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這一天終于到來(lái)了,大家準(zhǔn)備好了毛巾,早早地來(lái)到學(xué)校。同學(xué)們和往常一樣,在教室里進(jìn)行早自習(xí)。突然,一陣警報(bào)聲打破了瑯瑯書(shū)聲。大家開(kāi)始大叫起來(lái),有的手心出汗,有的身體發(fā)抖,兩頰的肌肉緊繃著,還有的呆呆地望著老師,希望老師能想他伸出援助之手。教師里頓時(shí)炸開(kāi)了一鍋粥。
老師嚴(yán)肅地對(duì)大家說(shuō):“大家請(qǐng)安靜,不要慌張?,F(xiàn)在排成一隊(duì)。女生在前,男生在后?!边@時(shí),單熠州小聲嘀咕:“魏老師也太重男輕女了,憑什么男生在后面呀?!笨煞街蹍s擺出一副紳士態(tài)度,說(shuō):“人要有謙讓精神嘛?!闭f(shuō)著擺了一個(gè)pose。
大家在門口排成一隊(duì),用毛巾捂住嘴巴和鼻子,臉上都寫滿了緊張和驚慌,課只有石曹壯在那兒嘻嘻哈哈笑個(gè)不停,大家的心都提到了嗓子眼,石曹壯才知道問(wèn)題的嚴(yán)重性。
大家小心翼翼地下樓,每當(dāng)?shù)搅宿D(zhuǎn)彎口,就會(huì)有一位老師站在那兒,保護(hù)同學(xué)們的安全?!鞍ミ?!”前面?zhèn)鱽?lái)了一個(gè)小女孩的叫聲,原來(lái)她被別人推了一下。瘦小的她一下子摔倒在了地上。那個(gè)小姑娘堅(jiān)強(qiáng)地爬了起來(lái),拍了拍粘滿灰塵的膝蓋,對(duì)同伴說(shuō):“我沒(méi)事?!闭f(shuō)完又跑步前進(jìn)了。當(dāng)我們達(dá)到二樓時(shí),火勢(shì)更大了。徐老師一邊跺腳,一邊著急地對(duì)我們大喊:“加快速度,快!快!”聽(tīng)到這句話,我們跑得更快了。
到了操場(chǎng),老師清點(diǎn)完人數(shù),宣布我們班除了傷員以外沒(méi)有一個(gè)人“葬身火?!?,我們歡呼起來(lái)。當(dāng)大隊(duì)部宣布只用了3分25秒,全場(chǎng)爆出的掌聲如春天的驚雷,夏天的暴雨一般,幾只鳥(niǎo)兒在我們頭頂上飛翔,像在為我們慶祝這次演習(xí)的順利完成。
余姚市實(shí)驗(yàn)小學(xué)
【摘要】目的:探討CIK、DC-CIK細(xì)胞在抗鼻咽癌CNE2細(xì)胞中的作用。方法:采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽法對(duì)經(jīng)過(guò)體外誘導(dǎo)、擴(kuò)增的CIK和體外培養(yǎng)的DC-CIK對(duì)鼻咽癌CNE2細(xì)胞殺傷活性進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果:在滴度 1:10以上時(shí)DC-CIK細(xì)胞對(duì)鼻咽癌CNE2細(xì)胞殺傷活性明顯比CIK細(xì)胞高(P<0.05)。結(jié)論:在抗鼻咽癌CNE2細(xì)胞的作用方面DC-CIK比單純CIK細(xì)胞顯著增高。
【關(guān)鍵詞】CIK細(xì)胞;DC-CIK細(xì)胞;鼻咽癌CNE2細(xì)胞
鼻咽癌作為多基因遺傳疾病,其發(fā)病誘因很多,包括飲食習(xí)慣、環(huán)境因素、人類皰疹病毒感染、遺傳因素等多種因素,其具體的發(fā)病機(jī)制目前還不清楚,但近年相關(guān)研究顯示,鼻咽癌的生物學(xué)行為、產(chǎn)生、發(fā)展與鼻咽癌細(xì)胞的凋亡和增殖失調(diào)有關(guān),因此,對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的抑制和其凋亡的促進(jìn)是防治鼻咽癌的關(guān)鍵。CIK細(xì)胞作為細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺手細(xì)胞,是具有殺菌活性高、體外繁殖能力強(qiáng)的光譜抗瘤免疫細(xì)胞,DC-CIK細(xì)胞是CIK細(xì)胞和目前抗原遞呈細(xì)胞中已知功能最強(qiáng)的DC細(xì)胞共同培養(yǎng)物,為探討DC-CIK、CIK細(xì)胞在抗鼻咽癌CNE2細(xì)胞的作用,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽法其傷活性進(jìn)行了檢測(cè)。
1 資料和方法
1.1 研究試劑: 培養(yǎng)基選用TaKaRa生物技術(shù)有限公司的GT-T551無(wú)血清培養(yǎng)基,試劑盒選用Promega公司的Cyto Tox96細(xì)胞毒試驗(yàn)試劑盒,用R&D公司的CD3McAb、rhIL-2、rhlL-1、rh TNF-a、rhIFN-y、rhGM-CSF進(jìn)行培養(yǎng),采用CD3、CDl4、CD3CD4、CD3CD56、CD3CD8、鼠抗人CDla、FITC兔抗鼠熒光二抗和HLA―DR等流式細(xì)胞儀標(biāo)記抗體。
1.2 細(xì)胞培養(yǎng)和誘導(dǎo)方法
1.2.1 體外誘導(dǎo)、擴(kuò)增CIK細(xì)胞的方法: 采集在健康體檢部門進(jìn)行體檢的健康人群的30ml外周血,采用淋巴細(xì)胞分離液將PBMNC從血樣例分離出來(lái)后,用GT-T551無(wú)血清培養(yǎng)液將細(xì)胞濃度調(diào)至4×106/ml至6×106/ml水平并放入5%二氧化碳培養(yǎng)箱,將培養(yǎng)箱調(diào)至37℃進(jìn)行2h的培養(yǎng),將非貼壁細(xì)胞收集后,用IMDM(含10%人AB血清)將細(xì)胞濃度調(diào)至1×106/ml至2×106/ml水平,然后加入IFN-a1000U/ml進(jìn)行懸浮培養(yǎng)24小時(shí),再將1000U/ml rh1l-2和CD3單克隆抗體1ug/ml加入其內(nèi),并半量換液,3天半/次,換液后行rh1l-2的補(bǔ)充,使細(xì)胞濃度一直保持在1×106/ml至2×106/ml水平。
1.2.2 體外培養(yǎng)DC方法:將血樣中分離并培養(yǎng)了2小時(shí)的PBMNC中的提筆細(xì)胞收集,并將其加入含有1000U/ml IL-4和GM-CSF的GT-T551無(wú)血清培養(yǎng)液,同樣,放入5%二氧化碳培養(yǎng)箱并將溫度設(shè)至37℃培養(yǎng),行換液1次/3d并及時(shí)補(bǔ)充rh1l-2細(xì)胞因子,第二次換液時(shí),將CNE2細(xì)胞凍融液加入,然后在培養(yǎng)一天。
1.2.3 DC-CIK細(xì)胞培養(yǎng)方法: 將以上培養(yǎng)獲取的DC合CIK細(xì)胞計(jì)數(shù)并按照1:5的比例進(jìn)行混合培養(yǎng)3天。
1.3 檢測(cè)方法:嚴(yán)格按照Cyto Tox96細(xì)胞毒試驗(yàn)試劑盒的操作規(guī)程實(shí)施試驗(yàn)操作,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽法,檢測(cè)CIK和DC-CIK的對(duì)鼻咽癌CNE2細(xì)胞殺傷活性。
1.4 統(tǒng)計(jì)方法: 采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS11.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)用t檢驗(yàn)并用標(biāo)準(zhǔn)均數(shù)差(x+s)表示,P<0.05時(shí)表示存在顯著性差異。
2 結(jié)果
在滴度 1:10以上時(shí)DC-CIK細(xì)胞對(duì)鼻咽癌CNE2細(xì)胞殺傷活性明顯比CIK細(xì)胞高(P<0.05),CIK和DC-CIK的滴度越高,其殺傷活性越強(qiáng),詳見(jiàn)表1。
3 討論
鼻咽癌是多基因遺傳惡性腫瘤,引起其發(fā)病的原因很多,很難進(jìn)行有效的預(yù)防,且大部分屬于惡性程度較高的未分化、低分化癌,因此一旦患病,治療難度大。目前臨床治療的主要手段是放射治療,但相關(guān)研究顯示鼻咽癌的單純放射治療僅有50%的5年生存率,鼻咽癌晚期患者治療的5年生存率僅10%到40%,主要原因在于鼻咽癌細(xì)胞的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和局部復(fù)發(fā)[1],以及長(zhǎng)期的放射治療對(duì)患者身體造成嚴(yán)重?fù)p傷機(jī)體修復(fù)能力和承受能力降低。
CIK作為抗腫瘤效應(yīng)細(xì)胞,是主要來(lái)源于人類外周血、臍帶血的單核細(xì)胞在體外經(jīng)多種細(xì)胞因子誘導(dǎo)而產(chǎn)生并大量增殖的異質(zhì)細(xì)胞,其可以有效避免對(duì)患者機(jī)體免疫系統(tǒng)功能和結(jié)構(gòu)的損傷,并將鼻咽癌腫瘤細(xì)胞直接殺死,相關(guān)研究證明[2-3]其在多種實(shí)體腫瘤手術(shù)及放化療等治療方式的輔助免疫治療方面具有良好的效果,并可以使腫瘤患者的癥狀和生活質(zhì)量等方面得到有效改善。DC細(xì)胞是目前效果最強(qiáng)的專職抗原提呈細(xì)胞,其可以通過(guò)一定途徑將腫瘤抗原提呈,使腫瘤細(xì)胞存在的免疫逃避得以抑制。相關(guān)研究顯示[4-6],經(jīng)CIK經(jīng)DC刺激后,其細(xì)胞毒活性增強(qiáng)顯著,有關(guān)體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表示[7]在殺傷多種腫瘤細(xì)胞方面結(jié)合了CIK的高效殺瘤活性和DC強(qiáng)大的抗原提呈能力的DC-CIK細(xì)胞的效果比同條件下的CIK細(xì)胞明顯,本研究結(jié)果顯示在滴度 1:10以上時(shí)DC-CIK細(xì)胞對(duì)鼻咽癌CNE2細(xì)胞殺傷活性明顯比CIK細(xì)胞高(P<0.05),且CIK和DC-CIK的滴度越高,其殺傷活性越強(qiáng),證明在抗鼻咽癌CNE2細(xì)胞的作用方面DC-CIK比單純CIK細(xì)胞顯著增高。
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這一切我都要感謝我的老師韓宇濤,和我的校長(zhǎng)鐘建華.在我上五年級(jí)時(shí),鐘校長(zhǎng)就提出了要在我們學(xué)校選出一些學(xué)生協(xié)助她完成《走進(jìn)?家,了解?家》這個(gè)項(xiàng)目的研究,我有幸成為了研究小組的一員。在鐘校長(zhǎng)和韓老師的帶領(lǐng)下,我們開(kāi)始了為期兩個(gè)月的深入研究和學(xué)習(xí).在研究的過(guò)程中,我們根據(jù)老師的指導(dǎo)進(jìn)行研究學(xué)習(xí),使我們懂得了很多,也知道了很多。
先說(shuō)說(shuō)我們是如何查找的吧!老師首先給了我們一份表格:組員分工表,讓我們先討論并填好表格,然后跟著表格上填的去進(jìn)行操作。正是因?yàn)橛辛诉@份分工詳細(xì)的計(jì)劃表格,才使我們的查找工作變得輕松起來(lái)。我們有的去圖書(shū)館、有的上網(wǎng)查找、有的去詢問(wèn)身邊的人:家長(zhǎng)、鄰居、老師、同學(xué)等,盡全力查找我們想要的資料后,邊把它們進(jìn)行整理,運(yùn)用電腦的幻燈片和文擋設(shè)計(jì)把它們制作成小冊(cè)子、對(duì)比圖、調(diào)查表等,方便我們研究學(xué)習(xí)。在我們已經(jīng)查找到許多關(guān)于?家的資料,對(duì)?家已經(jīng)有了一定的了解后,就要去進(jìn)行深入了解——采訪。記得我們是在開(kāi)始研究后的第三個(gè)星期,便去對(duì)?家老人進(jìn)行采訪了。為了那次采訪,我們想了很多采訪時(shí)要問(wèn)的問(wèn)題,在心里不知打了多少回腹稿,因?yàn)楫吘故堑谝淮?,生怕把采訪搞砸了!
采訪時(shí),由我來(lái)打頭陣,首先去和?家的老奶奶交流,因?yàn)槲沂切?家人,會(huì)說(shuō)?家話,所以和她們不會(huì)有語(yǔ)言的障礙。在采訪的過(guò)程中,給我印象最深的是麥九妹奶奶,她可以說(shuō)是北海甚至廣西的名人,她之所以出名是因?yàn)樗彩窃趥鞒羞@一種特殊的文化——?家文化,她不僅會(huì)唱?家歌曲,還知道許多?家風(fēng)俗。一聽(tīng)說(shuō)我們?cè)谘芯?家,要把?家文化傳承下去,她就十分熱情地解答我們的問(wèn)題,還勉勵(lì)我們一定要努力,好好把這個(gè)項(xiàng)目研究好,為北海留住這樣有歷史價(jià)值的文化。
在采訪結(jié)束后,熱情的麥九妹奶奶和其她幾位?家奶奶還邀請(qǐng)我們到她們的船上看看,這使我們很開(kāi)心,因?yàn)檫@樣可以使我們更加了解?家人的生活。來(lái)到船上,奶奶們就開(kāi)始給我們介紹船上的每一樣?xùn)|西,我們也十分地好奇,東瞧瞧,西看看,隨后奶奶們還親自下廚給我們做了最具?家特色的食品——八寶艇仔粥.通過(guò)奶奶的介紹,我們又知道了八寶艇仔粥中的八寶是指:浮皮、海蟄皮、蔥花、田螺、叉燒、蝦仁、花生、魚(yú)片。
為了認(rèn)真落實(shí)我?;馂?zāi)事故防范措施,消除火災(zāi)安全隱患,最大限度減少損失,確保學(xué)校財(cái)產(chǎn)安全,穩(wěn)定教學(xué)、工作秩序,為了讓全校師生深入了解消防逃生常識(shí),使每一位師生都樹(shù)立起消防意識(shí),真正掌握消防安全知識(shí),并具備自救互救能力,防患于未然,我校準(zhǔn)備舉行消防演習(xí)。
一陣突如其來(lái)的警報(bào)聲劃破寧?kù)o的校園,一聽(tīng)到急促的警報(bào)聲,教室就混亂起來(lái),大家的心跳隨之加快。整個(gè)校園籠罩著緊張的氣氛,好像火災(zāi)真正發(fā)生了。老師一邊指揮我們趕緊撤離,一邊叫我們把紅領(lǐng)巾折好捂住鼻子,并排好隊(duì)有秩序地下樓。全校沸騰起來(lái),我用紅領(lǐng)巾輕輕捂住口鼻,彎著腰緊跟同學(xué)跑向操場(chǎng)。
濃煙滾滾,煙霧繚繞著整個(gè)校園,那裊裊灰煙裹著惡臭,十分刺鼻,樓道被灰色的昏暗的煙氣淹沒(méi)。閉上眼深吸一口,如同陷入了危在旦夕的生死線。沒(méi)人說(shuō)笑,沒(méi)人擁擠,只有紛亂的腳步聲。同學(xué)都以嚴(yán)肅認(rèn)真的態(tài)度對(duì)待,爭(zhēng)分奪秒,井然有序地逃離,不敢逗留一刻。那輕輕的、淡淡的煙在我面前飄著,總是遮住我的部分視線。忽然,我猛地嗆了一口,那種不明氣體霎時(shí)間布滿了我的全身。眼前一切朦朦朧朧,只有緩緩漂移的煙,遲遲不會(huì)散去。
我猛地憋了一口氣,沒(méi)多久,我們到達(dá)了“安全地帶”——空曠的操場(chǎng),心中燃起一絲喜悅。我貪婪地吮吸著清新空氣,讓我在“缺氧”的情況下很滿足……那“死里逃生”的感受難以忘卻,那學(xué)會(huì)生存并自我保護(hù)的種子在不經(jīng)意中扎根在我們的心田。
這次演習(xí)很成功,用時(shí)二分零八秒。我知道了自救、互救的重要性,學(xué)會(huì)了如何安全逃離火災(zāi)現(xiàn)場(chǎng),也深深明白遇到任何事都要鎮(zhèn)靜,真是受益匪淺。接著,我們回到教室,馮教練給我們講了一些平時(shí)火災(zāi)發(fā)生時(shí)應(yīng)有的常識(shí):如撥打119電話,怎樣安全逃生等。
回想起這次逃生經(jīng)歷,我仍心有余悸,久久不能平靜,火災(zāi)帶來(lái)了許多不幸,使很多很多生命從這個(gè)世界悄然離去。通過(guò)本次應(yīng)急疏散演習(xí)活動(dòng),進(jìn)一步提高了我們的安全防范意識(shí),增強(qiáng)了我們自防自護(hù)的能力。
今天下午第三節(jié)課,我們學(xué)校進(jìn)行了一次別開(kāi)生面的逃生演習(xí)。聽(tīng)!廣播里響起了老師緊急的呼叫聲:“全體師生請(qǐng)注意,全體師生請(qǐng)注意,我們學(xué)校接到警方的緊急通知,有個(gè)恐怖組織在我們學(xué)校的底層,安放了兩枚定時(shí)炸彈,現(xiàn)在馬上就要爆炸啦!現(xiàn)在馬上就要爆炸啦!請(qǐng)全體師生馬上撤離教學(xué)樓……”話音未落,同學(xué)們都已信以為真,一窩蜂似的朝門口涌去,老師見(jiàn)狀,趕緊上前維持秩序,可是此時(shí)的同學(xué)們?cè)缫褵o(wú)心排隊(duì),在體育委員的帶領(lǐng)下紛紛跑下樓道。
一下樓,同學(xué)們就像脫韁了的野馬,不顧一切地朝前沖去,而此刻老師的話早已成了耳旁風(fēng),甚至還有同學(xué)帶頭喊口號(hào):“沖啊!沖啊!保住性命要緊,我可不要做‘地下亡魂’,同學(xué)們快跑呀!”經(jīng)過(guò)一番波折,同學(xué)們終于來(lái)到了“安全地”。這時(shí)校長(zhǎng)上臺(tái)給我們進(jìn)行了講解,我們才恍然大悟,原來(lái)今天只是一次逃生演習(xí)??吹轿覀冞@么混亂的場(chǎng)面,校長(zhǎng)很生氣,對(duì)我們進(jìn)行了一番教育,并且宣布重新演習(xí)一次。
退回到教室,同學(xué)們進(jìn)行了一次“洗心革面”,時(shí)刻準(zhǔn)備著下一次的命令。不一會(huì)兒,廣播里又一次響起了緊急通知。這回同學(xué)們吸取了上一次的教訓(xùn),很熟練地排好隊(duì)伍,做好“逃生準(zhǔn)備”,接著就秩序井然地三步并作兩步跑下樓道。因?yàn)樯洗蔚慕逃?xùn),同學(xué)們不再像上次那樣“沖鋒陷陣”,你追我趕??矗捎谕瑢W(xué)們的良好表現(xiàn),還受到了校長(zhǎng)的表?yè)P(yáng)。與此同時(shí)還得到了校長(zhǎng)的一番教導(dǎo):“同學(xué)們,生命是無(wú)價(jià)的,是寶貴的,做什么事都要三思而后行,就像第一次的逃生演習(xí),大家一聽(tīng)到有炸彈,就爭(zhēng)先恐后地沖下樓,完全不顧他人安全,這樣反而會(huì)使更多的人摔倒、受傷,這種行為不是一個(gè)學(xué)生應(yīng)該有的,你們懂嗎?”全校學(xué)生異口同聲:“懂!”這時(shí),校長(zhǎng)欣慰地笑了。后來(lái)校長(zhǎng)又舉了一個(gè)生動(dòng)的例子,教育我們碰到緊急情況,都不要慌張,要沉著思考,應(yīng)考慮他人利益為先等等。
回到教室,我不禁又想起昨天晚上從電視里看到的一則新聞:一所小學(xué)的教室倒塌了,人沒(méi)有因倒塌而受傷,反而是在逃離教室時(shí),沒(méi)有秩序,亂跑亂叫,以導(dǎo)致了十幾名學(xué)生不同程度的受傷。這時(shí),我不禁陷入了沉思……
指導(dǎo)老師:金淑慧