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0前言

在所有的環(huán)境污染物種類(lèi)當(dāng)中，鉛是一種較為常見(jiàn)的元素，其不僅會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生一定的毒害作用，更會(huì)直接危害到動(dòng)植物的健康與生態(tài)環(huán)境的平衡。傳統(tǒng)的檢測(cè)方式則更是多種多樣，包括光譜檢測(cè)、電泳儀、液相色譜檢測(cè)法和雙硫腙對(duì)比法等等，盡管傳統(tǒng)的檢測(cè)方法依賴(lài)于精密化學(xué)儀器使得檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性較高，但其操作流程與檢測(cè)成本都難以滿(mǎn)足多元化的鉛檢測(cè)需求。因此專(zhuān)家們不斷致力于研發(fā)更加經(jīng)濟(jì)、便利、高效的檢測(cè)方法，生物化學(xué)檢測(cè)技術(shù)由此應(yīng)運(yùn)而生，并且依賴(lài)于諸多的優(yōu)勢(shì)，使其在當(dāng)前獲得了較為廣泛的應(yīng)用。在此背景下對(duì)鉛檢測(cè)中的生物化學(xué)技術(shù)應(yīng)用做進(jìn)一步的研討，有利于為促進(jìn)該技術(shù)研究的進(jìn)一步深入提供一定的參考。

1核酸檢測(cè)技術(shù)

核酸檢測(cè)技術(shù)，全稱(chēng)分子信標(biāo)核酸檢測(cè)技術(shù)，簡(jiǎn)稱(chēng)FRET。該技術(shù)原理是利用熒光能量共振轉(zhuǎn)移來(lái)進(jìn)行的化學(xué)成分檢測(cè)技術(shù)，通過(guò)此方式來(lái)獲得寡核苷酸探針，使之與特定的核酸相互補(bǔ)充，在靶分子雜交的生物作用下，形成熒光反應(yīng)，根據(jù)熒光反應(yīng)的強(qiáng)弱程度來(lái)為定量與定性研究的進(jìn)行提供參照依據(jù)。在Pb2+（鉛離子）檢測(cè)中，分子信標(biāo)核酸技術(shù)的應(yīng)用亦是通過(guò)上述原理，在常溫下，能夠?qū)崿F(xiàn)Pb2+的快速檢測(cè)，有利于削弱溫度對(duì)探針?lè)磻?yīng)的作用力，同時(shí)限制條件的影響也被弱化。相關(guān)研究顯示，Pb2+的濃度決定了檢測(cè)的熒光強(qiáng)度，使用該方式能夠檢測(cè)出的Pb2+的濃度下限為1.7×10mol/L。另有學(xué)者專(zhuān)門(mén)將該技術(shù)的研究建立在以脫氧核酶的催化水解特性基礎(chǔ)之上，并以此為依據(jù)對(duì)該技術(shù)進(jìn)行了系統(tǒng)化的研究，將其應(yīng)用在了Pb2+的檢測(cè)之中，得出了比較喜人的結(jié)果。另外，還有的研究中采用雙淬滅熒光探針進(jìn)行檢測(cè)，主要方式為以8-17DNAzyme的底物鏈與酶鏈作為反應(yīng)基，用熒光基團(tuán)和熒光淬滅基團(tuán)對(duì)此進(jìn)行標(biāo)記，得出雙淬滅熒光探針，促使金屬離子如Zn2+、Mg2+、Fe2+等相互作用，通過(guò)反應(yīng)來(lái)輔助酶與底物之間以及酶內(nèi)部的熒光能量共振轉(zhuǎn)移效應(yīng)來(lái)實(shí)現(xiàn)Pb2+的檢測(cè)。

2免疫檢測(cè)技術(shù)

免疫檢測(cè)技術(shù)主要是基于抗體與抗原之間的特異性反應(yīng)基礎(chǔ)上構(gòu)建的生物化學(xué)檢測(cè)法，其優(yōu)勢(shì)在于靈敏度較高并且特異性較強(qiáng)。鑒于抗體具有著不同的種類(lèi)，因此免疫檢測(cè)亦分為單克隆抗體與多克隆抗體兩種，當(dāng)前常用的檢測(cè)方式主要有酶聯(lián)免疫法與熒光偏振免疫法。其中酶聯(lián)免疫法屬于單克隆抗體檢測(cè)法，通過(guò)合成Pb2+抗原用來(lái)免疫小鼠。要想獲得Pb2+的有效抗體，則需要先獲得Pb2+。通過(guò)功能的雙螯合，獲得反應(yīng)原性，之后再結(jié)合螯合劑與載體蛋白促使其獲得免疫原性，在小鼠體內(nèi)注射之后分離出抗原，進(jìn)而進(jìn)行鉛檢測(cè)。很多研究顯示，Pb（II）.CHXDTPA復(fù)合體同摻入Pb2+之后的2Cl2的親和力明顯提升，大約達(dá)到25倍，并且實(shí)驗(yàn)證明，Pb2+也是唯一能夠提升兩者親和力的金屬離子。而熒光偏振免疫法的原理主要是依靠樣品中的Pb2+同過(guò)量螯合劑的溶液反應(yīng)，通過(guò)免疫復(fù)合物之間的競(jìng)爭(zhēng)，獲得多克隆抗體當(dāng)中的特異性，最后用熒光偏振儀進(jìn)行測(cè)定，得出的數(shù)據(jù)對(duì)比標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，則能夠得出Pb2+濃度。此檢測(cè)方式應(yīng)用的便利性已經(jīng)被很多研究證實(shí)，比如有的研究采用螯合物制備的多克隆抗體在熒光偏振儀當(dāng)中測(cè)出了138個(gè)土壤樣品當(dāng)中的Pb2+含量，熒光偏振免疫同火焰原子吸收光譜法與電感耦合等離子體所測(cè)得的與結(jié)果相關(guān)的系數(shù)取值分別為0.95與0.92，可見(jiàn)檢測(cè)的范圍較廣，并且交叉反應(yīng)率極低，在確保能夠在室內(nèi)順利檢測(cè)的同時(shí)，還能夠?qū)崿F(xiàn)室外檢測(cè)。并且相比之下，具有著低成本、高速率等優(yōu)勢(shì)，應(yīng)用價(jià)值較高。目前，在生物化學(xué)技術(shù)的推動(dòng)下，Pb2+檢測(cè)的免疫檢測(cè)水平逐漸升高，雖然優(yōu)勢(shì)作用明顯，但弊端也依然存在，最主要的就是體現(xiàn)在抗體數(shù)量有限方面，同時(shí)，檢測(cè)過(guò)程如何實(shí)現(xiàn)從實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)移到現(xiàn)實(shí)生活當(dāng)中亦是一個(gè)需要進(jìn)一步解決的問(wèn)題，還需要避免金屬離子之間的交叉反應(yīng)影響過(guò)大等問(wèn)題。

3超分子Pb2+生物化學(xué)傳感檢測(cè)技術(shù)

在超分子化學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展的推動(dòng)作用下，用于檢測(cè)Pb2+的多種檢測(cè)技術(shù)已被研發(fā)生成。此方式檢測(cè)技術(shù)主要是通過(guò)超分子生物化學(xué)傳感儀來(lái)實(shí)現(xiàn)，原理是在離子誘導(dǎo)的作用下使超分子熒光信號(hào)產(chǎn)生相應(yīng)的變化。已有研究采用在PVC膜上固定乙醇介質(zhì)的熒光傳感器用來(lái)檢測(cè)Pb2+，優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)表現(xiàn)為具有著極強(qiáng)的敏感性與選擇性，反應(yīng)快速而及時(shí)；另外還有研究采用一種新型熒光肽金屬離子傳感器形成新的螯合物，該傳感器的特點(diǎn)是含有酰胺與色氨酸，在與金屬離子作用后，用于檢測(cè)，能夠通過(guò)熒光的響應(yīng)來(lái)識(shí)別。

4結(jié)論

綜上所述，隨著相關(guān)技術(shù)的不斷發(fā)展，目前此領(lǐng)域技術(shù)亦在進(jìn)行著不斷深入的研究，應(yīng)用也越來(lái)越廣泛。加之現(xiàn)代社會(huì)對(duì)生態(tài)環(huán)境和諧的要求越來(lái)越高，因此鉛離子的檢測(cè)也將朝向高精度、高效率、低成本方向發(fā)展。尤其是Pb2+檢測(cè)的方式與技術(shù)，更是會(huì)被不斷賦予著更高的重視，技術(shù)水平的發(fā)展亦永不止步。

作者：王彥輝 單位：通遼職業(yè)學(xué)院