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【關(guān)鍵詞】白花蛇舌草

【摘要】目的建立白花蛇舌草質(zhì)量控制方法。方法采用生藥學(xué)方法對白花蛇舌草及其偽品水線草和纖花耳草進(jìn)行鑒別，并建立了白花蛇舌草中齊墩果酸的薄層掃描含量測定方法。結(jié)果白花蛇舌草中的齊墩果酸在0.8～6.4μg間有良好的線性關(guān)系，回收率為98.7%，RSD為1.95%（n=5）。結(jié)論將生藥學(xué)研究方法和白花蛇舌草中的齊墩果酸的含量測定方法相結(jié)合，可作為質(zhì)量控制方法。

關(guān)鍵詞白花蛇舌草水線草纖花耳草齊墩果酸鑒別

【Abstract】ObjectiveToestablishthemethodofqualitycontrolofOldenlandiaDiffusa（willd.）Roxb.MethodsThecontentofoleanolicacidinOldenlandiaDiffusa（willd.）RoxbwasdeterminedbyTLC-scanningtodiscriminateitscounterfeitsuchasOldenlandiacorymbosaL.andHedyotistenellifloraBL.ResultsTherelationshipbetweenOldenlandiaDiffusa（willd.）Roxbanditsoleanolicacidcontentduring0.8and6.4μgwasverylinearwhentherecoveryrateofaddingsamplewas98.7%，theRSD=1.95%（n=5）.ConclusionCombinationofpharmacog-nosyresearchingmethodandquantitativedeterminationofOleanolicacidcanbeusedforthequalitycontrolofOlden-landiaDiffusa（willd.）Roxb.

KeywordsOldenlandiaDiffusa（willd.）RoxbOldenlandiacorymbosaL.Hedyotistenellifolraoleano-licaciddiscrimination

白花蛇舌草為茜草科植物白花蛇舌草［OldenlandiaDif-fusa（Willd）Roxb］的干燥全草，為常用中藥，具有清熱解毒、利尿消腫、活血止痛之功效，廣泛分布于亞熱帶地區(qū)。近年來由于臨床上應(yīng)用廣泛，商品供不應(yīng)求，導(dǎo)致白花蛇舌草異常混亂。常見的混偽品有水線草［（茜草科）Hedyotiscorym-bosa（L）Lam的全草］和纖花耳草［（茜草科）HedyotistenelifloraB1.的全草］。為保證臨床用藥安全有效，我們對白花蛇舌草進(jìn)行生藥研究，并將常見的混偽品進(jìn)行鑒別，同時，還建立了白花蛇舌草中齊墩果酸的薄層掃描含量測定方法?，F(xiàn)將研究結(jié)果報告如下。

1儀器與試藥

薄層掃描儀（日本島津CS-930型）;硅膠G預(yù)制板（德國Merck公司）定量毛細(xì)管（美國Drummand公司生產(chǎn)）;齊墩果酸對照品（中國藥品生物制品定所）;白花蛇舌草、水線草和纖花耳草均采自藥圃并經(jīng)鑒定。所用試劑均為分析純。

2生物學(xué)研究

2.1植物形態(tài)白花蛇舌草為一年生披散小草本，莖扁圓柱形，從基部分枝。單葉對生、膜質(zhì)、線形，長1～3cm，寬1～3mm，頂端急尖，側(cè)脈不明顯，無柄，托葉合生，長1～2mm，上部芒尖，花四數(shù)，單生或成對生于葉腋，花梗長0.1～1.5cm，萼管與子房合生，球形，略扁、宿存;花冠白色，筒狀，長3.5～4mm，裂片卵狀矩圓形;雄蕊生于花冠筒喉部，花藥2室;雄蕊1。蒴果扁球形，直徑2～3mm，灰褐色。水線草的花2～5朵集成腋生傘房花序，花梗極纖細(xì)，長0.5～1cm;托葉合生成鞘狀，頂端近截形，有剛毛。纖花耳草的葉革質(zhì)，花無柄，1～3朵生于葉腋內(nèi)，而植株干后黑色。

2.2藥材性狀白花蛇舌草全體扭曲成團(tuán)狀，灰綠色或灰棕色，有主根一條，須根纖細(xì)。莖細(xì)而卷，多分枝，扁圓柱形，質(zhì)脆易折斷，中央有白色髓部。葉對生，條形，長1～3cm，多破碎脫落。蒴果扁球形，腋生，同含多數(shù)極細(xì)小種子。氣微，味淡。水線草的莖四棱形，多中空，葉為條形或條狀披針形，蒴果2～5個腋生，具長梗。纖花耳草的葉革質(zhì)，反卷，蒴果卵形，腋生，幾無梗，味淡有燒舌感。

2.3顯微特征白花蛇舌草:（1）表皮細(xì)胞一列，類方形或卵圓形，常見單個細(xì)胞向外強(qiáng)烈突起，外被角質(zhì)層。（2）皮層較窄，細(xì)胞一般比表皮細(xì)胞小，含少量小油滴，個別細(xì)胞中含草酸鈣針晶束;內(nèi)皮層細(xì)胞一列，切向扁長。（3）韌皮部狹窄，約2～5列細(xì)胞。（4）木質(zhì)部呈環(huán)，導(dǎo)管常2～6個徑向單列，木纖維壁厚，木化;射線細(xì)胞一列。（5）髓部寬闊，細(xì)胞較大，可見草酸鈣針晶。

3白花蛇舌草中齊墩果酸的含量測定

3.1溶液備制

3.1.1對照品溶液精密稱取齊墩果酸對照品8.0mg于5ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，即得。

3.1.2藥材供試液取過40目篩的干燥的白花蛇舌草藥材粉末0.2g，精密稱定，加硫酸-乙醇（1∶9）50ml，回流3h，待冷卻后，加氯仿50ml，再回流2h，冷卻，過濾。藥渣用20ml氯仿洗滌，洗滌液與濾液合并。分取氯仿層、水層，分別用10ml氯仿萃取3次，合并氯仿液。氯仿液用40ml水洗滌，分取氯仿層，置水浴上蒸干。殘渣用氯仿溶解并定溶至2ml，作供試液。

3.2薄層掃描條件硅膠G預(yù)制薄層板，展開劑為氯仿-甲醇（9∶1），上行展開后，取出，晾干，噴10%硫酸乙醇溶液，105℃烘3min，取出，在薄層板上覆蓋一同樣大小的潔凈玻璃板，四周用膠帶封牢，掃描測定。掃描條件:反射式雙波長鋸齒掃描，測定波長為λS=530nm，λR=420nm，狹縫0.4mm×0.4mm，SX=3。

3.3線性范圍精密吸取上述齊墩果酸對照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，按上述條件展開、顯色、掃描，得回歸方程Y=3565X-1779，r=0.9996，線性范圍內(nèi)0.8～6.4μg。

3.4精密度試驗精密吸取齊墩果酸對照品溶液2.0μl，共5份，分別點于同一硅膠G薄層板上，按上述條件展開、顯色、掃描，測得峰面積積分值的RSD=1.66%（n=5）。

3.5穩(wěn)定性試驗取對照品溶液點樣，按上述條件展開顯色后，在0、0.5、1、1.5、2、2.5、3h，分別進(jìn)行掃描測定，結(jié)果峰面積積分值的RSD為0.57%，顯示在3h內(nèi)穩(wěn)定。

3.6重現(xiàn)性試驗精密稱取同一批號樣品5份，按3.7項下操作，測得樣品齊墩果酸的RSD=1.8%（n=5）。

3.7樣品測定分別精密吸取藥材供試液2.0μl，對照品溶液1.0μl和3.0μl，交叉點于同一硅膠G薄層板上，按上述條件展開、顯色、掃描測定，以外標(biāo)二點法計算含量。結(jié)果見表1。

3.8回收試驗按加樣回收法制備試樣并按3.7項下操作，結(jié)果回收率為98.7%，RSD為19.5%（n=5）。

表1幾批白花蛇舌草的齊墩果酸含量（略）

4討論

白花蛇舌草與上述幾種偽品其藥材外觀極相似，引起產(chǎn)地錯收錯銷，應(yīng)予糾正。其次我省部分地區(qū)歷來就有將水線草與白花蛇舌草相互混用習(xí)慣，經(jīng)查資料表明，白花蛇舌草主含齊墩果酸、熊果酸等，水線草主含東葉草苷、雞屎藤次苷。筆者認(rèn)為水線草不能作白花蛇舌草藥用。