 新編生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:37.

[4] 劉 清,李 玉,姚惠源,等. 大麥提取物的體外抗氧化活性研究[J].食品工業(yè)科技,2007,28(2):131.

[5] 黃 琳,段 磊,李榮貴,等. 沙蠶提取物的抗氧化活性研究[J].中國(guó)海洋藥物雜志,2007,26(2):19.

[6] 王 輝,孫春艷,劉 剛,等. 異蓮心堿的體外抗氧化活性[J].中國(guó)生化藥物雜志,2005,26(1):21.

[7] 秦恩華. 茶樹菇水溶性多糖的提取及其對(duì)氧自由基清除效果的研究[J].現(xiàn)代食品科技,2005,23(6):48.

[8] 崔月花,徐 鵬,章克昌.靈芝液態(tài)發(fā)酵有效產(chǎn)物體外抗氧化活性的研究[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2006,32(8):32.

[9] 吳海濤,張 彧,繆 琪,等. 牡蠣水提液的抗氧化特性[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2005,31(4):42.

[10] 張爾賢,俞麗君,周意琳,等. Fe+2誘發(fā)脂蛋白PUFA過氧化體系及對(duì)若干天然產(chǎn)物抗氧化作用的評(píng)價(jià)[J]. 生物化學(xué)與生物物理學(xué)報(bào),1996,28(2):218.

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