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【摘要】目的研究崗梅水提取物的抗炎作用。方法采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹法、角叉菜膠致大鼠足跖腫脹法、大鼠棉球肉芽腫法和醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增高法觀察崗梅水提取物的抗炎作用。結(jié)果崗梅水提取物能明顯抑制二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹和角叉菜膠所致的大鼠足跖腫脹及炎性組織中PGE2的生成，減少大鼠棉球肉芽腫的形成，同時(shí)對(duì)醋酸所致小鼠毛細(xì)血管通透性增高具有顯著抑制作用。結(jié)論崗梅水提取物具有明顯抗炎作用。

【關(guān)鍵詞】崗梅；水提取物；抗炎；大鼠

Abstract:ObjectiveTostudytheanti-inflammatoryactivityofthewaterextractfromRadixetCaulisIlicisAsprellae.MethodsThemodelsofxylene-inducedearedemainmice,hindpawedemainducedwithcarrageeninrats,granulomainducedwithcottonballinrats,andcapillarypermeabilityincreaseinducedwithaceticacidinmicewereusedtoobservetheanti-inflammatoryeffects.ResultsThewaterextractfromRadixetCaulisIlicisAsprellaecouldinhibitxylene-inducedearedemaandcapillarypermeabilityincreaseinmice,hindpawedemaandPGE2increaseinducedwithcarrageenandgranulomainducedwithcottonballinrats.ConclusionThewaterextractfromRadixetCaulisIlicisAsprellaehassignificantanti-inflammatoryeffects.

Keywords:RadixetCaulisIlicisAsprellae；waterextract；antiinflammatory；mice

崗梅是冬青科植物梅葉冬青Ilexasprella(Hook.etArm.)champ.exBenth.的干燥根及莖。其味苦、微甘、性涼。有清熱解毒、生津止渴、利咽消腫、散瘀止痛之功,常用于感冒發(fā)熱、肺熱咳嗽、熱病津傷口渴等［1］。崗梅主產(chǎn)于兩廣地區(qū)（廣東、廣西），是多種涼茶中的主要藥味，應(yīng)用較廣。但目前尚未見有關(guān)崗梅水提取物抗炎作用的系統(tǒng)報(bào)道，筆者對(duì)崗梅水提取物進(jìn)行抗炎作用的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，報(bào)告如下。

1材料與方法

1.1藥物及試劑崗梅水提取物采用水煎法自制，方法為：取適量崗梅，每次用8倍量水煎煮1h，共2次，合并2次水煎煮液，濃縮，備用；阿司匹林片：河北石家莊制藥集團(tuán)生產(chǎn)，批號(hào)：041114；烏拉坦：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：E60521；二甲苯：廣東光華化學(xué)廠有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20050218；角叉菜膠購(gòu)自美國(guó)Sigma公司,批號(hào)：59C-0328；青霉素和鏈霉素混合液（每毫升含800U青霉素和650U鏈霉素）。

1.2動(dòng)物昆明種小鼠，雄性，體質(zhì)量20～24g，SPF級(jí)，由第一軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)：2004A063號(hào)；SD大鼠，雄性，體質(zhì)量150～180g，清潔級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，由中山大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)：粵檢證字2003A070。

1.3儀器大鼠足跖容積測(cè)定裝置，參照文獻(xiàn)［2］方法定制。

1.4方法

1.4.1對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響［2］取昆明種小鼠60只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、崗梅水提取物低、中、高劑量組、陽(yáng)性對(duì)照藥物（阿司匹林）組，共6組，每組10只，實(shí)驗(yàn)前小鼠禁食不禁水12h，然后各組小鼠按0.1mL/10g體質(zhì)量灌胃給藥，1次/d，共7d，其中正常對(duì)照組和模型對(duì)照組給等體積蒸餾水。末次給藥后30min，除正常對(duì)照組外，其余各組小鼠于右耳正反兩面涂上二甲苯50μL致炎，致炎1h后脫頸椎處死動(dòng)物，用直徑9mm打孔器沖下左耳和右耳同一部位的圓片，于分析天平上稱重，以兩耳片重差值為炎癥腫脹度。

1.4.2對(duì)角叉菜膠致大鼠足跖腫脹及炎癥組織中PGE2（前列腺素E2）的影響［2］取SD大鼠50只，隨機(jī)分為空白對(duì)照組、崗梅水提取物低、中、高劑量組、陽(yáng)性對(duì)照藥物（阿司匹林）組，共5組，每組10只。實(shí)驗(yàn)前大鼠禁食不禁水12h，然后各組大鼠按1mL/100g體質(zhì)量灌胃給藥，1次/d，共7d，其中空白對(duì)照組給等體積蒸餾水。末次給藥后1h，先按容積測(cè)定方法測(cè)量各鼠右踝關(guān)節(jié)以下容積，然后于各鼠右后足跖皮下注射ρ=1%角叉菜膠0.1mL致炎，分別于致炎后1h、2h、3h、4h時(shí)，按原法測(cè)量右踝關(guān)節(jié)以下容積。測(cè)完后，頸椎脫臼處死大鼠,于踝關(guān)節(jié)上0.5cm處剪下炎性腫脹足稱重,將以上剪下的致炎足剝皮,剪碎放入5mL生理鹽水中浸泡1h后,離心足浸出液,取上清液0.1mL,加0.5mol·L-1KOH-甲醇液2mL,在50℃下異構(gòu)化20min,用甲醇稀釋至5mL,于波長(zhǎng)278nm處測(cè)定吸光度(A)值,A值的大小反應(yīng)PGE2的含量。

1.4.3對(duì)大鼠棉球肉芽腫的影響［3］取SD大鼠50只，每只大鼠按1g/kg體質(zhì)量腹腔注射烏拉坦進(jìn)行麻醉，在各鼠的左右蹊部用碘酒消毒，75%（φ）乙醇脫碘后，各切開1cm長(zhǎng)小口，用眼科鑷子將已稱重為30mg的滅菌脫脂棉球（直徑6.5～8.5mm）一個(gè)植入皮下，每個(gè)棉球加青霉素和鏈霉素混合液0.3mL，以防感染，隨即縫合皮膚。將所有大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、崗梅水提取物低、中、高劑量組、陽(yáng)性對(duì)照藥物（阿司匹林）組，共5組，每組10只，實(shí)驗(yàn)前大鼠禁食不禁水12h，術(shù)后2h開始按1mL/100g體質(zhì)量灌胃給藥，其中空白對(duì)照組給等體積蒸餾水，1次/d，共7d。在第8天殺死動(dòng)物，打開原切口，將棉球連同周圍結(jié)締組織一起取出，剝出周圍已包裹肉芽組織的棉球，剔除脂肪組織，在60℃烘箱放置12h后稱重，減去原棉球重量即為肉芽腫凈重。

1.4.4對(duì)醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增高的影響［3］取昆明種小鼠50只，隨機(jī)分為空白對(duì)照組、崗梅水提取物低、中、高劑量組、陽(yáng)性對(duì)照藥物（阿司匹林）組，共5組，每組10只，實(shí)驗(yàn)前小鼠禁食不禁水12h，然后各組小鼠按0.1mL/10g體質(zhì)量灌胃給藥，1次/d，共7d，其中空白對(duì)照組給等體積蒸餾水。末次給藥后1h，各組小鼠尾靜脈注射0.5%伊文思藍(lán)生理鹽水溶液0.1mL/10g體質(zhì)量，隨即ip0.6%（φ）醋酸0.1mL/10g體質(zhì)量，20min后,斷頭放血處死小鼠，腹腔注射6mL生理鹽水，輕揉腹部,收集腹腔洗出液，1000r/min離心5min,取上清液用紫外－可見分光光度計(jì)于590nm處測(cè)吸光度值(A值)。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示，采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,以P＜0.05為差異有顯著性。

2結(jié)果

2.1崗梅水提取物對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響崗梅水提取物中、高劑量組的耳重差與模型組比較，差異具有顯著性（P<0.01），說明崗梅水提取物能抑制二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹，提示崗梅水提取物對(duì)急性炎性腫脹具有抑制作用。見表1。

2.2崗梅水提取物對(duì)角叉菜膠致大鼠足跖腫脹及炎癥組織中PGE2含量的影響低、中、高劑量崗梅水提取物對(duì)角叉菜膠致炎后1h、2h、3h、4h時(shí)大鼠的足跖腫脹及炎癥組織中PGE2含量增加均具有明顯的抑制作用（P<0.05或0.01），提示崗梅水提取物對(duì)急性炎性腫脹具有顯著抑制作用。見表2。

2.3崗梅水提取物對(duì)大鼠棉球肉芽腫的影響崗梅水提取物低、中、高劑量組的棉球肉芽腫凈重與空白對(duì)照組比較，差異具有顯著性（P<0.05或0.01），說明崗梅水提取物組能明顯抑制大鼠棉球肉芽腫的形成，提示崗梅水提取物具有一定的抗炎作用。見表3。

2.4崗梅水提取物對(duì)醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增高的影響崗梅水提取物低、中、高劑量組腹腔洗出液的吸光度值與空白對(duì)照組比較，差異具有顯著性（P<005或0.01），說明崗梅水提取物組能明顯抑制醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增高，提示崗梅水提取物對(duì)炎性過程中毛細(xì)血管通透性增高具有一定的抑制作用。見表4。

表1崗梅水提取物對(duì)二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響（略）

Tab.1TheeffectsofthewaterextractfromRadixetCaulisIlicisAsprellaeonxylene-inducedearedemainmice

與模型對(duì)照組比較：**P<0.01；與正常對(duì)照組比較：＃P<0.01(t檢驗(yàn)）

表2崗梅水提取物對(duì)角叉菜膠致大鼠足跖腫脹及炎癥組織中PGE2含量的影響（略）

Tab.2TheeffectsofthewaterextractfromRadixetCaulisIlicisAsprellaeonhindpawedemaandPGE2increaseinducedwithcarrageeninrats

與空白對(duì)照組比較：*P<0.05；**P<0.01(t檢驗(yàn)）

表3崗梅水提取物對(duì)大鼠棉球肉芽腫的影響（略）

Tab.3TheeffectsofthewaterextractfromRadixetCaulisIlicisAsprellaeongranulomainducedwithcottonballinrats

與空白對(duì)照組比較：*P<0.05；**P<0.01(t檢驗(yàn)）

表4崗梅水提取物對(duì)醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增高的影響（略）

Tab.4TheeffectsofthewaterextractfromRadixetCaulisIlicisAsprellaeoncapillarypermeabilityincreaseinducedwithaceticacidinmice

與空白對(duì)照組比較：*P<0.05；**P<0.01(t檢驗(yàn)）

3討論

崗梅為兩廣地區(qū)的藥材，有清熱解毒、生津止渴、利咽消腫、散瘀止痛之功，民間多用于涼茶。關(guān)于崗梅現(xiàn)代研究的文獻(xiàn)報(bào)道較少，化學(xué)研究表明：崗梅中含有三帖皂苷、內(nèi)酯、生物堿、赪酮甾醇、赪酮甾醇3OβD葡萄糖苷、丁香脂素、丁香脂素OβD葡萄糖苷和19去氫烏索酸。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明：崗梅在體外試驗(yàn)中對(duì)金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌有抑制作用；可增加豚鼠離體心臟冠脈流量和心收縮力；對(duì)垂體后葉素所致家兔急性心肌缺血T波改變有保護(hù)作用［1，4］。但與崗梅“清熱解毒”功效密切相關(guān)的抗炎作用未見系統(tǒng)的研究報(bào)道。

炎癥是機(jī)體活組織在各種損傷刺激下所表現(xiàn)的以防御為主的反應(yīng)，炎癥滲出、組織腫脹是炎癥早期的重要指標(biāo)，在炎癥晚期和慢性炎癥期，表現(xiàn)為巨噬細(xì)胞和成纖維細(xì)胞增生，形成肉芽組織［5］。

本研究采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹法、角叉菜膠致大鼠足跖腫脹法、大鼠棉球肉芽腫法和醋酸致小鼠毛細(xì)血管通透性增高法等經(jīng)典動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法，考察崗梅水提取物對(duì)炎癥發(fā)生的早期和晚期的影響。結(jié)果表明：崗梅水提取物既可抑制炎癥早期的水腫和滲出,又可抑制炎癥晚期的組織增生和肉芽組織的生成，且能降低局部炎癥組織中PGE2含量,提示崗梅水提取物具有顯著的抗炎作用，且其抗炎機(jī)制之一可能與減少炎癥組織中PGE2合成有關(guān)。本研究對(duì)崗梅清熱解毒的功效進(jìn)行了有益的探索，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果為崗梅及相關(guān)涼茶的應(yīng)用提供了一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，但崗梅水提取物抗炎的作用機(jī)制及水提取物中發(fā)揮抗炎的物質(zhì)基礎(chǔ)尚需進(jìn)一步研究。

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