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【摘要】目的比較千里光屬植物水煎劑抑菌效果，為千里光潛在藥用價(jià)值的開(kāi)發(fā)利用提供依據(jù)。方法二倍稀釋法被用于檢測(cè)4種千里光對(duì)5種細(xì)菌的最低抑菌濃度(MIC)。結(jié)果4種千里光對(duì)甲型副傷寒桿菌表現(xiàn)出相同的抑菌效果，但對(duì)金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌和福氏痢疾桿菌抑菌作用不同，表現(xiàn)為全緣千里光對(duì)金黃色葡萄球菌抑菌作用最強(qiáng)(MIC=1.95g/L)，對(duì)大腸埃希菌和甲型副傷寒桿菌抑菌能力最差(MIC=7.81g/L)。結(jié)論全緣千里光可能具有更高的抗菌有效藥用成分，同種千里光對(duì)不同細(xì)菌表現(xiàn)出不同最低抑菌濃度可能是由于不同細(xì)菌生物學(xué)性狀的差異所致。

【關(guān)鍵詞】千里光；抑菌作用；最低抑菌濃度

千里光SenecioscandensBuch-Ham系菊科(compositae)千里光屬多年生草本植物［1］，是我國(guó)應(yīng)用歷史悠久的傳統(tǒng)中藥，有清熱解毒、殺蟲(chóng)、明目、涼血、生肌、驅(qū)風(fēng)除濕的功效［2］。千里光在我國(guó)南方分布多個(gè)種，包括掌裂千里光、麻葉千里光、全緣千里光、羽葉千里光等［3，4］。有研究表明，千里光的藥理學(xué)作用集中體現(xiàn)在抗菌［5］、抗鉤端螺旋體［6］、抗滴蟲(chóng)并具有抗氧化及自由基清除活性［7］等作用；臨床試驗(yàn)表明，千里光對(duì)炎癥性疾患及細(xì)菌性感染具有一定療效［8］，但迄今尚無(wú)針對(duì)不同種千里光的抗菌效果進(jìn)行研究的報(bào)道。本研究組根據(jù)資源產(chǎn)地和形態(tài)學(xué)特征收集整理不同種千里光，以此為基礎(chǔ)，比較不同種千里光抗菌效果，以分析千里光的遺傳資源與藥理學(xué)性狀之間的關(guān)系，為進(jìn)一步明確千里光的藥理作用成分和種質(zhì)改良提供參考依據(jù)。

1材料

1.1參試千里光資源參試的8份千里光資源系本研究組采自貴州省遵義、畢節(jié)、貴陽(yáng)和安順4個(gè)地區(qū)的野生種，包括掌裂千里光、麻葉千里光、全緣千里光和羽葉千里光各2份（表1）。表1參試千里光SenecioscandensBuch.-Ham.的產(chǎn)地與表型（略）

1.2供試菌種5種供試菌種系遵義醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)教研室保存菌種，均為標(biāo)準(zhǔn)株，包括金黃色葡萄球菌(S.aureus)No.CMCC26001，銅綠假單胞菌(P.aeruginosa)No.ATCC27853，大腸埃希菌(E.coli)No.ATCC25922，甲型副傷寒桿菌(S.ParatyphiA)No.CMCC50001，福氏痢疾桿菌(S.flexneri)No.CMCC51573。

1.3培養(yǎng)基M-H液體培養(yǎng)基。

2方法

2.1抗菌原液（千里光煎劑）的制備剪取千里光第7片葉以上的部位，于30℃烘干至恒重。參照陳奇［9］的方法，稱取10g千里光置于砂鍋，加20ml蒸餾水浸泡30min后，用慢火煎至水量濃縮為10ml過(guò)濾，藥渣另加20ml蒸餾水繼續(xù)煎煮、過(guò)濾，將2次濾液共20ml煎煮濃縮，定容至10ml，即得濃度為1g/ml的千里光水煎劑，經(jīng)高壓蒸氣滅菌后備用。

2.2中藥最低抑菌濃度(MIC)的測(cè)定按NCCLS推薦的瓊脂稀釋法測(cè)定實(shí)驗(yàn)菌株的MIC值。制備千里光瓊脂平板，千里光和藥敏培養(yǎng)基瓊脂按比例混合，使千里光的終濃度分別為250.0，125.0，62.5，31.25，15.62，7.81，3.90，1.95，0.98g/L。

2.3菌液的制備菌液調(diào)整為0.5麥?zhǔn)蠁挝缓笤侔凑?:10進(jìn)行稀釋，用1μl定量接種環(huán)點(diǎn)種于瓊脂表面，最終瓊脂上所含接種菌量為104個(gè)/ml。采用多點(diǎn)接種法，首先點(diǎn)種對(duì)照平板(不含千里光水煎劑)，隨后從最低濃度開(kāi)始，依次點(diǎn)種不同濃度的千里光平板，于37℃孵育，24h后記錄無(wú)菌生長(zhǎng)的最低千里光濃度。

3結(jié)果

3.1千里光抗菌效果比較本研究結(jié)果顯示，當(dāng)終濃度高于15.62g/L時(shí)，4種千里光資源對(duì)參試的5種細(xì)菌生長(zhǎng)均表現(xiàn)出抑制作用（圖1-a）。盡管各種千里光都表現(xiàn)出抗菌作用，但量化抗菌效果的最低抑菌濃度存在差異。當(dāng)全緣千里光水煎液終濃度為7.81g/L時(shí)，僅大腸埃希菌出現(xiàn)菌斑（圖1-b）；而當(dāng)其終濃度為3.90g/L時(shí)，大腸埃希菌和甲型副傷寒桿菌能夠生長(zhǎng)（圖1-c）；在其終濃度為1.95g/L時(shí)，表現(xiàn)為金黃色葡萄球菌不能生長(zhǎng)，其余4種細(xì)菌能正常生長(zhǎng)（圖1-d）。對(duì)掌裂千里光而言，當(dāng)其終濃度為3.90g/L時(shí)，銅綠假單胞菌、大腸埃希菌和甲型副傷寒桿菌能夠正常生長(zhǎng)（圖1-e）。當(dāng)麻葉千里光的水煎液終濃度為7.81g/L時(shí)，表現(xiàn)為銅綠假單胞菌和大腸埃希菌出現(xiàn)菌斑，而其它三種參試細(xì)菌不能正常生長(zhǎng)（圖1-f）；而對(duì)終濃度同為7.81g/L的羽葉千里光，表現(xiàn)為對(duì)金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、甲型副傷寒桿菌和福氏痢疾桿菌有抗菌作用（圖1-g）。4種千里光的終濃度為0.98g/L時(shí)表現(xiàn)為對(duì)參試的5種細(xì)菌沒(méi)有抗性（圖1-h）。

3.2不同種千里光的最低抑菌濃度如表2所示，參試的4種千里光對(duì)不同細(xì)菌抗菌作用有不同的最低抑菌濃度，表現(xiàn)出不同的抗菌效果。與全緣千里光對(duì)金黃色葡萄球菌抗菌效果相比較，掌裂千里光、羽葉千里光和麻葉千里光的最低抑菌濃度同為3.90g/L，高出全緣千里光的MIC一倍。4種千里光對(duì)銅綠假單胞菌的抗菌作用表現(xiàn)出更大的差異，其中，麻葉千里光的抗菌效果最差，最低抑菌濃度為15.62g/L，然后是掌裂千里光和羽葉千里光，二者的MIC同為7.81g/L，全緣千里光的MIC最低，為3.90g/L，表現(xiàn)出最好的抗菌效果。整體來(lái)講，4種千里光對(duì)參試的大腸埃希菌抗菌作用較低，其MIC介于7.81～15.62g/L之間，其中，掌裂千里光、羽葉千里光和麻葉千里光對(duì)大腸埃希菌的抗菌能力顯得更低，抗菌效果最好屬全緣千里光，其MIC也高達(dá)7.81g/L。不同種千里光對(duì)甲型副傷寒桿菌的抗菌作用沒(méi)有表現(xiàn)出差異，參試的8份千里光資源的MIC均為7.81g/L，顯示出相對(duì)較低的抗菌能力。4種千里光對(duì)福氏痢疾桿菌的抗菌作用表現(xiàn)為掌裂千里光和全緣千里光較強(qiáng)，二者的MIC為3.90g/L，相對(duì)來(lái)講，羽葉千里光和麻葉千里光的抗福氏痢疾桿菌效果較差，它們的MIC因此顯得更高(7.81g/L)。

總體看來(lái)，4種千里光對(duì)不同細(xì)菌的抗菌效果并不相同，而且同種千里光對(duì)不同細(xì)菌的最低抑菌濃度也不相同。其中，千里光對(duì)金黃色葡萄球菌的抗菌效果最好，而對(duì)大腸埃希菌的抗菌作用最差。4種千里光對(duì)5種細(xì)菌的抗菌效果顯示，全緣千里光對(duì)5種細(xì)菌的抗菌作用更強(qiáng)（見(jiàn)表2）。表2參試千里光對(duì)5種細(xì)菌的最低抑菌濃度(略)

4討論

千里光被認(rèn)為是一種有良好開(kāi)發(fā)前景的抗菌中草藥［10］。體外抗菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，千里光全草水煎劑具有廣譜性抗菌作用［11］，但迄今尚無(wú)對(duì)不同種千里光藥理學(xué)作用進(jìn)行比較的研究，使千里光開(kāi)發(fā)缺乏量化分析指標(biāo)。我們通過(guò)對(duì)金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、甲型副傷寒桿菌和福氏痢疾桿菌抗菌效果研究證實(shí)了千里光的細(xì)菌生長(zhǎng)抑制作用，本研究結(jié)果表明，不同種千里光對(duì)甲型副傷寒桿菌有相同的抑菌效果，但對(duì)其它4種不同細(xì)菌的抗菌作用存在差異，表現(xiàn)為全緣千里光的抗菌效果更佳，意味著全緣千里光具有更高的潛在藥用價(jià)值。

周艷娟等［12］比較羽葉千里光根、莖、葉和花4個(gè)部位甲醇提取物的抗氧化活性時(shí)發(fā)現(xiàn)葉提取物對(duì)二苯苦味酰自由基(DPPH)清除作用最強(qiáng)，表明植物不同器官的生理代謝存在差異，這種差異會(huì)影響次生代謝產(chǎn)物的累積。千里光遺傳特性穩(wěn)定［2］，不同種千里光遺傳背景差異穩(wěn)定，這可能是導(dǎo)致不同種千里光對(duì)不同菌株抑菌效果差異的遺傳學(xué)因素。

生藥中藥理作用顯著或足以說(shuō)明該生藥療效的成分,通常認(rèn)為是有效成分［13］。目前發(fā)現(xiàn)，千里光水煎劑含有黃酮及其苷類(lèi)、酚酸性成分、鞣質(zhì)、生物堿以及揮發(fā)油等化學(xué)成分［14］，盡管發(fā)現(xiàn)千里光全草水煎劑及黃酮類(lèi)提取物均有很強(qiáng)的抗菌作用，但決定千里光藥理學(xué)性狀的有效化學(xué)成分究竟是哪些，卻并不清楚。本研究發(fā)現(xiàn)，除甲型副傷寒桿菌外，不同種千里光對(duì)同一種細(xì)菌的最低抑菌濃度并不相同，表明不同種千里光的有效抑菌化學(xué)成分的含量或天然產(chǎn)物結(jié)構(gòu)之間存在差異。能否結(jié)合不同的抗菌效果，對(duì)比分析不同種千里光水煎劑的化學(xué)組分，以明確千里光的有效抗菌化學(xué)成分或結(jié)構(gòu)，正在做進(jìn)一步研究。超級(jí)秘書(shū)網(wǎng)：

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