冬至的文案
前言：想要寫出一篇令人眼前一亮的文章嗎？我們特意為您整理了5篇冬至的文案范文，相信會為您的寫作帶來幫助，發(fā)現(xiàn)更多的寫作思路和靈感。
冬至的文案范文第1篇
2.冬，見影如晤，愿你我，溫如春熙。
3.冬至，古城如舊，恰好是雪落長街，與你初逢。
4.妝白之冬，愿負暄食暖，心素如初。
5.每個日子都值得慶祝，星星，飛雪和你。
6.世界再大，大不過一盤餃子。
7.今夜最長，今夜最漫長。
8.白天最是時光短，花餃入湯暖夜長。
9.太陽公公要從南半球回來啦。
10.時光靜謐無聲，冬至悄然而至；指尖白露凝霜，流年安然無恙。
11.撿拾一路暖香，裝點歲月情長；詩酒年華過往，依舊惜君如常。
12.吃點餃子，喝點羊湯，終結(jié)這靠抖腿發(fā)熱的冬天。
13.歲末將至，敬頌冬綏。 煮酒溫茶，滿飲此杯。大雪將至，萬事勝意。
14.祝眉目舒展，順問冬安。
15.我托人間寄訊，邀雪稱慶，為你捎來清佳冬令。
16.小雪落舊檐，新爐燙陳釀，山頭月落，故人當歸。
17.晝短夜長，好湯圓。
18.太陽從南半球回歸，溫暖也在不遠之日。
19.冬至吃了這碗餃子，快樂就會時常繞你身邊。
20.在最長的冬夜里，等春的照面。
21.冬至問安！再忙，也要吃餃子哦～。
22.眉眼舒展，未來可期。
23.踏破十二月碎寒的孤勇，折盡臘梅枝頭的墨梅，是風雪臣，亦是驚鴻客。
24.愿所得皆所期，所失皆無礙，用溫暖迎接整個冬日。
25.白天最是時光短，花餃入湯暖夜長。
26.我不怪你春夏秋沒來，但冬至到了，你總該來了。
27.春去秋來，立夏冬至，周而復(fù)始，年年有余。
28.家家搗米做湯圓，知是明朝冬至天。
29.遇見冬至，世界漸寒;遇見你，我心漸暖。
冬至的文案范文第2篇
一、加強對排球運動員的文化、技能教育，提高排球運動員的文化素質(zhì)及從業(yè)技能
排球退役運動員的文化素質(zhì)及從業(yè)技能關(guān)系著運動員退役后能否找到理想的工作以及對工作的滿意程度，因此努力提高運動員的文化素質(zhì)和從業(yè)技能就顯得很重要。在役運動員大多是很小就進入體校進行訓(xùn)練，沒有接受過科學(xué)、全面、系統(tǒng)的教育，因此，體育主管部門和運動隊應(yīng)努力與相關(guān)教育部門協(xié)調(diào)配合，積極邀請高校文化課教師對在役運動員進行授課。而排球?qū)I(yè)運動隊，也可充分借助高校辦學(xué)力量聯(lián)合辦學(xué)，彌補體育系統(tǒng)自辦教育水平不高的缺陷。排球?qū)I(yè)運動隊除與鄭州大學(xué)體育學(xué)院進行合作辦學(xué)外，還應(yīng)該與河南大學(xué)、鄭州大學(xué)等綜合類院校進行合作辦學(xué)，做到學(xué)分互認。排球運動員既可以在體育學(xué)院進行專業(yè)訓(xùn)練和專業(yè)知識的學(xué)習(xí)，同時又可以在綜合類院校豐富學(xué)習(xí)內(nèi)容。與此同時，排球運動員自身也應(yīng)該對當前的就業(yè)形勢有一個充分的認識。隨著退役補償資金安置政策的實施，自主擇業(yè)成了大部分排球退役運動員的主要選擇方式，只有全面提高自身綜合文化素質(zhì)和從業(yè)技能，才能在退役后找到較為理想的工作，得到工作單位領(lǐng)導(dǎo)及同事的認可，以尋求退役后的優(yōu)化發(fā)展。
二、創(chuàng)造排球運動員與社會接觸的機會，提高其與人溝通、協(xié)調(diào)的能力
運動員長期處于封閉式訓(xùn)練環(huán)境中，與社會接觸的機會較少，其社會經(jīng)驗缺乏，與人溝通、協(xié)調(diào)能力差，所以要盡可能地創(chuàng)造排球運動員與社會接觸的機會，提高他們與人溝通、協(xié)調(diào)的能力，需做好以下幾點：
第一，運動員應(yīng)積極主動地與教練員進行交流，及時向教練員匯報自己的思想和對問題的看法，教練員也應(yīng)把自己的訓(xùn)練理念、訓(xùn)練內(nèi)容、訓(xùn)練方法和手段與運動員進行溝通和交流。第二，加強排球?qū)I(yè)運動隊與高校排球運動隊之間的交流與合作，場上切磋球技、場下交流感情。第三，積極鼓勵排球運動員在訓(xùn)練間隙進入社區(qū)，與社區(qū)參與體育鍛煉的人進行球技的交流和感情的溝通。第四，要加強文化知識的學(xué)習(xí)，因為知識的獲取能幫助運動員樹立正確的價值觀念，開闊他們的視野，讓他們站在更高的境界審視人生。第五，提高運動員的文化素養(yǎng)。這樣不僅可以促進他們競技水平的提高，還可以提高他們與人溝通、協(xié)調(diào)的能力。
三、拓寬排球退役運動員就業(yè)渠道，促進運動員就業(yè)多元化發(fā)展
河南省體育主管部門一定要根據(jù)社會主義市場經(jīng)濟的發(fā)展規(guī)律和勞動人事制度改革的要求，結(jié)合退役運動員的就業(yè)趨向，合理、科學(xué)地制定新的就業(yè)安置政策，不能只限于國有企事業(yè)單位等單一渠道，應(yīng)努力拓展其他事業(yè)單位、三資和鄉(xiāng)鎮(zhèn)企業(yè)、私人公司、公安武警系統(tǒng)單位甚至國際市場等多元化安置渠道。
在安置政策方面，首先，要優(yōu)先考慮退役運動員到體育行業(yè)新增加的就業(yè)崗位去工作，積極幫助退役運動員從事社會體育指導(dǎo)員、基層體校教練和社區(qū)體育服務(wù)工作等。其次，要建立退役運動員相關(guān)信息工作部門，為退役運動員的就業(yè)提供及時、可靠的信息。再次，要專門建立體育人才市場，幫助河南省排球退役運動員聯(lián)系其他省市的運動隊甚至國外運動隊，推薦他們在其他省市從事運動員或教練員的職業(yè)。以上安置渠道是國家安置政策的良好補充，可以在目前退役運動員就業(yè)安置難度增大的環(huán)境下，開展用人單位和退役運動員之間的雙向選擇，盡最大可能做到人盡其才。
四、積極組織運動員職業(yè)管理，強化排球運動員職業(yè)前期教育
運動員職業(yè)生涯管理有助于運動員明確退役后的發(fā)展方向和目標。而運動員職業(yè)生涯管理除依靠運動員自身努力外，還需要得到組織上的支持和幫助。
冬至的文案范文第3篇
志愿者日活動方案1
一、活動主題：奉獻愛心，美化校園
二、活動目的：為了通過參加志愿者組織為更多人提供一個鍛煉自我，服務(wù)他人的機會。引導(dǎo)學(xué)生融入學(xué)校，了解同學(xué)，弘揚奉獻、友愛、互助、進步的志愿精神。構(gòu)建諧社會，營造校園文明新風尚，推動志愿服務(wù)事業(yè)的發(fā)展。
三、活動背景：12月5日是國際志愿者日，全世界的志愿者將在這一天開展豐富多彩的志愿服務(wù)活動，進一步倡導(dǎo)志愿精神。培養(yǎng)志愿服務(wù)理念，以實際行動迎接自己的節(jié)日，今年的志愿者日，為了擴大青年志愿者協(xié)會在社會和同學(xué)間的影響及認同感，特此舉行本次活動。
四、活動流程
(一)活動準備流程：
1、由協(xié)會行政部、組織部進行策劃工作，并由秘書部來協(xié)助收集與國際青年志愿者，國內(nèi)青年志愿者有關(guān)的發(fā)展史，以及本協(xié)會近期的活動及取得的成績和相關(guān)的圖文資料。
2、由宣傳部做出本次活動的宣傳海報，宣傳方式以橫幅、傳單、問卷調(diào)查等方式均可。
3、需用物資包括：請柬(作邀請相關(guān)重要與會人員用)，板報(供宣傳部宣傳用)，簽字橫幅、簽字筆(供有興趣的人簽名留念用)，彩帶(沒位志愿者左手臂系一條作為志愿者表志)，宣傳圖片(展示、宣傳校青年志愿者協(xié)會)
(二)活動流程：
1、所有協(xié)會成員在校田徑場八點準時集合，由協(xié)會會長發(fā)表活動前講話并由組織部部長分配任務(wù)。
2、秘書部負責活動登記、記錄工作。
3、開始活動，并由秘書部向各負責人分發(fā)問卷調(diào)查表、宣傳單等需用品。
4、各負責人分配具體任務(wù)
5、全體集合，進行活動總結(jié)。
五、活動地點：x小區(qū)。
六、活動時間：20XX年12月5日
志愿者日活動方案2
一、活動背景：
12月5日世界志愿者日
二、活動目的：
通過此次宣誓儀式,使青年志愿者們樹立強烈的責任感 及無私的奉獻精神,在未來的日子里以實際行動詮釋志愿者精神,履行志愿者義務(wù),將“奉獻、友愛、互助、進步”的志愿者精神帶到社會每個角落。
三、活動主題
“這個冬天 用我熱情溫暖你我
四、活動形式 （三大服務(wù)）
㈠“一杯熱水 溫暖你也溫暖我”為在等車的乘客免費送上一杯熱水
㈡“我們的熱情 捧在懷里 暖在心底”為在等車的乘客送上一個自制暖手瓶
㈢“這個季節(jié) 有我與你同行”為在進出火車站和汽車站的乘客提行李拿包裹
五·活動時間：xx年12月5日下午4：30
六.活動地點：㈠塊活動場所 火車南站
㈡面活動場所 市客運中心站 汽車北站
㈢點活動場所 靈橋西公交車站 天一東門公交車站
萬達北門公交車站 城隍廟公交車站 邱隘公交車站
七、具體活動內(nèi)容安排
總要求
①每一支志愿者隊伍必須帶一面志愿者旗幟，內(nèi)容為“浙江萬里學(xué)院商學(xué)院青年志愿者協(xié)會”
②每一位志愿者必需手掛五色微笑絲帶
③每一支隊伍都必需配備一個記錄員，負責拍照和記錄活動過程
八.活動參與人員：全院青年志愿者
九、前期準備
1、召開浙江萬里學(xué)院商學(xué)院青年志愿者協(xié)會全體會議，討論并擬定活動計劃，明確項目內(nèi)容和項目分工。
2、會長組織相關(guān)人員到各活動場所采點
3、有外聯(lián)部聯(lián)系活動場所主要負責人，待其許可，協(xié)商本次活動的各項具體安排及相關(guān)細節(jié)。
4、取得學(xué)院團委的批準，并開出本次活動的許可證明。
5、活動宣傳（海報、橫幅等），招募志愿者，并由活動部負責采購活動必備品。
6、確定參加活動的志愿者人數(shù)，向其再次補充介紹情況，積極動員他們到時候通力協(xié)作，圓滿完成既定服務(wù)項目。
7、準備活動設(shè)備（相機、旗幟、橫幅、五色彩帶、桌子、紙杯等）
十、注意事項：
1、11：45在學(xué)校后門集合準時出發(fā)，出發(fā)前集中志愿者，清點人數(shù)，交代細節(jié)。
2、志愿者要秉持“文明禮貌，優(yōu)質(zhì)服務(wù)”的原則，以平等親善的態(tài)度對待每位行人，不得與任何行人發(fā)生爭執(zhí)。且與行人說話時要有愛心、信心和耐心。
3、所帶東西必須要在安全范圍之內(nèi)，不可以是易燃易爆，具有腐蝕性、放射性的危險物品。
4、進行勞動時，所有志愿者必須認真負責，不可自行到處閑逛，開小差。全體參與者必須遵守學(xué)院的工作紀律和規(guī)章制度。
5、志愿者要自覺遵照場地工作人員的指導(dǎo)和幫助完成工作，切不可不聽指揮，蠻干亂干，擾亂工作計劃，一切均需按照既定計劃嚴格執(zhí)行。
6、參加人員要注意安全，要有團隊意識，決不可單獨行動，不聽指揮。遇到突發(fā)問題要及時上報學(xué)院領(lǐng)導(dǎo)。
7、參加勞動時需要小心翼翼，切忌碰到行人，且不允許對行人有任何危險動作，以免對他們的身體造成傷害。
8、注意天氣變化，做好下雨、刮風等不利天氣的應(yīng)對方案。
9、各活動項目在具體執(zhí)行時可以根據(jù)情況實施靈活創(chuàng)新的做法，爭取在往年經(jīng)驗的基礎(chǔ)上更上一層樓。
10、活動結(jié)束后，召集志愿者并清點人數(shù)。
11、收集各分活動場所的圖片文字資料經(jīng)行總結(jié)。
十一、活動物品
志愿者招募海報
活動橫幅
一次性紙杯
桶裝礦泉水
五色絲帶
志愿者旗幟
桌子
飲水機
熱水瓶
已消毒塑料空瓶
青年志愿者協(xié)會
志愿者日活動方案3
一、活動背景： 12月5日世界志愿者日
二、活動目的： 通過此次志愿服務(wù)活動，使志愿者們樹立強烈的責任感 及無私的奉獻精神，在未來的日子里以實際行動詮釋志愿者精神，履行志愿者義務(wù)，將“奉獻、友愛、互助、進步”的志愿者精神發(fā)揚光大。從而 擴大志愿者的號召力，讓更多的人認識志愿者，了解我們的愛心活動，共同攜 手讓我們的世界變得更加溫馨，更加和諧而美好!
三、活動主題 “傳遞愛心 助飛希望 創(chuàng)造未來”
四、活動口號：“我志愿、我奉獻、我快樂!”
五、活動時間： 20XX年12月4日
六，活動地點： XXXX廣場(西湖口)
七、主辦單位：XX志愿者協(xié)會
承辦單位：XX志愿者協(xié)會
八、活動內(nèi)容：義賣、義捐、義診、義剪。通過溆浦志愿隊的宣傳發(fā)動，號召社會愛心人士捐贈個人愛心物品，收集并篩選后進行現(xiàn)場公開義賣;組織大型募捐，接受企業(yè)、單位和個人的捐贈，并將所得與義賣收入統(tǒng)一交至溆浦志愿者慈善會轉(zhuǎn)發(fā)給貧困群體。(注意：愛心人士所捐贈的義賣物品，必須是全新書籍，文具用品、玩具、飲料、食品等，)
九、具體安排：
XX志愿者協(xié)會成立"20XX傳遞愛心 助飛希望”愛心義賣項目組，負責活動的整體策劃和協(xié)調(diào);志愿隊及社會愛心人士成立各行動小組，配合項目組具體展開活動。
十、活動組織：
1、義賣外聯(lián)
負責義賣場地的聯(lián)系及愛心商家的聯(lián)系。
2、現(xiàn)場協(xié)調(diào)：
主要負責各組工作的協(xié)調(diào)，兩處義賣點間人員、物質(zhì)調(diào)配。
3、義賣宣傳：
主要負責義賣活動的橫幅和義工宣傳資料、音響準備以及活動拍照等工作。
4、義賣物資采購：
負責義賣物品的準備、采購、物品定價。
5、義賣財務(wù)：
義賣現(xiàn)場收費以及賬目結(jié)算。
6、現(xiàn)場義賣(人員不限)：
主要負責義賣時物品的保管及售賣工作，義賣時要做好物品發(fā)放的登記工作，同時負責記錄義賣情況。
7、后勤安保組 ：
主要負責義賣活動現(xiàn)場桌椅、雨棚、橫幅、音響等搬運、義賣場地布置及義賣結(jié)束后物品清理，義賣期間的秩序維持，同時協(xié)助宣傳組做好現(xiàn)場宣傳布置工作。特別是人員安全保護工作、防盜、防哄搶、防擠壓，協(xié)助義賣組做好義賣物品、音響器材等的保管工作及其它后勤服務(wù)工作。
志愿者日活動方案4
一、活動背景
志愿服務(wù)是一項高尚的事業(yè)，志愿者所體現(xiàn)和倡導(dǎo)的“奉獻，友愛，互助，進步”的精神是中華民族助人為樂、扶貧濟困的傳統(tǒng)美德和雷鋒精神的繼承、創(chuàng)新和發(fā)展。2009年12月5日是第24屆國際志愿者日，全球的志愿者將在這一天開展豐富多彩的志愿服務(wù)活動，進一步倡導(dǎo)志愿精神，培育志愿服務(wù)理念，以實際行動迎接自己的節(jié)日。根據(jù)《**學(xué)院管理學(xué)院與**共建文明和諧社區(qū)實施方案》，我院青年志愿者服務(wù)隊將用國際志愿者日這一天，在社區(qū)開展以豐富社區(qū)文化為主題的社區(qū)志愿服務(wù)，努力發(fā)展社區(qū)群眾文化活動，豐富群眾性業(yè)余文化生活，提高居民的思想文化水平，推動社區(qū)文化活動健康有序進行，共建文明社區(qū)。
二、活動目的
1、豐富社區(qū)文化生活，共建“團結(jié)，互助，豐富”的社區(qū)文化，讓居民積極參與到共建和諧社區(qū)的活動中。
2、為了有效動員和組織青年以志愿服務(wù)方式參與公益活動，發(fā)揮青年人在促進社會和諧方面的重要作用。
3、進一步增強我校大學(xué)生的社會責任意識，展現(xiàn)當代大學(xué)生的精神風貌，也讓我們提高志愿者服務(wù)能力。
4、發(fā)揚志愿者“奉獻，友愛，互助，進步”志愿者精神。把志愿者樂于助人的優(yōu)秀品德帶進居民社區(qū)。
三、活動主題
“豐富社區(qū)文化，共建和諧社區(qū)”
四、活動意義
通過此活動為豐富社區(qū)文化貢獻力量，培養(yǎng)青年志愿者“服務(wù)社會，奉獻愛心”的觀念，倡導(dǎo)志愿者精神，全面發(fā)展和提高大學(xué)生的綜合素質(zhì)，增強我校學(xué)生的社會責任意識，同時進一步豐富了社區(qū)居民的文化生活，大力倡導(dǎo)社會文明新風，讓更多的居民參與到共建和諧社區(qū)的隊伍中。
五、活動時間
2009年12月5日
六、活動地點
****
七、前期準備
1、12月1日：組織服務(wù)隊人員到**社區(qū)熟悉環(huán)境
2、12月1日：晚上回來后組織召開青年志愿者會議根據(jù)實地考察情況計劃活動并擬定方案，明確項目、內(nèi)容
3、12月1日—12月5日：進行活動宣傳和物資準備（海報、橫幅、宣傳材料由指定人員制作購買）
4、12月2日：聯(lián)系本校社團***，邀請他們參與我們的活動；同時與**居委協(xié)商本次活動的各項具體安排及相關(guān)細節(jié)
5、12月3日：
（1）及時將宣傳海報貼到社區(qū)，把邀請函送到社區(qū)，讓社區(qū)居
民了解我們的志愿者日活動。
（2）服務(wù)隊志愿者分組到**社區(qū)居民區(qū)（**市場周圍）和市政府廣場，向社區(qū)居民宣傳我們活動，鼓勵并邀請社區(qū)群眾參與，并統(tǒng)計需要我們義務(wù)勞動的孤寡老人。
5、12月3日：晚上再次組織青年志愿者會議確定參加活動的志愿者人數(shù)，并確定各志愿者分工安排。
6、12月1日—12月5日：進行活動宣傳（海報、橫幅、宣傳材料由指定人員制作購買）
7、12月4日：準備活動設(shè)備（卡紙、五子棋、相機、桌椅、音響、小禮品、海報、衛(wèi)生工具等）
備注：三條橫幅，分別寫
①“豐富社區(qū)文化，共建和諧社區(qū)”
②“12·5國際志愿者日‘和諧社區(qū)服務(wù)隊’主題活動” ③“**學(xué)院管理學(xué)院與**共建文明和諧社區(qū)”（三幅海報一條以宣傳國際志愿者日為主，另外兩條以宣傳豐富社區(qū)文化為主。）
八、活動開展 （12月5日）
上午：
方案一（**集貿(mào)市場志愿者服務(wù)）
1.7：20 所有服務(wù)隊志愿者在宿舍樓下集合，帶好勞動工具，并清點人數(shù)，統(tǒng)一到中心參加“國際志愿者日啟動儀式”。
2.10：00 出征儀式結(jié)束后，服務(wù)隊所有成員帶到**社區(qū)。
3.10：30 達到**社區(qū)后，布置會場，準備活動使用的工具和材料，并分配到每一部分的活動上。
4.11：00—12：00 志愿者根據(jù)社區(qū)情況，分成不同小組進入孤寡老人家，幫助他們打掃衛(wèi)生，并了解他們的在生活上的困難和需要。
5.12：00 志愿者集合，收拾好衛(wèi)生工具，清點人數(shù)，午休。方案二（市政府廣場志愿者活動）
1.7：20 部分服務(wù)隊志愿者成員和我校**社團會員在宿舍樓下集合，清點人數(shù)，準備好活動材料、音響等設(shè)備和材料，統(tǒng)一帶到市政府廣場（市政府廣場噴泉前方）。
2.7：40 所有人員到達市政府廣場，準備設(shè)備電源連接及調(diào)試，并把活動材料布置到位。
3.8：00—10：30 社區(qū)文化節(jié)舞會開始，由舞當派會員指導(dǎo)，按照我校每周的校園舞會，教不同種類的舞步，讓感興趣的社區(qū)群眾前來學(xué)習(xí)舞步，讓我們大學(xué)生與社區(qū)群眾在舞蹈中互動，讓他們感受我們的校園文化氣氛。
4.10：30 舞會結(jié)束時，給大家介紹我們的志愿者活動，鼓勵大家參與到志愿者服務(wù)當中，并邀請他們參加我們的其他社區(qū)活動。
5.10：50—11：30 整理設(shè)備，部分成員帶回設(shè)備，志愿者開展“**廣場美化活動”，除清掃活動地點外，將**廣場活動地環(huán)境美化。
6.11：30 清點人數(shù)，收拾工具，統(tǒng)一帶回學(xué)校。
下午：(和諧社區(qū)文化節(jié)活動）
14：30—17：30
1.猜謎活動（準備已經(jīng)編好號的數(shù)十個謎語、腦筋急轉(zhuǎn)彎，猜中者得小禮品一份，猜完為止，共一人）
2.五子棋擂臺賽（一人守擂，一人挑戰(zhàn)，守擂三次成功者有獎品，共三人）
3.生活小竅門競答（準備10份題目，每份三個關(guān)于生活小竅門的問題，答對2題送棒棒糖一個，連對三題送洗衣粉一包，共兩人）
17：30—18：00，活動結(jié)束，打掃衛(wèi)生，清點人數(shù)，統(tǒng)一帶回。 晚上：組織志愿者到**體育館觀看“國際志愿者日晚會”
九、經(jīng)費預(yù)算
1、宣傳海報數(shù)量：2 張金額：40元
2、橫幅數(shù)量：3條金額：200元
3、洗衣皂數(shù)量：10塊金額：20元
4、洗衣粉數(shù)量：10包金額：20元
5、五子棋數(shù)量：3副金額：45元
6、中性筆數(shù)量：15只金額：30元
7、棒棒糖數(shù)量：20個金額：10元
8、牙膏數(shù)量：10個金額：30元
9、材料費金額：20元
10、其他金額：50元
總計：465元
十、注意事項
1.參加活動的人員注意安全，特別是在帶去帶回的途中要注意交通安全。要有團隊意識，不可擅自單獨行動，聽從統(tǒng)一安排調(diào)動。
2.注意天氣變化，做好應(yīng)急措施。
3.在活動中不能對老弱病殘有任何危險動作，注意說話語氣和態(tài)度，注意禮貌問題。
4.兩個游戲同時進行時，每個游戲由一到兩個人負責，要求參與者遵守游戲規(guī)則。
5.活動過程中要求每個參與者不能破壞社區(qū)的公共設(shè)施，不得影響社區(qū)正常生活秩序。
6.舞會電源準備要注意避免漏電，用電要嚴格且安全。要保證舞會帶去的音響等設(shè)備安全帶回，不能有遺失。
6.橫幅要在12月3號之前做好，12月4日掛于**社區(qū)和**廣場。
7.活動結(jié)束后與社區(qū)負責人聯(lián)系，反饋本次活動效果，總結(jié)經(jīng)驗。 十
一、活動負責人及參與者：
活動負責人：**\\\\**
冬至的文案范文第4篇
【摘要】 目的 研究健脾止動湯對多發(fā)性抽動癥(TS)模型鼠紋狀體多巴胺通路的影響，為健脾止動湯干預(yù)小兒TS提供神經(jīng)生化學(xué)依據(jù)。方法 90只雄性ICR小鼠隨機分成6組，即空白組、模型組、泰必利組、健脾止動湯組、六君子湯組、瀉青湯組。除空白組外，其余5組小鼠腹腔注射亞氨基二丙腈建立TS小鼠模型。除空白組和模型組給予生理鹽水外，其余4組分別灌胃給予相應(yīng)藥物。4周后采用高效液相色譜電化學(xué)法測定TS模型鼠腦紋狀體單胺類遞質(zhì)的含量。結(jié)果 TS模型鼠表現(xiàn)出抽動癥特征性的運動行為和刻板行為。小鼠腦紋狀體單胺類遞質(zhì)含量，模型組較空白組腦多巴胺(DA)、二羥苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、5-羥色胺(5-HT)、去甲腎上腺素(NE)含量無明顯變化(P＞0.05)；瀉青湯組較模型組DA、DOPAC含量降低(P＜0.05)，瀉青湯組較泰必利組腦DA、5-羥吲哚乙酸(5-HIAA)、NE含量降低(P＜0.01或P＜0.05)，瀉青湯組較六君子湯組腦DA、5-HIAA、NE含量降低(P＜0.01或P＜0.05)。結(jié)論 健脾止動湯的主要作用組分為瀉青湯，其抗抽動作用可能與興奮腦紋狀體多巴胺間接通路、降低DA含量有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】 多發(fā)性抽動癥；紋狀體；多巴胺通路；健脾止動湯；小鼠
Abstract：Objective To study the effects of Jianpizhidong decoction on dopamine pathway in TS model mice striatum， and provide neural biochemical proof for Jianpizhidong decoction in treating children Tourette syndrome (TS). Methods 90 male ICR mice were randomly pided into 6 groups， namely blank control group， model group， Tiapride group， Jianpizhidong decoction group， Liujunzi group， Xieqing group. Except blank control group， other 5 groups mice were made to TS models by intraperitoneal injection of 3， 3’-Iminodipropionitrile (IDPN). With the exception of blank and model groups， other 4 groups were given corresponding drugs by intragastric administration respectively. 4 weeks later， the levels of monoamine neurotransmitter in brain striatum of TS model mice were detected by high performance liquid chromatography and electrochemical detection. Results TS model mice appeared characteristic locomotion behavior and stereotypy behavior. The levels of monoamine neurotransmitters with the exception of 5-HIAA had no difference in striatum of mice between TS model group and blank control group (P＞0.05). Compared with model group， levels of DA and DOPAC in striatum reduced in Xieqing group (P＜0.05). Compared with Tiapride group， levels of DA， 5-HIAA， NE in striatum reduced in Xieqing group (P＜0.01， P＜0.01， P＜0.05). Compared with Liujunzi group， levels of DA， 5-HIAA， NE in striatum reduced in xieqing group (P＜0.01， P＜0.01， P＜0.05). Conclusions The mainly component of Jianpizhidong decoction is Xieqing decoction， the function of improving symptoms of TS maybe relate to activate indirect dopamine pathway and decrease levels of DA in TS model mice striatum.
Key words：TS model mice；striatum；dopamine pathway；Jianpizhidong decoction；mice
小兒多發(fā)性抽動癥(Tourette syndrome，TS)是一種慢性神經(jīng)精神障礙性疾病，以運動性抽動和發(fā)聲性抽動為主要表現(xiàn)，病因和發(fā)病機制尚未闡明，目前多數(shù)學(xué)者認為可能與多巴胺(DA)、5羥色胺(5-HT)、去甲腎上腺素(NE)等單胺類遞質(zhì)異常有關(guān)[1-2]。目前臨床上治療TS主要以藥物和心理干預(yù)為主，其中西藥治療以多巴胺受體阻滯劑(氟哌啶醇、泰必利等)為首選，但由于不良反應(yīng)大、療程長、停藥后易復(fù)發(fā)，患兒依從性較差。北京中醫(yī)藥大學(xué)東方醫(yī)院兒科王素梅主任醫(yī)師在多年臨床經(jīng)驗基礎(chǔ)上，以健脾疏肝、化痰熄風立法，創(chuàng)制健脾止動湯，治療小兒脾虛肝亢夾痰型TS，取得較好療效，且復(fù)發(fā)少，無明顯不良反應(yīng)[3]。本研究擬通過建立TS小鼠模型，以泰必利做為陽性對照藥，以健脾止動湯的拆方六君子湯、瀉青湯作為對照中藥，測定TS模型鼠腦紋狀體單胺類遞質(zhì)的含量，探討健脾止動湯對TS模型鼠紋狀體多巴胺通路的影響，揭示健脾止動湯治療TS的可能神經(jīng)生化學(xué)機制，為其在臨床進一步推廣應(yīng)用提供理論依據(jù)。
1 實驗材料
1.1 動物
雄性健康ICR小鼠，體重(18±2)g，清潔級，購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司，許可證號：SCXK(京)2007-0001。分籠喂養(yǎng)，自由采食，溫度(23±3)℃，通風，日光燈照明(8 am～5 pm)。
1.2 藥物、試劑與儀器
鹽酸泰必利片(泰必利片，江蘇恩華)，中藥配方顆粒(江陰天江)，標準品DA、NE、高香草酸(HVA)、5-HT、5-羥吲哚乙酸(5-HIAA)、二羥苯乙酸(DOPAC)及DHBA(內(nèi)標物)均購自Sigma，乙二胺四乙酸二鈉(EDTA·Na2)、高氯酸、偏重亞硫酸鈉、檸檬酸、檸檬酸三鈉均為國產(chǎn)分析純，1-庚烷磺酸鈉(HPLC Grade)，甲醇(高效液相色譜淋洗液)，超純水，液氮。美國ESA 5600A高效液相色譜8通道庫侖陣列電化學(xué)分析系統(tǒng)，SIGMA 3K15臺式低溫高速冷凍離心機，過濾膜(孔徑0.22 μm)，玻璃勻漿器。
2 實驗方法
2.1 分組及造模
ICR雄性小鼠90只，隨機分成6組，分別為空白組、模型組、泰必利組、健脾止動湯組、六君子湯組、瀉青湯組，每組15只。分籠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后開始造模。參照神經(jīng)毒素全身用藥法[1]，除空白組外，其余5組小鼠在灌胃給藥后立即進行腹腔注射IDPN，為獲得更明顯的TS模型鼠的特征性行為改變(運動行為和刻板行為[1])，劑量由原文獻報道的150 mg/(kg·d)增至300 mg/(kg·d)，空白組腹腔注射等體積的生理鹽水，每日1次，連續(xù)7 d。造模7 d后模型鼠均出現(xiàn)不同程度的運動行為(探究活動[4-5]增加)和刻板行為(頭部抽動、旋轉(zhuǎn))[1]，且該行為表現(xiàn)不需特殊處理可一直持續(xù)2個月。
2.2 給藥
造模當天同時進行灌胃給藥，以相當于兒童臨床用藥的5倍劑量[20 mL/(kg·d)]，空白組和模型組給予生理鹽水，其余4組分別給予泰必利(按25 mg/kg配成混懸液)、健脾止動湯(太子參、炒白術(shù)、茯苓、羌活、防風、龍膽草等，1 mL含1 g原藥材)、六君子湯(太子參、炒白術(shù)、茯苓、法半夏、陳皮，1 mL含0.35 g原藥材)、瀉青湯(羌活、防風、梔子、龍膽草、川芎、當歸、酒大黃，1 mL含0.45 g原藥材)，每日1次，連續(xù)4周。
2.3 指標測定
2.3.1 色譜條件
參照文獻[4]方法，美國ESA 5600A高效液相色譜8通道庫侖陣列電化學(xué)分析系統(tǒng)，色譜柱：ESA HR-80 (4.6 mm×8 cm)，流動相：71 mmol/L一水檸檬酸、75.8 mmol/L檸檬酸三鈉、0.13 mmol/L乙二胺四乙酸二鈉、0.42 mmol/L 1-庚烷磺酸鈉、6%甲醇，0.22 μm濾膜過濾，超聲脫氣10 min。柱溫30 ℃，流速0.6 mL/min，電勢設(shè)置-50、100、300、500 mV，進樣量20 μL。
2.3.2 紋狀體單胺類遞質(zhì)檢測
灌胃4周，末次給藥24 h后，斷頭取腦，冰盒上快速剝離小鼠腦紋狀體，電子天平稱重，鋁箔包好，按組分裝入紗布袋，置液氮罐待測。
將腦紋狀體放到玻璃勻漿器中，每50 mg紋狀體加入預(yù)冷的500 μL腦組織遞質(zhì)工作液[4](EDTA-Na2 200 mg，偏重亞硫酸鈉200 mg，含0.1 mg/mL DHBA的內(nèi)標液100 μL，加0.2 mol/L高氯酸溶液定容至500 mL)，冰上快速勻漿，吸取勻漿液，4 ℃、 14 000 g 離心15 min，取上清進樣檢測DA、5-HT、NE、DOPAC、HVA、5-HIAA含量。
3 統(tǒng)計學(xué)方法
定量資料用x±s表示，采用SPSS15.0軟件包，對正態(tài)分布數(shù)據(jù)，采用單因素方差分析，方差齊，采用LSD檢驗(P＜0.05)，方差不齊，采用Games-Howell檢驗(P＜0.05)。對偏態(tài)分布數(shù)據(jù)，采用非參數(shù)檢驗。
4 結(jié)果
(見表1)表1 藥物對TS小鼠腦紋狀體單胺類遞質(zhì)含量的影響(略)注：與模型組比較，P＜0.05，P＜0.01；與泰必利組比較，P＜0.05，P＜0.01；與六君子湯組比較，P＜0.05，P＜0.01； 與健脾止動湯組比較，P＜0.05
5 討論
TS發(fā)病可能與遺傳因素、神經(jīng)生理、生化代謝(如神經(jīng)遞質(zhì)失衡)、心理因素、環(huán)境因素等相互作用有關(guān)[6]。多數(shù)學(xué)者認為主要與DA、5-HT、NE等單胺類遞質(zhì)異常有關(guān)。可能病機為TS患兒DA突觸后受體超敏感，負反饋調(diào)節(jié)機制啟動，代償以突觸前DA釋放減少以維持DA能系統(tǒng)平衡，當DA失代償時，5-HT和NE能系統(tǒng)參與調(diào)節(jié)平衡，此時患兒不發(fā)病或抽動癥狀輕微，若5-HT和NE能系統(tǒng)失代償，患兒則出現(xiàn)明顯的抽動癥狀[2]。
DA由其前體酪氨酸經(jīng)過一系列酶促反應(yīng)在腦DA能神經(jīng)元中合成，釋放到神經(jīng)突觸間隙，與DA受體結(jié)合，發(fā)揮調(diào)節(jié)軀體運動和精神活動等生理作用[1，7]，HVA、DOPAC是DA的主要代謝產(chǎn)物[1]。DA能神經(jīng)元主要位于黑質(zhì)紋狀體多巴胺通路，該神經(jīng)環(huán)路有二：直接通路和間接通路，作用相反[8]。直接通路中黑質(zhì)致密部合成DA，與D1受體(多巴胺受體亞型)結(jié)合，Gs(興奮性G蛋白)介導(dǎo)，激活A(yù)C(腺苷酸環(huán)化酶)，興奮運動；間接通路中黑質(zhì)合成的DA與D2受體結(jié)合，Gi(抑制性G蛋白)介導(dǎo)，抑制AC，抑制運動[7-8]。分布在DA神經(jīng)元胞體-樹突上的D2受體作為DA自身受體，負反饋調(diào)節(jié)DA神經(jīng)元的放電活動；分布在DA神經(jīng)元末梢的D2受體成為突觸前DA受體，導(dǎo)致DA合成的限速酶TH(酪氨酸羥化酶)磷酸化受抑制，DA合成減少[7]。
關(guān)于DA在TS模型中的變化報道不一[9-10]。實驗中模型鼠腦紋狀體中DA含量與空白組比較無明顯變化，支持TS發(fā)病是突觸后受體超敏感的功能性改變。瀉青湯組DA含量較模型組下降，提示瀉青湯可能興奮間接通路，促使內(nèi)源性DA與突觸前DA受體結(jié)合，啟動負反饋調(diào)節(jié)，減少神經(jīng)元胞體DA合成，對抗突觸后超敏感的受體。瀉青湯組DA含量較泰必利組下降，泰必利組DA含量較模型組無明顯變化，提示DA受體阻滯劑泰必利與瀉青湯可能從不同的環(huán)節(jié)干預(yù)TS，推測泰必利可能興奮間接通路中分布在DA神經(jīng)元胞體-樹突上的D2受體，抑制DA神經(jīng)元電活動，從而發(fā)揮抗抽動作用。上述關(guān)于藥物與DA受體相互作用的推論，需在下一步的實驗中，通過放射配體結(jié)合、自顯影技術(shù)進一步證實。模型組與空白組比較，DA的代謝產(chǎn)物之一HVA在紋狀體中的含量無明顯變化。DA代謝產(chǎn)物DOPAC在瀉青湯組下降，與瀉青湯組DA的變化一致，與文獻報道的模型鼠腦紋狀體中遞質(zhì)變化趨勢一致[9，11]。瀉青湯組DA含量較六君子湯組下降，較健脾止動湯組變化不明顯，提示瀉青湯為健脾止動湯的主要作用組分。健脾止動湯加入六君子湯組分，一為復(fù)方中苦寒藥物容易損傷小兒嬌嫩的脾胃，用六君子湯補益中焦，體現(xiàn)顧護小兒脾胃的思想；二為扶土抑木法的體現(xiàn)；三為根據(jù)“見肝之病，知肝傳脾，當先實脾”理論，既病防變。
5-HT主要存在于消化道細胞，中樞神經(jīng)系統(tǒng)含量少，5-HT由前體色氨酸經(jīng)過酶促反應(yīng)在5-HT能神經(jīng)元合成[7]，5-HIAA是5-HT的主要代謝產(chǎn)物[1]。5-HT受體分7類10亞型，其中5-HT1B、5-HT4受體分布在基底神經(jīng)節(jié)等與DA功能相關(guān)的腦區(qū)，作為自身受體或異種受體，調(diào)節(jié)中樞5-HT、DA、Ach(乙酰膽堿)等神經(jīng)遞質(zhì)的釋放[7]。實驗中六君子湯組5-HIAA含量較瀉青湯組升高，5-HT含量較瀉青湯組有升高趨勢，推測可能為健脾止動湯、六君子湯興奮5-HT1B受體和5-HT4受體，促進DA、Ach釋放，以平衡瀉青湯降低DA合成所可能導(dǎo)致的影響。因此，健脾止動湯不是瀉青湯和六君子湯的簡單相加，不能由瀉青湯或六君子湯直接代替。
NE的前體是DA，主要存在于藍斑的NE能神經(jīng)元，可能與情緒反應(yīng)有關(guān)[8]。實驗中瀉青湯組NE含量較泰必利組、六君子湯組降低，可能與其前體DA減少有關(guān)。
因此，健脾止動湯的主要作用組分為拆方瀉青湯，其抗抽動作用可能與興奮腦紋狀體DA間接通路、降低DA含量有關(guān)。
參考文獻
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冬至的文案范文第5篇
關(guān)鍵詞：暗紋東方鲀（Takifugu obscurus）；維氏氣單胞菌（Aeromonas veronii）；致病性；分離；鑒定
中圖分類號：S941.42 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）03-0629-04
2010年10月，江蘇某特種水產(chǎn)養(yǎng)殖場養(yǎng)殖的暗紋東方鲀（Takifugu obscurus）發(fā)生死亡。病魚主要表現(xiàn)為腹部極度膨大，紅腫，體表及胸鰭、腹鰭和臀鰭殘缺，鰭條基部充血、出血。解剖發(fā)現(xiàn)腹腔內(nèi)有大量淡黃色帶血的腹水流出；肝臟腫大，呈土黃色，有大小不一的出血斑塊；膽囊膨大；腸道無食，充滿泡沫狀黏液，腸黏膜出血。取癥狀典型的瀕死暗紋東方鲀心臟、肝臟病灶進行細菌分離培養(yǎng)，獲得一株優(yōu)勢菌株。本研究通過對分離菌進行形態(tài)觀察、生理生化試驗、16 S rDNA序列分析，初步鑒定該菌為維氏氣單胞菌（Aeromonas veronii），命名為NT-HV，同時對其毒力及藥物敏感性進行試驗，旨在分析該菌的分類地位、致病因素、篩選敏感藥物，為有效防治暗紋東方鲀維氏氣單胞菌病提供依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 病料
病料取自江蘇某特種水產(chǎn)養(yǎng)殖場，瀕死暗紋東方鲀體表出血，鰭條缺失、出血，紅腫、突出。解剖后發(fā)現(xiàn)，腹腔極度積水，肝臟腫大、出血。
1.2 實驗動物
清潔級6周齡成年雄性ICR小鼠，體重（25±2） g，由南通大學(xué)實驗動物中心提供。暗紋東方鲀購自水產(chǎn)市場，每尾重80～100 g，試驗前在持續(xù)流水的水泥池（500 L）中馴養(yǎng)2周，證實健康無病后用于試驗。試驗期間水溫控制在25 ℃左右，投喂暗紋東方鲀專用配合飼料。
1.3 試劑
Taq DNA酶和DNA Marker（DL 2000）購自TaKaRa公司；細菌微量生化鑒定管、藥敏試紙購于杭州天和微生物試劑有限公司，小量細菌基因組DNA抽提試劑盒購自生工生物工程（上海）股份有限公司（批號SK8255），其他試劑均為分析純。
1.4 病原分離
選擇具有典型癥狀、瀕死的暗紋東方鲀，無菌操作取其心臟、肝臟，大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（Tryptose soya agar，TSA）平板劃線分離細菌，30 ℃培養(yǎng)24 h，選取優(yōu)勢菌在TSA平板上純培養(yǎng)，挑取單個菌落進行革蘭氏染色，光學(xué)顯微鏡下觀察。將分離菌株用斜面保存。
1.5 生化試驗
取斜面保藏菌株進行動力試驗及微量生化管試驗。動力試驗用半固體營養(yǎng)瓊脂穿刺培養(yǎng)。微量生化管試驗按產(chǎn)品使用說明操作。
1.6 溶血活性檢測
將分離菌接種至血液瓊脂（含7%家兔脫纖血的營養(yǎng)瓊脂）培養(yǎng)基，30 ℃培養(yǎng)24 h，觀察菌落周圍是否出現(xiàn)溶血圈。
1.7 毒力試驗
將分離菌接種至胰酪胨大豆肉湯（TSB）培養(yǎng)基，30 ℃ 靜置培養(yǎng)36 h，5 000 r/min離心10 min，收集菌體，0.15 mol/L NaCl稀釋菌體，用活菌計數(shù)法[1]測定菌液濃度，并將菌液稀釋為1.8×108、0.9×108、1.8 ×107、0.9×107、1.8 ×106、0.9×106、1.8 ×105、0.9×105 CFU/mL共8個濃度梯度，每個濃度接種6只ICR小鼠（腹腔注射，0.2 mL/只）和10尾健康暗紋東方鲀（鰭背注射，0.2 mL/只），對照組注射等量的無菌生理鹽水。連續(xù)觀察7 d并記錄小鼠和暗紋東方鲀的死亡時間和數(shù)量。按Reed-Muench法計算分離菌的半數(shù)致死量（LD50）。
1.8 16 S rDNA基因序列測定與系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析
1）PCR模板DNA的制備。將分離菌株接種于TSB培養(yǎng)基，30 ℃ 培養(yǎng)16 h，小量細菌基因組DNA抽提試劑盒提取菌體DNA作為PCR模板。
2）16 S rDNA基因序列的PCR擴增與測序。設(shè)計16 S rDNA基因的2條通用引物：27F（正向引物）：5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′；1492R（反向引物）：5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′，引物由上海英俊生物技術(shù)有限公司合成，-20 ℃保存?zhèn)溆谩?0 μL反應(yīng)體系：無菌超純水36 μL，10×PCR Buffer 5 μL，1.5 mmol/L MgCl2 4 μL，4×dNTPs 1.0 μL，引物各0.5 μL ，2.5 U/μL 的Taq DNA聚合酶1.0 μL，模板DNA 1 μL。PCR反應(yīng)條件為：95 ℃預(yù)變性3 min；94 ℃變性1 min，55 ℃復(fù)性1 min，72 ℃延伸2 min，30個循環(huán)；72 ℃溫育6 min。PCR擴增產(chǎn)物由生工生物工程（上海）股份有限公司進行基因序列測定。
3）16 S rDNA基因序列同源性分析及系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建。通過NCBI的BLAST檢索系統(tǒng)（http：//ncbi.nlm.nih.gov/Blast/）對供試菌株的16 S rDNA基因序列進行同源性分析后，從結(jié)果中獲取相似的23種氣單胞菌菌株16 S rDNA基因序列，并利用Mega 4軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹。
1.9 藥敏試驗
根據(jù)第一批正式轉(zhuǎn)為國家標準的漁藥目錄[2]，選取復(fù)方新諾明、新霉素、氟苯尼考、氧哌嗪青霉素、四環(huán)素、強力霉素、羧芐青霉素、氨芐青霉素藥敏試紙，按試紙說明進行試驗，并用保藏的Escherichia coil BL21作為對照菌，30 ℃培養(yǎng)16 h觀察結(jié)果。
2 結(jié)果與分析
2.1 分離菌的形態(tài)及培養(yǎng)特性
光學(xué)顯微鏡下觀察，分離菌為革蘭氏染色陰性、散在、兩端鈍圓、無芽孢的小桿菌。經(jīng)30 ℃培養(yǎng)24 h，菌落在TSA平板上為不透明、表面光滑、略凸、直徑3～4 mm、邊緣整齊的乳白色菌落；在血液瓊脂培養(yǎng)基上（含7%家免脫纖血的營養(yǎng)瓊脂）培養(yǎng)24 h呈β-溶血。
2.2 分離菌的生理生化特性
取斜面保藏菌株進行動力試驗及微量生化管試驗，結(jié)果顯示該菌具有動力性，不發(fā)酵木糖、鼠李糖、山梨醇等，不產(chǎn)硫化氫，尿素試驗陰性，半乳糖和枸櫞酸鹽試驗陽性，其他生化特性見表1。通過細菌生化試驗，初步確認該菌為維氏氣單胞菌，命名為NT-HV。
2.3 毒力試驗結(jié)果
用不同濃度的分離菌NT-HV菌液分別接種ICR小鼠和健康暗紋東方鲀，小鼠每組6只，暗紋東方鲀每組10尾，接種后觀察并記錄每組的死亡情況，結(jié)果如表2所示。分離菌NT-HV對小鼠和暗紋東方鲀均具毒力。按Reed-Muench法計算該菌對小鼠和暗紋東方鲀的LD50分別為2.26×106 CFU/mL、5.96×104 CFU/mL。小鼠人工感染后主要臨床癥狀為精神萎靡，食欲不振，腳趾、鼻尖出血；解剖癥狀為腹膜充血，肝臟壞死，腸道臌氣，脾腫大。暗紋東方鲀?nèi)斯じ腥竞笾饕R床癥狀為紅腫，體表及胸鰭、腹鰭和臀鰭基部充血、出血；解剖發(fā)現(xiàn)其肝臟腫大，有大小不一的出血斑塊，腸黏膜出血。
2.4 16 S rDNA基因的測定及分析
以菌株NT-HV的基因組DNA為模板，PCR擴增16 S rDNA 片段，測序結(jié)果顯示克隆片段長1 444 bp。將其基因序列用BLAST進行同源性比較，依據(jù)同源性檢索結(jié)果，選取不同氣單胞菌種屬的代表株構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，其與維氏氣單胞菌16 S rDNA基因序列相似性為99%（圖3）。因而，從分子水平上進一步證實分離菌株NT-HV為維氏氣單胞菌。
2.5 藥敏試驗結(jié)果
藥敏試驗結(jié)果顯示氟苯尼考、復(fù)方新諾明、新霉素、氧哌嗪青霉素為該菌的敏感藥物，四環(huán)素、強力霉素、羧芐青霉素、氨芐青霉素對該菌無作用，對照菌E. coil BL21對上述藥物均有敏感性。
3 討論
維氏氣單胞菌又稱凡隆氣單胞菌、維羅納氣單胞菌，1983年美國疾病預(yù)防與控制中心為紀念法國微生物學(xué)家Veron在弧菌和氣單胞菌研究中的貢獻而命名。該菌普遍存在于淡水、污水、土壤乃至海水中，其中一部分菌株在微生態(tài)環(huán)境中正常存在，而另一些菌株具有致病性，主要感染變溫動物，如中華絨螯蟹、框鏡鯉、中國大鯢、錦鯉、西伯利亞鱘等[3-7]，可引起大量死亡；維氏氣單胞菌對恒溫動物是一種條件致病菌，但有人認為免疫功能健全者也可被感染[8]，通?；颊甙l(fā)生急性腹瀉，也可能引起菌血癥、腦膜炎和心內(nèi)膜炎等[9，10]。近年來，日益增多的病例表明維氏氣單胞菌已成為一種重要的人-魚共患致病菌，在食品安全上有重要的研究意義，部分國家已經(jīng)將其規(guī)定為食品安全的檢疫對象。
暗紋東方鲀俗稱河豚，是具有極高經(jīng)濟價值的特種水產(chǎn)養(yǎng)殖對象，隨著暗紋東方鲀?nèi)斯し敝场I養(yǎng)及無毒人工養(yǎng)殖等綜合養(yǎng)殖技術(shù)的不斷完善，暗紋東方鲀高密度、集約化養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴大，病害已成為制約該行業(yè)發(fā)展的主要因素之一。維氏氣單胞菌引起的暗紋東方鲀疾病在生產(chǎn)實踐中已經(jīng)出現(xiàn)并在同一養(yǎng)殖場連年發(fā)生，造成一定的經(jīng)濟損失。本研究對暗紋東方鲀病變組織進行細菌分離純化，獲得一株致病性維氏氣單胞菌，在國內(nèi)外首次報道暗紋東方鲀相關(guān)疾病，為暗紋東方鲀維氏氣單胞菌病的防控提供參考。
本研究將分離菌株NT-HV分別人工感染ICR小鼠和健康暗紋東方鲀，引起小鼠和暗紋東方鲀發(fā)生死亡，半數(shù)致死量都很小，證實分離株具有較強的致病性，這一結(jié)果和Sung等[11]報道的對蝦的半數(shù)致死量相當。通過三個養(yǎng)殖周期的記錄分析，每年10月份氣溫逐漸下降，露天養(yǎng)殖的暗紋東方鲀進入溫室，環(huán)境變化、魚體在轉(zhuǎn)運過程中的應(yīng)激反應(yīng)等因素是導(dǎo)致疾病發(fā)生的原因，在該種疾病的防治過程中應(yīng)引起重視。
抗菌藥物的使用是動物生產(chǎn)和疫病防治的重要措施，但抗菌藥物的不科學(xué)使用，致使藥物殘留、環(huán)境污染和細菌耐藥已經(jīng)成為一個世界關(guān)注的獸醫(yī)公共衛(wèi)生問題。本研究藥敏試驗選取的藥物是中國水產(chǎn)養(yǎng)殖中允許使用的常用藥物，其中四環(huán)類素藥物耐藥性的產(chǎn)生原因值得關(guān)注，通過對養(yǎng)殖現(xiàn)場的調(diào)研發(fā)現(xiàn)土霉素是該場常用藥，這可能是產(chǎn)生耐藥性的主要原因之一，同時提示在藥物的使用中應(yīng)注意藥物的濃度和合理輪換。雖然本研究選取敏感藥物有效控制了暗紋東方鲀的發(fā)病，但該菌的耐藥性正逐漸形成，應(yīng)予以高度重視。
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