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【摘要】目的優(yōu)選獨(dú)一味水煎煮提取工藝。方法采用正交試驗(yàn)法，采用出膏率和總黃酮含量為指標(biāo)，優(yōu)選工藝條件。結(jié)果獨(dú)一味水煎煮提取工藝的最佳參數(shù)為：加水煎煮3次，每次1h，第1次加水量為11倍，第2、3次加水量為8倍量。結(jié)論優(yōu)選的獨(dú)一味提取工藝能較好地保證制劑的質(zhì)量。

【關(guān)鍵詞】獨(dú)一味；總黃酮；出膏率；正交試驗(yàn)；綜合評(píng)分

【Abstract】ObjectiveTofindouttheoptimumparametersusedboilingwaterextractionfromtheHerbaLamiophlomis.MethodsUsedtheorthogonaldesignmethod,investigatedtheeffectsoftheratioofextractionandthecontentoftotalflavones.ResultsTheoptimumconditionwasobtained:addedelevenfoldsofwaterforfirsttime,andedeightfoldsofwaterforothertwicetimes,onehoursindurationforeachtime.ConclusionTheextractionprocessshowsstabilizationandfeasibility,canbeavailableforindustrialproductionatlargescale.

【Keywords】Herbalamiophlomis；Ratioofextraction；Contentoftotalflavones；Orthogonaldesign；Compositescoremethod

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獨(dú)一味為藏族習(xí)用藥材，為唇形科植物獨(dú)一味Lamiophlomisrotata（Benth．）Kudo的干燥全草，具有活血止血，祛風(fēng)止痛，干黃水的功能，用于治療跌打損傷，外傷出血，風(fēng)濕痹痛，黃水病[1]。獨(dú)一味在藏藥應(yīng)用歷史悠久，《月王藥診》、《四部醫(yī)典》、《晶珠本草》等藏醫(yī)典籍均有記載[2]。

獨(dú)一昧膠囊為《中國(guó)藥典》2000年版[3]及2005年版[4]收載品種，為獨(dú)一味經(jīng)水煎煮加工制成，在臨床用于治療婦科和神經(jīng)外科疾病所致的疼痛[5]、治療三叉神經(jīng)痛[6]等疼痛性疾病有較明顯的止痛效果，而且同時(shí)具有止血、抑菌、提高特異性和非特異性免疫、明顯提高人體痛閾等作用，尤其在治療腫瘤性疼痛時(shí)可作為第一階梯使用的輔助用藥，無(wú)明顯毒副作用及藥物成癮性[7-8]。

總黃酮是獨(dú)一味膠囊的有效部位之一，化學(xué)研究表明獨(dú)一味中黃酮類成分主要是芹菜素、木犀草素、槲皮素及其苷類[9]，《中國(guó)藥典》2000年版[3]及2005年版[4]該品種項(xiàng)下收載了水煎煮提取的制法和總黃酮的含量測(cè)定方法。獨(dú)一味片采用單因素考察法以總黃酮含量作為不同提取工藝研究的質(zhì)量檢測(cè)方法[10]，考察因素和指標(biāo)不夠全面，為提高獨(dú)一味制劑的質(zhì)量，降低生產(chǎn)成本和優(yōu)化提取工藝。

林天慕等[11]比較溶劑萃取法及大孔吸附樹脂梯度洗脫分離法兩種方法制備樣品，通過(guò)小鼠醋酸扭體法及熱板法篩選鎮(zhèn)痛有效部位，認(rèn)為獨(dú)一味鎮(zhèn)痛作用的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)與黃酮及其苷類有一定關(guān)系，本文以出膏率和總黃酮含量為考察指標(biāo)，采用正交試驗(yàn)法研究獨(dú)一味水煎煮提取工藝。

1材料與儀器

獨(dú)一味藥材由成都安多貿(mào)易有限公司提供，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)民族醫(yī)藥研究所鑒定，為唇形科植物獨(dú)一味Lamiophlomisrotata(Benth．)Kudo的干燥全草，按《中國(guó)藥典》2005年版獨(dú)一味膠囊項(xiàng)下制法規(guī)定進(jìn)行粉碎，粉碎成粗粉。

儀器：Spectrumlab22PC（上海棱光技術(shù)有限公司，編號(hào)：20010143）；BP121S電子天平（德國(guó)Sartorius公司）

試劑：乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉等試劑均為分析純

對(duì)照品：蘆?。ㄖ袊?guó)藥品生物制品檢定所提供，含量測(cè)定用，0080-9705）

2方法與結(jié)果

2．1藥材吸水率的測(cè)定取獨(dú)一味粗粉150g，加8倍量水浸泡過(guò)夜，濾過(guò)，測(cè)得吸水率為326．9%，即應(yīng)考慮增加吸水量3倍。

2．2正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)采用正交設(shè)計(jì)表（L34）安排試驗(yàn)，因素水平表見表1，各試驗(yàn)號(hào)使用獨(dú)一味粗粉均為150g，進(jìn)行回流煎煮提取，第1次提取增加吸液量3倍，用200目濾布濾過(guò)，合并濾液，作為正交試驗(yàn)中所得的提取液。

2．3總黃酮含量測(cè)定[4]對(duì)照品溶液的制備：精密稱取經(jīng)120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品適量，加70%乙醇制成濃度為0．64mg/ml的對(duì)照品溶液。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：精密量取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液1．0、1．5、2．0、2．5、3．0ml至25ml量瓶中，加水至6ml，加入5%亞硝酸鈉溶液1ml，搖勻，放置6min，加10%硝酸鋁溶液1ml，搖勻，放置6min，加氫氧化鈉試液10ml，再加水至刻度，搖勻，放置15min；以相應(yīng)的溶液為空白，照紫外-可見分光光度法（2005版藥典一部附錄VA），在500nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度（A）為縱坐標(biāo)，濃度（C）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定法：精密稱取正交試驗(yàn)中所得的提取液1ml于25ml量瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下的方法，自“加水至6ml”起依法測(cè)定吸收度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的重量，計(jì)算，即得。

2．4出膏率測(cè)定將正交試驗(yàn)中所得的提取液，減壓濃縮至500ml，精密吸取50ml，分別置干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，80℃以下減壓干燥8h，稱定重量，計(jì)算出膏率。

2．5正交試驗(yàn)結(jié)果及結(jié)果分析正交試驗(yàn)結(jié)果見表2。

出膏率評(píng)分＝（出膏率／出膏率最大值)×0．3×100；總黃酮含量評(píng)分＝（總黃酮含量/總黃酮含量最大值）×0．7×100；綜合評(píng)分＝出膏率評(píng)分＋總黃酮含量評(píng)分。

采用SPSS軟件對(duì)綜合評(píng)分結(jié)果進(jìn)行多元逐步回歸分析，得到回歸方程：

Y=42．608+14．970×C

相關(guān)系數(shù)R=0．817；顯著水平p=0．007

回歸方程有顯著性意義。

通過(guò)SPSS軟件對(duì)綜合評(píng)分結(jié)果進(jìn)行多元回歸分析，得到各因素對(duì)綜合評(píng)分影響的顯著水平順序?yàn)椋篊（P=0．010）>A（P=0．084）>D（P=0．388）>B（P=0．533）

以上結(jié)果表明對(duì)綜合評(píng)分影響最大的因素為提取次數(shù)（C），其次為加水量（A）。

綜合考慮降低生產(chǎn)成本和優(yōu)化提取工藝，結(jié)合獨(dú)一味膠囊項(xiàng)下制法規(guī)定，確定獨(dú)一味的提取工藝參數(shù)為：取獨(dú)一味，加水煎煮3次，每次1h，第1次加水量為11倍，第2、3次加水量為8倍量，合并煎液，濾過(guò)。

2．6驗(yàn)證試驗(yàn)稱取獨(dú)一味粗粉3份，每份150g，確定的提取工藝進(jìn)行工藝驗(yàn)證試驗(yàn)，結(jié)果見表3。

結(jié)果表明：驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果表明獨(dú)一味的水煎工藝基本穩(wěn)定、可行。

3討論

試驗(yàn)研究結(jié)果表明獨(dú)一味膠囊制法有一定合理性。通過(guò)試驗(yàn)研究，采用綜合評(píng)分的方法，避免單純采用出膏率或單純采用總黃酮帶來(lái)的工藝偏差，為獨(dú)一味膠囊工藝改進(jìn)及其相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)提供了試驗(yàn)研究基礎(chǔ)，能較好地保證獨(dú)一味制劑的質(zhì)量。

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