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立項申報書范文第1篇

1、檢查施工機(jī)具、設(shè)備339臺次，查出安全隱患29臺次，限期監(jiān)視整改29臺次。

2、檢查職員1245人次,查出違章行為35人次,限期監(jiān)視整改35人次。

3、檢查臨時用電安全138次，查出違章用電9次,查出用電安全隱患28次，限期監(jiān)視整改37次。

4、檢查施工現(xiàn)場文明施工治理138次，查出不符合項49項，限期監(jiān)視整改49項。

5、檢查食堂衛(wèi)生46次，查出不符合9項，限期監(jiān)視整改9項。

二、抓安全教育、抓隱患治理，抓“三違”行為

根據(jù)現(xiàn)場施工的特點查找隱患，加強事故預(yù)防，并以雨季八防、水池防腐、框架磚墻砌筑、有限空間作業(yè)、現(xiàn)場臨時用電、特種設(shè)備治理為重點開展安全檢查，有效地預(yù)防了各類安全事故的發(fā)生。

1、抓安全教育：組織了項目部員工、分包隊伍施工職員49人進(jìn)行建筑工地安全知識動畫視頻學(xué)習(xí)。

2、親身編寫了污水深度處理廠項目部責(zé)任狀、hse崗位職責(zé),對項目部員工進(jìn)行了個人責(zé)任狀、hse崗位職責(zé)、危害因素識別、應(yīng)急措施知識摸底考試。經(jīng)過兩輪考試加深了項目部全體員工對本崗位責(zé)任狀、hse崗位職責(zé)、危害因素識別、應(yīng)急措施知識的熟悉與了解。

3、狠反“三違”行為，加大了“三違”行為的查處力度。發(fā)揮各級組織和安全監(jiān)視機(jī)構(gòu)的監(jiān)視檢查作用，加大對“三違”現(xiàn)象查處的力度。狠抓隱患治理，確保各類隱患及時得到消除，防止了事故的發(fā)生。

全年共查處違章現(xiàn)象(人)12人次，開hse安全治理罰款通知單2份,處罰金額達(dá)89500元。

三、抓好安全治理迎檢工作

1、20**年度共迎接上級領(lǐng)導(dǎo)、部分、專家的各類安全工作檢查88次。

2、迎接團(tuán)體公司的“三標(biāo)”復(fù)檢驗收，并順利通過了團(tuán)體公司的“三標(biāo)”考核驗收。

四、20**年度本人主要抓的安全工作有以下幾個內(nèi)容：

1、組織全體員工積極進(jìn)行安全學(xué)習(xí)，開展危險源辨識活動

為了進(jìn)步全體員工的安全知識水平和響應(yīng)公司的開展危險源辨識活動，進(jìn)步員工的職業(yè)健康/安全意識，項目部對所有新進(jìn)工地的員工都強制性的進(jìn)行三級安全教育和培訓(xùn)。對新進(jìn)場員工進(jìn)行安全知識教育活動和講解危險源的辨別等職業(yè)健康/安全知識，進(jìn)步職工的安全和三個體系里的環(huán)境、職業(yè)健康/安全等熟悉。在講課培訓(xùn)結(jié)束以后對受培訓(xùn)的員工進(jìn)行閉卷考試。由于大家對安全意識的重視，所以，所有的員工都順利的通過了考試。這為下一步在各個部分開展危險源辨識活動打下了良好的基礎(chǔ)。根據(jù)公司的貫標(biāo)精神，我根據(jù)各個施工項目的工種特點和現(xiàn)場的實際情況，通知每個部分的每個成員都要認(rèn)真的學(xué)習(xí)和理解直至把握公司貫標(biāo)工作中與安全密切相關(guān)的危險源辨識的條款，要求每個施工職員都要充分熟悉到自身工作四周的環(huán)境因素和存在的危險源，以及如何往控制和避開危險源。這些要求不僅僅要員工能夠在施工中懂得辨識和避開危險源，而且在腦子里也要深深的牢記，做到脫口而出，有問必答。在整個工地進(jìn)行的危險源辨識活動中，經(jīng)過團(tuán)體公司和公司安監(jiān)部分對各班組的隨機(jī)抽查，我們分公司的各個成員對危險源的辨識活動把握得較為全面，不僅僅在隨意抽查中能夠有問必答，隨問隨答，而且在現(xiàn)場施工中也是同樣的做到了工完料盡場地清的“三清”工作，整個施工現(xiàn)場設(shè)備擺放整潔，干凈整潔。這些得到了團(tuán)體公司和公司安監(jiān)部分的一致好評。

2、全面開展安全文明施工，創(chuàng)一流施工現(xiàn)場

我非常重視現(xiàn)場文明施工的情況，經(jīng)常深進(jìn)到一線施工現(xiàn)場親身指導(dǎo)工作。為了相關(guān)方進(jìn)步安全文明施工的意識，和明確各班組的責(zé)任區(qū)域，我確定并劃分了各相關(guān)單位的安全文明施工責(zé)任區(qū)，明確區(qū)域并掛標(biāo)志牌，要求各相關(guān)主管領(lǐng)導(dǎo)親身負(fù)責(zé)該區(qū)域施工的安全文明工作。并不定期的對各相關(guān)單位的施工責(zé)任區(qū)進(jìn)行抽查考評，并根據(jù)考評情況進(jìn)行評分，評出優(yōu)劣相關(guān)單位后并加以獎勵和懲罰。此舉進(jìn)步了各相關(guān)單位的安全文明施工的積極性和責(zé)任心。實行獎罰制度以后，由于責(zé)任落實到個人并且同經(jīng)濟(jì)掛鉤，整個施工現(xiàn)場顯得一片整潔。各相關(guān)單位都為了爭得優(yōu)秀單位而各自努力。

3、組織員工開展了”六.五環(huán)境日”宣傳活動

為了活躍本項目部“六.五環(huán)境日”的宣傳氣氛，營造寬松的工地生活環(huán)境，在“六.五環(huán)境日”到來之際，我組織舉辦了“污染減排與環(huán)境友好型社會”大討論活動。為了松懈職工們緊繃的工作神經(jīng)，讓員工們自我接受了一次愛護(hù)環(huán)境的教育。

4、持之以恒地開展安全教育培訓(xùn)工作。

自開工以來我一直把安全教育培訓(xùn)作為一項重要工作來抓，并且常教常新，培訓(xùn)方式多，培訓(xùn)內(nèi)容全面，全員參加。建立起全員安全教育培訓(xùn)制度。通過認(rèn)真開展安全教育活動，落實安全培訓(xùn)工作，不斷增強員工的安全生產(chǎn)觀念，進(jìn)步全員安全治理素質(zhì)。并警示員工時時、事事、處處關(guān)心安全，做到不傷害自己，不傷害他人，不被他人傷害，實現(xiàn)了安全生產(chǎn)的良性循環(huán)。

20**年度，我通過不斷地組織相關(guān)方員工學(xué)習(xí)《安全生產(chǎn)法》、《安全生產(chǎn)工作規(guī)定》、《電業(yè)安全工作規(guī)程》等法規(guī)，使相關(guān)方全體員工加深了對法規(guī)的理解和把握，自覺遵守安全法規(guī)，杜盡三違，避免了分公司和個人蒙受不必要的損失和傷害。通過電視教學(xué)的手段把其他單位發(fā)生的事故案例以專題片形式進(jìn)行播放，要求談體會，談熟悉，加深對事故的熟悉，推動了公司自身安全文化的建設(shè)，樹立“除不可抗力，任何事故均可避免”的安全理念。

我還結(jié)合實際，宣講身邊發(fā)生的事故案例，讓分公司員工及相關(guān)方員工更輕易接受和把握，從而達(dá)到進(jìn)耳進(jìn)腦的目的。并開展觸電急救及心肺復(fù)蘇法培訓(xùn)，培養(yǎng)廣大員工的急救意識，在分公司員工中樹立牢固的“以人為本，關(guān)愛生命”的安全文化理念。

為貫徹“安全第一，預(yù)防為主，綜合治理”的方針，加強安全生產(chǎn)預(yù)控治理，根據(jù)團(tuán)體公司“專項安全生產(chǎn)檢查治理辦法”的文件精神,我共組織開展各類安全大檢查工作。通過開展安全大檢查，組織落實整改共計187項，包括安全治理、施工用具檢查、設(shè)備缺陷、防冷防凍等，切實解決了影響特種設(shè)備安全、文明生產(chǎn)和設(shè)備過冬的關(guān)鍵題目，有力地確保冬季特種設(shè)備的安全穩(wěn)定運行和全年各項生產(chǎn)工作任務(wù)的完成。

五、安全工作安排

在做好日常安全監(jiān)視、安全檢查例行工作同時，我重點抓好以下安全工作：

1、開展全員安全教育培訓(xùn)9次。

2、組織開展了“6.5”“11.9”日安全活動宣傳。

3、對移動式滅火器進(jìn)行了檢驗、維修。

4、組織進(jìn)行了消防火災(zāi)、人身傷亡、治安事件和專業(yè)預(yù)案等演練。

5、對相關(guān)方壓力容器進(jìn)行了了檢證、登記。

6、對相關(guān)方特種設(shè)備進(jìn)場檢驗，做好了各項相關(guān)預(yù)備。全年共檢查施工機(jī)具、設(shè)備進(jìn)場檢驗339臺次。

7、制訂完善各類安全生產(chǎn)責(zé)任制。

立項申報書范文第2篇

關(guān)鍵詞 自動氣象站；月報表；異常數(shù)據(jù)；判斷方法；審核；處理方法

中圖分類號 P415.1+2 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 B 文章編號 1007-5739（2012）21-0259-01

自動站月報表是由1個月內(nèi)觀測記錄的成千上萬組氣象要素數(shù)據(jù)積累形成的，在觀測記錄如此龐大的數(shù)據(jù)時，極易出現(xiàn)誤讀、誤記等數(shù)據(jù)失真現(xiàn)象，氣象部門多采用測報軟件處理完成地面氣象月報表的編制、預(yù)審，可及時發(fā)現(xiàn)資料數(shù)據(jù)中存在的一些問題，但同時必須借助人工預(yù)審來進(jìn)一步完善自動站月報表數(shù)據(jù)的審核和異常處理，來全面提高自動站月數(shù)據(jù)資料的完整、準(zhǔn)確[1-5]。筆者通過工作實踐經(jīng)驗，總結(jié)出南漳縣氣象局自動站月報表審核工作中發(fā)現(xiàn)的一些異常數(shù)據(jù)記錄的處理方法。

1 自動氣象站記錄數(shù)據(jù)異常的界定與判斷標(biāo)準(zhǔn)

《觀測規(guī)范》第十八章針對疑誤記錄作了概括抽象的原則規(guī)定，但在實際工作實踐中，應(yīng)依據(jù)以下幾個條件對觀測中不正常記錄是否為疑誤進(jìn)行判定：一是反常且矛盾的記錄；二是原因不明且難以解釋的記錄；三是不能、無法否定的記錄。

2 異常數(shù)據(jù)記錄的判斷審核及處理

2.1 溫、濕度數(shù)據(jù)異常

如果遇大風(fēng)暴雨天氣而導(dǎo)致溫度、濕度傳感器與電纜相連處浸水，對于可能會出現(xiàn)的整點溫、濕度數(shù)據(jù)的異?，F(xiàn)象，一般時次可不需補測；只有在定時規(guī)定編發(fā)氣象測報的2：00、8：00、14：00、20：00時次溫、濕度記錄數(shù)據(jù)出現(xiàn)缺測或異常，應(yīng)采用人工觀測儀器于整點后10　min內(nèi)進(jìn)行補測。如果由于自動站傳感器故障導(dǎo)致當(dāng)日20：00至翌日14：00整點溫、濕度觀測數(shù)據(jù)異常時，應(yīng)根據(jù)人工觀測干濕球溫度要素值作為自動站20：00至翌日2：00、8：00、14：00時溫度、濕度、露點溫度、相對濕度以及水汽壓值進(jìn)行記錄。

如果自動站溫度數(shù)據(jù)正常、而相對濕度數(shù)據(jù)缺測時，可出現(xiàn)2種數(shù)據(jù)異常情況：一是整點前后10　min內(nèi)相對濕度數(shù)據(jù)缺測，可采用人工觀測到的干濕球數(shù)據(jù)經(jīng)訂正后查算對應(yīng)的時間數(shù)據(jù)值代替B文件中該整點的相對濕度數(shù)據(jù)，并配合溫度數(shù)據(jù)反查得到該時段的水汽壓和露點溫度；二是整點前后10　min內(nèi)相對濕度數(shù)據(jù)正常，可用此分鐘相對數(shù)據(jù)代替B文件中整點相對濕度，其露點溫度和水汽壓數(shù)據(jù)可通過配合整點溫度數(shù)據(jù)反查獲得。

2.2 降水?dāng)?shù)據(jù)異常

自動站降雨量數(shù)據(jù)出現(xiàn)異?；蛉睖y時，其小時降雨量應(yīng)由其他雨量同時次值替代。日常應(yīng)保證人工自記雨量計虹吸式雨量計正常運轉(zhuǎn)，一旦自動站發(fā)生故障造成數(shù)據(jù)缺測，即可將虹吸式雨量計雨量數(shù)據(jù)中對應(yīng)的數(shù)據(jù)作為缺測時段的補測值。若自動站降水分鐘數(shù)據(jù)缺測，影響了年報表一些時段最大降水量的挑選，首先應(yīng)確定出現(xiàn)異常的分鐘時段，然后將對應(yīng)時間的虹吸式雨量計自記數(shù)據(jù)進(jìn)行時差訂正后代替自動站中降水記錄分鐘時段的異常數(shù)據(jù)，并在旁邊標(biāo)注轉(zhuǎn)換方法，替代后的數(shù)據(jù)基本符合實際降水情況。

2.3 氣壓數(shù)據(jù)異常

不正常數(shù)據(jù)嚴(yán)重影響到日極值的統(tǒng)計時，根據(jù)《觀測規(guī)范》中所規(guī)定，應(yīng)選取從實際自動站觀測記錄和人工補測定時觀測記錄中的日極值進(jìn)行處理；當(dāng)氣壓分鐘數(shù)據(jù)中某一整點數(shù)據(jù)觀測異常時，通常依照規(guī)定應(yīng)以整點前后10　min內(nèi)觀測數(shù)據(jù)為準(zhǔn)，若是整點前后10　min內(nèi)數(shù)據(jù)也為異常時，可求得前后時次數(shù)據(jù)內(nèi)插作為氣壓分鐘數(shù)據(jù)值。氣壓分鐘數(shù)據(jù)出現(xiàn)野值時候可按缺測處理。

3 自動站月報表審核

3.1 Z文件、A文件的完整性

在月報表審核中，如果發(fā)現(xiàn)分鐘數(shù)據(jù)正常，但因自動站采集器異常而造成Z文件中某一時次的數(shù)據(jù)記錄缺測致使整點A文件數(shù)據(jù)資料缺測時，要作如下處理：預(yù)審員要嚴(yán)格進(jìn)行數(shù)據(jù)檢查，每5　d檢查1次，只要發(fā)現(xiàn)不完整數(shù)據(jù)及時進(jìn)行人工卸載，然后通過AWS逐分鐘地面數(shù)據(jù)文件進(jìn)行查找，從而獲得包含草溫數(shù)據(jù)在內(nèi)的更原始、完整的自動站分鐘數(shù)據(jù)資料；為獲得完整的采集記錄數(shù)據(jù)，必須確保自動站采集器正常運行和上傳，因此要做好自動站儀器監(jiān)測工作，應(yīng)盡早發(fā)現(xiàn)采集器故障并及時進(jìn)行處理維護(hù)，點擊自動站專用微機(jī)桌面任務(wù)欄右下角風(fēng)標(biāo)樣圖標(biāo)，然后進(jìn)入軟件系統(tǒng)即可直接查看某一日溫度、濕度、降水、氣壓等氣象要素數(shù)據(jù)曲線圖，如果查看出曲線圖存在異常，應(yīng)及時觀察采集器運轉(zhuǎn)是否出現(xiàn)了異常狀況。

3.2 分鐘J文件的預(yù)審

進(jìn)行分鐘J文件的預(yù)審時，有時會發(fā)生記錄數(shù)據(jù)的跳躍突變，由于氣壓、降水、溫度、濕度、風(fēng)等要素之間相互關(guān)聯(lián)，通常應(yīng)先考慮是否因天氣因素影響導(dǎo)致了這些要素曲線的異常變化，其次就是觀測儀器故障造成數(shù)據(jù)的變化。經(jīng)過對異常突變情況的分析處理后，如果確定了觀測數(shù)據(jù)為野值，或觀測儀器出現(xiàn)了故障，觀測要素分鐘數(shù)據(jù)可作缺測處理；如果是A文件中的小時降水量數(shù)據(jù)造成缺測時，應(yīng)以對應(yīng)的人工觀測數(shù)據(jù)代替，將J文件中分鐘數(shù)據(jù)作缺測處理；若是人工觀測雨量記錄也出現(xiàn)缺測，則此時段內(nèi)降水量數(shù)據(jù)均可作缺測處理。

4 結(jié)語

每個觀測員都要不斷加強業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)，提高業(yè)務(wù)技能，堅持軟件預(yù)審與人工預(yù)審相結(jié)合，通過做好報表預(yù)審工作總結(jié)、記錄和分析，不斷積累預(yù)審經(jīng)驗，掌握異常情況處理，以達(dá)到觀測數(shù)據(jù)記錄的客觀性和準(zhǔn)確性。

5 參考文獻(xiàn)

[1]　王曉，馬新建，田秀菊.自動氣象站月報表異常數(shù)據(jù)的審核與處理[J].山東氣象，2011，31（3）：72-74.

[2]　黎樹明，張家才，易秋麗，等.地面氣象月報表預(yù)審方法[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2011（11）：288，290.

[3]　邱輝，詹紅霞.自動氣象站業(yè)務(wù)運行中的幾點注意事項[J].沙漠與綠洲氣象，2009，3（S1）：93-94.

立項申報書范文第3篇

【關(guān)鍵詞】  精神??；保護(hù)性約束；護(hù)理管理；家屬；心理反應(yīng)

 精神病患者保護(hù)性約束也稱行為約束治療，其實質(zhì)是限制患者的行為自由，以保障患者和他人的安全，防止公共財物受到損壞，并保證治療護(hù)理工作的順利進(jìn)行［1］。但由于患者及其家屬對行為約束治療目的、意義不理解，導(dǎo)致相關(guān)的醫(yī)患糾紛時有發(fā)生。為了順利有效地開展精神病患者行為治療，避免或減少醫(yī)患之間矛盾沖突，作者對精神病患者受保護(hù)性約束治療時家屬的心理反應(yīng)進(jìn)行了調(diào)查，現(xiàn)報告如下。

     1 對象與方法

    1.1 對象  選取2007年6月～12月在我院住院的93例精神病患者的家屬為調(diào)查對象。其中男61例，女32例；年齡30 a～67 a,平均44.33 a；文化程度：小學(xué)18例，初中54例，高中16例，大專5例；職業(yè)：務(wù)農(nóng)44例，個體15例，工人21例，干部13例；首次住院患者71例，≥2次22例；既往有被約束史者17例。

    1.2 方法  采用自擬精神病患者受保護(hù)性約束家屬心理反應(yīng)調(diào)查表對入組患者的家屬進(jìn)行相關(guān)調(diào)查。問卷共8項內(nèi)容，統(tǒng)計其百分比進(jìn)行分析。共發(fā)放問卷93份，收回93份，回收率100%。

    2 結(jié)果

        精神病患者家屬中80.95%對約束患者持接受態(tài)度，76.19%認(rèn)為約束患者是一種治療方法，14.28%認(rèn)為約束患者是對患者的懲罰，19.05%認(rèn)為約束患者會加重患者病情，14.28%擔(dān)心約束患者時其基本生活會受到影響，28.57%擔(dān)心約束患者會受到意外傷害，47.62%認(rèn)為約束患者必須征得家屬同意，28.58%認(rèn)為約束患者必須先做好解釋工作。4.70%的家屬不發(fā)表意見。

    3 討論

        本調(diào)查顯示，多數(shù)患者家屬能接受約束患者，且承認(rèn)是一種醫(yī)療行為；極少數(shù)家屬不發(fā)表意見，可能與其無主動參與意識及存在顧慮有關(guān)；部分家屬認(rèn)為保護(hù)約束患者會加重患者病情，可能醫(yī)護(hù)人員在約束患者時動作粗暴、解釋不當(dāng)，致患者情緒進(jìn)一步激惹，大哭大鬧，暴力對抗，故家屬擔(dān)心會加重患者病情，造成嚴(yán)重后果；還有家屬認(rèn)為保護(hù)性約束患者是對患者的懲罰及人身安全可能受到意外傷害，說明家屬對醫(yī)護(hù)人員的工作缺乏信任感。提示醫(yī)護(hù)人員對精神病患者實施醫(yī)療護(hù)理及治療操作時,應(yīng)處處考慮保障患者的安全與權(quán)利。

        保護(hù)性約束治療作為一種治療手段是道德的，當(dāng)患者缺乏自控能力時，醫(yī)生為了維護(hù)患者以及他人和社會利益而限制患者的自主權(quán)，是合乎道德的［2］。作者認(rèn)為，對需采取保護(hù)性約束的精神病患者應(yīng)采取以下原則：（1）有利于患者。（2）不傷害患者。（3）有利于治療或康復(fù)。（4）掌握好保護(hù)性約束治療的適應(yīng)證：①發(fā)作期精神病患者拒絕治療，對輸液不合作者；②興奮躁動劇烈，自傷、傷人、毀物行為嚴(yán)重，采用藥物或其他治療措施一時難以控制其癥狀者；③癲癇性精神障礙一時無法控制其癥狀者；④其他特殊情況，如突然沖動者。（5）規(guī)范保護(hù)性約束治療操作：①實施保護(hù)性約束時要充分與家屬溝通，盡量做到在家屬自愿時進(jìn)行保護(hù)約束；②約束時動作切勿過于粗暴，忌壓迫患者胸腹部或頸部，以防意外傷害患者；③在實施約束時，要注意約束技巧，防止骨折、脫臼、皮膚損傷；④保護(hù)性約束后，要在被約束局部加墊保護(hù)，保證不影響被約束部位的血液運行和肢體功能；⑤對被約束患者要專人負(fù)責(zé)，重點護(hù)理，及時巡視，防止受其他患者傷害；注意口腔護(hù)理，及時更換、更換溺濕的床單，防止發(fā)生褥瘡。

【參考文獻(xiàn)】

立項申報書范文第4篇

[關(guān)鍵詞] 補腎活血顆粒；巨噬細(xì)胞極化；心臟微血管病變；去卵巢

[中圖分類號] R285.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1673-7210（2017）05（b）-0029-04

[Abstract] Objective To explore whether Bushen Huoxue Granules could cure cardiac microvascular dysfunction by regulating M1/M2 macrophage polarization in female ovariectomized mice. Methods According to random number table， 30 SPF level and 8 weeks old C57BL/6 mice were divided into sham group， model group and treatment group. Eight weeks after ovariectomy， treatment group was given Bushen Huoxue Granules （containing crude drugs 6 g/mL） by gavage， once a day， for eight weeks. Sham group and model group were given the same volume of physiological saline. HE staining， immunofluorescence staining and real-time quantitative PCR were used to detect the influences of Bushen Huoxue Granules on organization structures of heart tissue， the ultra oxygen anion， platelets endothelial cell adhesion molecules （CD31）， CD68， and the mRNA expression of interleukin （IL）-1β， tumor necrosis factor （TNF）-α， IL-10 and vascular endothelial growth factor （VEGF）. Results Compared with the sham group， the expression of IL-1β mRNA， TNF-α mRNA， ultra oxygen anion， CD68 cells in model group were increased （P < 0.05）， while the expression of CD31， IL-10 mRNA were decreased （P < 0.05）. Compared with the model group， the expression of IL-1β mRNA， TNF-α mRNA， ultra oxygen anion of heart tissue in the treatment group were decreased （P < 0.05）， while the expression of CD31 and IL-10 mRNA were increased （P < 0.05）. No significant difference was found with the expression of CD68 between the model group and treatment group （P > 0.05）. Conclusion Bushen Huoxue Granules may cure cardiac microvascular dysfunction by regulating M1/M2 macrophage polarization in ovariectomized mice.

[Key words] Bushen Huoxue Granules； Macrophage polarization； Cardiac microvascular dysfunction； Ovariectomized

研究證實，心臟微血管病變是女性絕經(jīng)后心血管疾病的危險因素[1-3]。炎性反應(yīng)始終貫穿于心臟微血管病變中[4-5]，而巨噬細(xì)胞表型M1/M2在炎性反應(yīng)中發(fā)揮重要作用[6]。前期研究證實[7-8]，補腎活血顆粒不僅能治療微血管性心絞痛，還能抑制炎性反應(yīng)，但其能否調(diào)控心臟巨噬細(xì)胞M1/M2極化影響炎性反應(yīng)，尚無報道。因此，本研究擬通過觀察巨噬細(xì)胞M1/M2極化與心臟微血管損傷的關(guān)系，探討補腎活血顆粒對心臟微血管的保護(hù)作用機(jī)制，為臨床應(yīng)用提供可靠的實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

將由第四軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心提供的30只SPF級、8周齡、體重19～21 g、雌性C57BL/6小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，12 h晝夜交替，室溫18～22℃，濕度50%～60%，食物和水自由攝取。動物合格證號SCXK（軍）-2007-007。動物使用過程符合《陜西省實驗動物管理辦法》。

1.2 實驗藥品

補腎活血顆粒（仙茅、仙靈脾、知母、黃柏、當(dāng)歸、葛根、醋香附、遠(yuǎn)志）（西京醫(yī)院中藥房提供，批號：504 251L），戊巴比妥鈉（北京普博斯生物），CD31兔抗大鼠單克隆抗體（批號：SAB5600061）、CD68兔抗小鼠多克隆抗體（批號：SAB1401062）、FITC-/Rho交聯(lián)二抗（批號：FITC1）（美國，SIGMA公司），氫化乙啡啶（DHE）-超氧陰離子熒光探針（碧云天生物技術(shù)研究所，批號：S0036），TRIzol提取液（批號：15596-018）、M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶（批號：28025-014）（美國，Invitrogen公司），SYBR green qRT-PCR檢測試劑盒（日本，TAKARA公司，批號：13417000），引物合成（上海桑尼生物科技有限公司）。

1.3 實驗儀器

光學(xué)顯微鏡（型號：CX41-12C02），倒置熒光顯微鏡（型號：IX73）（日本，Olympus公司），激光共聚焦顯微鏡（日本，Nikon公司，型號：Nikon A1 R），NIS-Viewer圖像處理軟件系統(tǒng)（日本，Nikon公司），Bio-RadCFX96型實時定量PCR儀（美國，Bio-Rad公司），臺式低溫高速離心機(jī)（德國，Eppendorf公司，型號：5424R）。

1.4 實驗分組

采用隨機(jī)數(shù)字表法將30只小鼠分為三組，分別為假手術(shù)組、模型組和治療組。參考文獻(xiàn)[9]，治療組小鼠灌服中藥顆粒劑水溶液5 mL/（kg?d）（含生藥6 g/mL），造模后第9周開始灌胃，連續(xù)8周，1次/d；假手術(shù)組和模型組小鼠灌服同體積生理鹽水，造模后第9周開始灌胃，連續(xù)8周，1次/d。

1.5 小鼠去卵巢模型制作

1%戊巴比妥鈉（30 mg/kg，腹腔注射）麻醉小鼠后，俯臥位固定，腰椎后側(cè)正中切口約1 cm，切除雙側(cè)卵巢后將輸卵管、血管等結(jié)扎，縫合皮膚并消毒[10]。治療組和假手術(shù)組操作同上，但假手術(shù)組不切除卵巢，僅切除少許卵巢周圍的脂肪組織。術(shù)后第8天開始，采用陰道涂片法[11]，觀察模型組和治療組小鼠動情周期，連續(xù)6 d，1次/d，若沒有出現(xiàn)規(guī)則的動情周期，則表明造模成功，造模失敗的小鼠棄去。

1.6 HE染色

心臟組織經(jīng)9%福爾馬林固定液過夜脫水后，石蠟包埋切片，切片組織經(jīng)過二甲苯和梯度酒精脫水脫蠟，蘇木精染色3～5 min，1%鹽酸乙醇分化30 s，1%氨水返藍(lán)10 s，1%伊紅染色1 min，酒精脫水，晾干后封片。

1.7 熒光探針標(biāo)記超氧陰離子

參考文獻(xiàn)[12]，取適量濃度為2 mmol/L的DHE覆蓋心臟組織，37℃避光孵育30 min后封片。

1.8 免疫熒光染色測定CD31和CD68的表達(dá)

取適量山羊血清將組織切片進(jìn)行封閉，滴加一抗（1∶250）4℃孵育過夜，PBS洗3次后滴加二抗（1∶200），37℃孵育1 h，PBS洗3次后封片。

1.9 實時熒光定量PCR

取新鮮心臟組織采用TRIzolR試劑盒提取總RNA，定量后使用反轉(zhuǎn)錄試劑盒將RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA，將cDNA用熒光定量檢測試劑盒（SYBR Green）在Bio-rad CFX96實時熒光定量PCR儀上進(jìn)行檢測相關(guān)mRNA的表達(dá)。反應(yīng)條件：94℃變性2 min，94℃ 20 s，60℃ 34 s，44個循環(huán)；最后加溶解曲線檢測。實時定量PCR的引物序列為：白細(xì)胞介素（IL）-1β（上游引物：5′-GCAACTGTTCCTGAACTCAACT-3′，下游引物：5′-ATCTTTTGGGGTCCGTCAACT-3′）；腫瘤壞死因子（TNF）-α（上游引物：5'-CGCGGATCCATGAGCACTGAAAGCATG-3′，下游引物：5'-CCGCTCGAGTCACA-GGGCAATGATCCCAAAG-3′）；IL-10（上游引物：5′-TTTAGGCGAGAAGCTGAAGG-3′，下游引物：5′-TCT-TCACAGGGCAGGAATCT-3′）；血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）（上游引物：5′-AGGCAGACTATTCAGCGGACTC-3′，下游引物：5′-CTCAAAACCGTTGGCACGA-3′）；β-actin（上游引物：5′-CTGTATTCCCCTCCATCGTG-3′，下游引物：5′-TACTCCTGCTTGCTGATCCA-3′）。

1.10 y計學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 23.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間的比較采用方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般狀況

與假手術(shù)組比較，去卵巢小鼠陰道脫落細(xì)胞涂片見大量白細(xì)胞和少量角化上皮細(xì)胞，無周期性陰道細(xì)胞變化。20只去卵巢小鼠中，16只小鼠心肌組織變性，炎癥細(xì)胞不同程度浸潤，4只心肌結(jié)構(gòu)較為完整，故該模型造模成功率為80%。

2.2 對心臟組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

假手術(shù)組心肌結(jié)構(gòu)完整，排列整齊，胞漿豐富；模型組心肌細(xì)胞腫脹，橫紋模糊，心肌組織出現(xiàn)變性，炎癥細(xì)胞浸潤增多，心肌間質(zhì)充血；治療組心肌組織結(jié)構(gòu)較為完整，炎癥細(xì)胞浸潤較模型組減少。見圖1A（封三）。

2.3 對心臟組織超氧陰離子的影響

c假手術(shù)組比較，模型組心臟組織超氧陰離子平均熒光強度升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）；與模型組比較，治療組超氧陰離子平均熒光強度降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。見圖1B（封三）。

2.4 對心臟組織CD31表達(dá)的影響

與假手術(shù)組比較，模型組心臟組織CD31平均熒光強度降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。與模型組比較，治療組CD31平均熒光強度升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。見圖1C（封三）。

2.5 對心臟組織CD68表達(dá)的影響

與假手術(shù)組比較，模型組心臟組織單位面積內(nèi)CD68表達(dá)數(shù)增多，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。模型組和治療組心臟組織單位面積內(nèi)CD68表達(dá)數(shù)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05）。見圖1D（封三）。

2.6 對去卵巢小鼠心臟IL-1β、TNF-α、IL-10、VEGF mRNA表達(dá)的影響

與假手術(shù)組比較，模型組心臟IL-1β、TNF-α mRNA表達(dá)水平升高（P < 0.05），IL-10、VEGF mRNA表達(dá)水平降低（P < 0.05）。與模型組比較，治療組心臟IL-1β、TNF-α mRNA表達(dá)水平降低（P < 0.05），IL-10、VEGF mRNA表達(dá)水平升高（P < 0.05）。見圖2。

3 討論

絕經(jīng)后女性心臟微血管病變發(fā)病率高，嚴(yán)重影響生活質(zhì)量，受到心血管領(lǐng)域?qū)W者廣泛重視。該病屬中醫(yī)“胸痹”“心痛”范疇，腎虛血瘀是其主要病理機(jī)制之一。前期研究證實[8-9]，補腎活血顆粒對去卵巢大鼠心肌微血管的保護(hù)作用與阻斷NF-κBp50（IκBα）-IL-1β通路有關(guān)，且該復(fù)方濃度為3 g/mL時效果最佳。而IL-1β是M1型巨噬細(xì)胞的標(biāo)志炎癥因子，故推測巨噬細(xì)胞表型與去卵巢心臟微血管損傷有關(guān)，同時為了探究補腎活血顆粒的保護(hù)作用，所以采用前期研究中效果最佳的濃度進(jìn)行實驗。

研究表明[13]，心臟微血管病變中伴有炎癥細(xì)胞浸潤，促炎因子增多，超氧陰離子自由基積聚導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞受損。炎性反應(yīng)中的巨噬細(xì)胞主要有M1和M2兩種表型，且M1可向M2極化[14]。M1促進(jìn)炎性反應(yīng)，分泌炎性因子，如IL-1β和TNF-α，增強炎性反應(yīng)，導(dǎo)致組織損傷；M2抑制炎性反應(yīng)，高表達(dá)IL-10，促進(jìn)組織修復(fù)和血管生成[15-17]。

本研究發(fā)現(xiàn)，去卵巢模型心臟組織變性，單位面積內(nèi)的炎癥細(xì)胞、CD68細(xì)胞（M1/M2型巨噬細(xì)胞的共同標(biāo)志[18]）及IL-1β、TNF-α mRNA表達(dá)水平增多，超氧陰離子升高，表明去卵巢后心臟組織巨噬細(xì)胞浸潤增多，促炎因子分泌增多，炎性反應(yīng)加重，致使心臟超氧陰離子積聚，同時發(fā)現(xiàn)VEGF和CD31表達(dá)下降，這一結(jié)果與以往研究[19]結(jié)果相同，即在炎性反應(yīng)中超氧陰離子積聚與心臟微血管受損密切相關(guān)[20]，提示小鼠去卵巢后會引起心臟微血管炎性損傷。同時，與模型組比較，治療組心臟組織結(jié)構(gòu)較為完整，單位面積內(nèi)炎癥細(xì)胞減少，VEGF和CD31表達(dá)升高，M2標(biāo)志因子IL-10表達(dá)增多，M1標(biāo)志因子IL-1β、TNF-α表達(dá)減少，且超氧陰離子降低，表明治療組心臟組織炎癥減弱，微血管損傷減輕。然而，治療組心臟單位面積內(nèi)巨噬細(xì)胞的數(shù)量沒有明顯變化。以上結(jié)果表明，補腎活血顆粒改善心臟微血管損傷，與巨噬細(xì)胞的數(shù)量無關(guān)，而是使其極性發(fā)生了轉(zhuǎn)化，即M1向M2轉(zhuǎn)化，達(dá)到抑制微血管炎性反應(yīng)和促進(jìn)心臟微血管修復(fù)的雙重作用。

總之，補腎活血顆粒治療去卵巢小鼠心臟微血管病變的機(jī)制可能與調(diào)控巨噬細(xì)胞M1/M2極化相關(guān)，即該復(fù)方干預(yù)后，M1/M2極化發(fā)生改變，炎性反應(yīng)減弱，損傷組織得到修復(fù)，最終達(dá)到治療的目的。但是，由于本研究僅涉及到動物水平，初步探討了補腎活血顆粒對巨噬細(xì)胞極化的影響，其相關(guān)分子機(jī)制研究有待進(jìn)一步探索。

本研究在第四軍醫(yī)大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室完成，特別感謝。

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立項申報書范文第5篇

【中圖分類號】R749.1+2【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1004-4949（2013）01-0010-02 我院神經(jīng)外科自2006年應(yīng)用安科ASA-630神經(jīng)導(dǎo)航系統(tǒng)開展CT、MRI影像融合與神經(jīng)導(dǎo)航相結(jié)合在顱腦手術(shù)的應(yīng)用研究，針對病變或病變結(jié)構(gòu)周圍組織在CT和MRI影像上，影像特點明顯互補的病例。至今開展31例，利用CT、MRI影像融合后進(jìn)行神經(jīng)導(dǎo)航顱腦手術(shù)?，F(xiàn)報告如下。

1　臨床資料

一般資料：本組31例，男19例，女12例，年齡17-78歲，平均43.6歲。其中海綿狀血管瘤3例，腦膜瘤8例，垂體腺瘤13例，少樹枝突膠質(zhì)瘤4例，顱咽管瘤2例，脊索瘤1例。

2　方法

2.1　安科ASA-610神經(jīng)導(dǎo)航系統(tǒng)，美國GE1.5T　MRI，美國GE64排螺旋CT。術(shù)前患者理光頭發(fā)，頭上貼上6-8個標(biāo)記點，頭顱CT2mm掃描，MRI　2mm無間隔掃描獲取影像資，考取掃描后的CT和MRI影像資料，用DICM影像轉(zhuǎn)換軟件分別，將CT、MRI原始圖像進(jìn)行格式轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)換后的CT和MRI影像分別輸入導(dǎo)航系統(tǒng)進(jìn)行圖像處理、重建、融合具備CT和MRI的影像。

2.2　手術(shù)計劃：三維重建后再進(jìn)行融合，CT　圖像資料與MR資料進(jìn)行圖像融合，融合時的參照標(biāo)志為：頭顱表面結(jié)構(gòu)、標(biāo)記物、頭顱形狀、鼻根、腦室、腦干進(jìn)行融合。

手術(shù)計劃：根據(jù)腫瘤的部位、病變特點，相鄰功能區(qū)等重要結(jié)構(gòu)選擇最佳入路點，在病變的中心或恰當(dāng)位置選擇進(jìn)入靶點，也可勾選擇顏色畫出腫瘤的輪廓，標(biāo)出關(guān)鍵組織位置，需要避開的結(jié)構(gòu)。在入顱點和目標(biāo)之間可標(biāo)出手術(shù)進(jìn)程軌跡，模擬手術(shù)進(jìn)程，確定手術(shù)方案，供實際操作時選擇。

2.3　手術(shù)步驟：病人全麻后，擺好，三釘頭架固定頭部，手術(shù)前標(biāo)記點注冊。注冊后進(jìn)入手術(shù)導(dǎo)航。

3　結(jié)果

手術(shù)療效：本組31例，腫瘤全切除28例、次全切除3例。本組病例手術(shù)過程較普通開顱手術(shù)時間縮短1-3小時，平均2小時。注冊準(zhǔn)確性：導(dǎo)航注冊誤差1.2-3.5，平均誤差2.1mm。術(shù)中腦移位：本組31例，28準(zhǔn)確定位偏差小于3mm，3例出現(xiàn)3-5mm的偏差。

4　討論

神經(jīng)導(dǎo)航系統(tǒng)自1986年應(yīng)用于臨床。［1］由于神經(jīng)導(dǎo)航系統(tǒng)具有預(yù)先計劃手術(shù)入路實時導(dǎo)航，給顱腦手術(shù)帶來極大的便利，減少手術(shù)的盲目性，導(dǎo)航系統(tǒng)能夠幫助術(shù)者作術(shù)前進(jìn)行手術(shù)計劃，選擇切除病灶的最佳入路，避開重要的功能區(qū)，用最小的創(chuàng)口到達(dá)病灶，術(shù)中實時進(jìn)行病灶定位，從而減少了腦組織的顯露，避開不必要的損傷。［2］然而傳統(tǒng)導(dǎo)航系統(tǒng)只能采用一種醫(yī)學(xué)影像圖像進(jìn)行導(dǎo)航，而顱腦各種腫瘤在CT或MRI平掃或增強或T2像有不同的表現(xiàn)，能夠把不同類型的影像融合形成具備解剖和功能以及病理信息的影像，對顱腦手術(shù)具有更大指導(dǎo)意義。依據(jù)病變和手術(shù)所需，在MRI序列影像的基礎(chǔ)上疊加融合其他所需的影像源，　可實現(xiàn)信息量的最大化和最優(yōu)化。［3］我院選擇腦膜瘤、垂體腺瘤、少樹枝突膠質(zhì)瘤、海綿狀血管瘤、顱咽管瘤、脊索瘤、作為CT和MRI影像融合與神經(jīng)導(dǎo)航相結(jié)合在顱腦手術(shù)的應(yīng)用研究。

垂體腺瘤采用CT平掃和MRI-TI增強像融合，既可以清晰顯示垂體瘤的輪廓特點，又可以顯示鞍區(qū)顱骨結(jié)構(gòu)特點、頸內(nèi)動脈隆突，使經(jīng)蝶手術(shù)準(zhǔn)確到達(dá)鞍區(qū)，避免在蝶竇內(nèi)迷路、誤傷頸內(nèi)動脈。

與顱骨靠近的腦膜瘤不同程度引起顱骨侵蝕，破壞，MRI對于顯示腫瘤效果好，顱骨卻不能顯示，所以對于顱底的腦膜瘤CT和MRI影像融合能夠最大范圍顯示病變信息。

少樹枝突膠質(zhì)瘤，存在不同程度的鈣化，單純MRI導(dǎo)航手術(shù)由于MRI無法顯示鈣化，而出現(xiàn)術(shù)后腫瘤殘留，CT和MRI影像融合能夠既顯示腫瘤范圍，也顯示鈣化位置，避免術(shù)后殘留。

海綿狀血管瘤往往反復(fù)出血在CT影像上存在不同程度的鈣化，在MRI　T2像上有含鐵血紅蛋白環(huán)，相對顯示較為清楚，我們采用CT和MRI-T2影像融合，能夠更佳顯示腫瘤范圍，顯示鈣化位置，手術(shù)準(zhǔn)確到達(dá)腫瘤位置，切除腫瘤更為徹底。

顱咽管瘤手術(shù)全切除一貫是難題，在CT影像上呈現(xiàn)雞蛋殼樣的鈣化，或者內(nèi)部有膽固醇的結(jié)晶鈣化，MRI對于顯示腫瘤效果好，鈣化部分不能顯示，所以對于CT和MRI影像融合能夠最大范圍顯示病變信息。有利于神經(jīng)導(dǎo)航下全切除腫瘤。