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表達(dá)志向的詩句范文第1篇

【摘要】 目的 研究穿心蓮內(nèi)酯對小鼠巨噬細(xì)胞氧化亞氮(NO)、腫瘤壞死因子(TNFα)和白細(xì)胞介素6(IL6)生成的影響。方法 培養(yǎng)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7，分別加入脂多糖(lipopolysaccharide，LPS，終質(zhì)量濃度1 μg/mL)和不同濃度的穿心蓮內(nèi)酯(終濃度1、10、50 μmol/L)進(jìn)行干預(yù)，并設(shè)空白組和穿心蓮內(nèi)酯單獨作用組作為對照。取培養(yǎng)24 h細(xì)胞上清，用Griess法檢測NO產(chǎn)量;用Elisa法檢測TNFα、IL6濃度。結(jié)果 與空白組比較，LPS明顯促進(jìn)了RAW264.7細(xì)胞NO、TNFα、IL6等炎癥因子的生成;穿心蓮內(nèi)酯單獨作用不影響炎癥因子的表達(dá)，但穿心蓮內(nèi)酯能顯著下調(diào)LPS誘導(dǎo)的炎癥因子表達(dá)，與LPS組差異有顯著性。結(jié)論 穿心蓮內(nèi)酯可明顯降低LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞炎癥因子表達(dá)，抑制炎癥反應(yīng)。

【關(guān)鍵詞】 穿心蓮內(nèi)酯;巨噬細(xì)胞;炎癥因子;內(nèi)毒素

)Abstract:Objective To investigate the inhibitive effects of andrographolide on lipopolysaccharideinduced inflammation factors secretion in macrophage cells.Methods A macrophage cell line RAW264.7 cells were cultured in vitro，and treated with different concentration of andrpgrapholide in the presence or absence of lipopolysaccharide (LPS). The production of inflammatory factor nitric oxide (NO)，tumor necrosis factorα(TNFα) and interleukin6 (IL6) in the supernatant was measured by Griess reagent and Elisa，respectively.Results After stimulated with LPS，the content of NO，TNFα and IL6 were markedly upregulated. Pretreated with andrographolide significantly inhibited LPSinduced inflammation factors expression levels，which was statistically significant compared with LPS group(P

Key words:andrographolide;macrophage cells; inflammation factor; lipopolysaccharide

目前，炎癥在心血管疾病、腫瘤中的促進(jìn)作用日漸受到重視，抑制炎癥反應(yīng)防治心血管疾病及腫瘤成為研究的重點[1-2]。穿心蓮為爵床科植物穿心蓮屬植物穿心蓮干燥地上部分，作為常用中藥，具有清熱解毒、涼血消腫等功效。穿心蓮內(nèi)酯是穿心蓮的主要藥效成分，有研究表明，穿心蓮內(nèi)酯有顯著的抗炎活性，能抑制二甲苯和醋酸所致的小鼠毛細(xì)血管通透性增加，還對大鼠蛋清蛋白、角叉菜膠足趾注射致炎模型有明顯的抗炎作用[3]。炎癥反應(yīng)時，巨噬細(xì)胞在細(xì)菌及其內(nèi)毒素的刺激下，分泌大量的炎癥因子，如氧化亞氮(NO)、TNFα和IL1β等，這些炎癥因子又可以進(jìn)一步活化巨噬細(xì)胞，形成惡性循環(huán)，加重炎癥反應(yīng)。本研究通過觀察穿心蓮內(nèi)酯對NO、TNFα和IL1β等炎癥因子表達(dá)的影響，探討其抗炎活性。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

穿心蓮內(nèi)酯(四川廣漢市維康植化有限公司);細(xì)菌內(nèi)毒素(LPS，E coli Serotype 055:B5，美國Sigma公司);NO檢測試劑盒(南京建成生物公司);TNFα、IL6 Elisa檢測試劑盒(美國R&D公司);胎牛血清(杭州四季青公司);DMEM培養(yǎng)基(美國Gibco公司);酶標(biāo)儀(美國BioRad公司)。

1.2 細(xì)胞培養(yǎng)及干預(yù)實驗

小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7細(xì)胞由本室保存。用完全DMEM培養(yǎng)基(含體積分?jǐn)?shù)10%胎牛血清、質(zhì)量濃度100 U/mL 青霉素和100 μg/mL鏈霉素)，體積分?jǐn)?shù)5%CO2，37 ℃條件下傳代培養(yǎng)。取生長狀態(tài)良好的RAW264.7細(xì)胞，質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.25%胰酶消化，用DMEM培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞濃度為1×106/mL，接種到24 孔培養(yǎng)板內(nèi)，待細(xì)胞生長至80%融合后，加入不同濃度的穿心蓮內(nèi)酯(終濃度分別為1、10、50 μmol/L)孵育1 h，然后加入LPS(終質(zhì)量濃度1 μg/mL)進(jìn)行刺激。實驗分組：正常對照組、穿心蓮內(nèi)酯單獨作用組、LPS組和穿心蓮內(nèi)酯加LPS組。

1.3 NO濃度測定

細(xì)胞加入刺激物后培養(yǎng)24 h，收集各處理組細(xì)胞培養(yǎng)上清液，用硝酸還原酶法檢測炎性介質(zhì)NO的濃度。操作步驟按試劑盒說明書完成。

1.4 細(xì)胞因子濃度測定

細(xì)胞加入刺激物后繼續(xù)培養(yǎng)24 h，收集各處理組細(xì)胞培養(yǎng)上清液，用TNFα和IL6 Elisa試劑盒檢測上清液中細(xì)胞因子的含量。操作步驟按試劑盒說明書完成。

1.5 統(tǒng)計分析

所有數(shù)據(jù)以±s表示，采用SPSS 11.0統(tǒng)計軟件對實驗結(jié)果進(jìn)行Student’s t檢驗，P

2 結(jié)果

2.1 穿心蓮內(nèi)酯對LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞NO生成的影響

收集24 h細(xì)胞培養(yǎng)上清，用Griess法測定細(xì)胞上清中NO 的含量。結(jié)果見表1。結(jié)果顯示，50 μmol/L穿心蓮內(nèi)酯單獨作用并不影響巨噬細(xì)胞NO的表達(dá)(與正常對照組比較，P>0.05);1 μg/mL LPS刺激可以顯著誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞RAW 264.7產(chǎn)生NO，而穿心蓮內(nèi)酯預(yù)干預(yù)能明顯抑制LPS引起的NO的釋放，并在1～50 μmol/L濃度范圍內(nèi)呈劑量依賴性。表1 穿心蓮內(nèi)酯對NO分泌的影響

2.2 穿心蓮內(nèi)酯對LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞TNFα、IL6生成的影響

結(jié)果見表2。Elisa檢測結(jié)果顯示，在正常情況下巨噬細(xì)胞RAW264.7培養(yǎng)上清中TNFα、IL6含量極低，50 μmol/L濃度的穿心蓮內(nèi)酯單獨作用對其表達(dá)也無明顯影響(與正常對照組比較，P>0.05)。當(dāng)用1 μg/mL LPS刺激后，巨噬細(xì)胞TNFα和IL6的表達(dá)均明顯增高，與正常對照組比較，P

3 討論

近年來，炎癥在多種疾病中，尤其是心血管疾病和腫瘤中的作用引起了廣泛的關(guān)注。根據(jù)在動脈粥樣硬化斑塊有多種炎性細(xì)胞和炎癥因子存在等證據(jù)，Ross明確提出了動脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)的“炎癥學(xué)說”，指出慢性炎癥反應(yīng)是AS的主要發(fā)病機(jī)制[4]。隨后的研究證實，進(jìn)入血管壁的巨噬細(xì)胞可被氧化型低密度脂蛋白、革蘭陰性菌及其LPS活化，通過NFκB、iNOS和COX等途徑產(chǎn)生TNFα、IL6、NO、PGs等多種炎癥介質(zhì)，促進(jìn)AS斑塊的形成和發(fā)展，而抑制炎癥反應(yīng)可改善AS病變程度，進(jìn)一步說明了炎癥在AS中的關(guān)鍵性作用[5]。炎癥與腫瘤的關(guān)系很早就引起了人們的關(guān)注?，F(xiàn)代研究認(rèn)為，炎癥細(xì)胞主要通過分泌IL1、IL6、TNFα、NO、PGs及活性氧等炎癥因子，參與組成腫瘤微環(huán)境，影響腫瘤的進(jìn)程。這些炎癥因子不僅能誘導(dǎo)正常細(xì)胞的惡性病變，還可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖，抑制細(xì)胞凋亡，誘導(dǎo)腫瘤血管形成，在腫瘤發(fā)生發(fā)展中有重要作用[6]。2009年，Mantovani在Nature雜志上提出，與無限制性生長、轉(zhuǎn)移等特征一樣，炎癥性微環(huán)境與腫瘤關(guān)系密切，并認(rèn)為炎癥是腫瘤的7大重要標(biāo)志之一[2]?！”? 穿心蓮內(nèi)酯對TNFα和IL6表達(dá)的影響

與正常對照組比較：**P

參考文獻(xiàn)

[1] VAN DER HEIDEN K，CUHLMANN S，LUONG LE A，et al. Role of nuclear factor kappaB in cardiovascular health and disease[J]. Clin Sci (Lond)，2010，118(10):593-605.

[2] MANTOVANI A. Cancer: Inflaming metastasis[J]. Nature，2009，457(7225):36-37.

[3] 何恩其，趙烽. 穿心蓮的藥理作用及其研究進(jìn)展[J]. 中醫(yī)藥導(dǎo)報，2007，13(50)：107-108

[4] ROSS R. Atherosclerosis is an inflammatory disease[J]. Am Heart J，1999，138(5 Pt 2):S419-S420.

[5] MAHMOUDI M，CUIZEN N，GALLAGHER P J. Atherogenesis: the role of inflammation and infection[J]. Histopathology，2007，50(5):535-546.

[6] CLEVERS H. At the crossroads of inflammation and cancer[J]. Cell，2004，118(6):671-674.

[7] LEE C H，JEON Y T，KIM S H，et al. NFkappaB as a potential molecular target for cancer therapy[J]. Biofactors，2007，29(1):19-35.

表達(dá)志向的詩句范文第2篇

關(guān)鍵詞：KLF4；基因轉(zhuǎn)染；R8w264.7細(xì)胞；C2C12細(xì)胞；細(xì)胞增殖

中圖分類號：R361　文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A　文章編號：1007－7847(2007)03－0263－05

Kruppel樣因子4(Kruppel-1ike factor4，KLF4)是Sp/Kdlppel樣鋅指轉(zhuǎn)錄因子家族的成員之一，這個家族目前已發(fā)現(xiàn)20多個成員，如Spl-4、KLPl-14等，Sp/Kruppel樣因子是機(jī)體內(nèi)一類具有重要功能的蛋白質(zhì)，它們參與調(diào)控細(xì)胞增殖、分化、胚胎發(fā)育等重要生命過程，并與腫瘤等多種疾病有關(guān)，研究表明，KLF4在胚胎發(fā)育晚期及腸管分化終末期的上皮細(xì)胞中其表達(dá)均增高，提示KLF4具有抑制某些細(xì)胞增殖的功能，為了深入探討KLF4的功能，本研究室建立了穩(wěn)定高表達(dá)該基因的Raw264.7小鼠巨噬細(xì)胞株和C2C12小鼠肌原細(xì)胞株，在此建株過程中，我們發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染KLF4對上述兩種細(xì)胞增殖的影響明顯不同。

1　材料和方法

1．1　材料

Raw264.7巨噬細(xì)胞株購自上海細(xì)胞中心；C2Cn小鼠肌原細(xì)胞由本校細(xì)胞中心提供：DMEM及RPMI-1640培養(yǎng)基購自Gibeo公司；G418購自Promega；無支原體小牛血清，杭州四季青生物工程公司產(chǎn)：丙烯酰胺、N，N′2亞甲基雙丙烯酰胺購自Fluka公司；二硫蘇糖醇(DTT)、過硫酸胺、TEMED、硝酸纖維素膜購自Promega公司；Lipo-feetamineTM 2000、真核表達(dá)載體質(zhì)粒pcDNA3.1購自Invitrogen life technologies公司：peDNA3.1-KLF4重組質(zhì)粒本室構(gòu)建；兔抗KLF4多克隆抗體購自Santa Cruz Biotechnology；辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的羊抗兔IgG及DAB顯色試劑盒購自博士德生物工程有限公司：CCK-8溶液由日本同仁化學(xué)株式會社提供。

1．2　方法

1．2．1　KLF4過表達(dá)細(xì)胞株的建立

利用脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)(根據(jù)Invitrogenlife technologies公司提供的轉(zhuǎn)染操作說明書進(jìn)行操作)將空載體pcDNA3.1和重組質(zhì)粒pcDNA3.1-KLF4導(dǎo)人Raw264.7和C2C12細(xì)胞中，根據(jù)本室以往所建立的方法篩選過表達(dá)細(xì)胞株。

1．2．2　免疫印跡分析

按《分子克隆實驗指南》所載方法進(jìn)行，用1×SDS加樣緩沖液裂解細(xì)胞，收集細(xì)胞蛋白質(zhì)，采用Bradford法進(jìn)行蛋白定量。制備好的蛋白樣品置，80℃冰箱保存?zhèn)溆?，每泳道上?0μg蛋白，經(jīng)10％SDS-PAGE(70V，120V分別電泳2h和4h左右)電泳后，電轉(zhuǎn)膜至硝酸纖維膜，室溫封閉后加入兔抗KLF4多克隆抗體，室溫孵育2h，加入HRP標(biāo)記的羊抗兔IgG孵育1h，DAB顯色，拍攝照片，記錄試驗結(jié)果。

1．2．3　細(xì)胞形態(tài)觀察

取各轉(zhuǎn)染細(xì)胞于倒置顯微鏡下，觀察其生長速度和形態(tài)改變，并逐日記錄。

1．2．4　CCK-8法檢測細(xì)胞的增殖

取生長狀態(tài)良好的對數(shù)生長期各組細(xì)胞接種于96孔板(每孔1×104個細(xì)胞)，每組接種5個復(fù)孔，在含10％新生小牛血清的條件下分別培養(yǎng)24h，48h及72h后加入CCK-8溶液10μL繼續(xù)培養(yǎng)4h，將96孔板放人酶標(biāo)儀，在450nm波長處測定各孔OD值。

1．2．5　流式細(xì)胞術(shù)檢測

本實驗由北京鼎國生物技術(shù)公司協(xié)助完成，分別接種等量的對數(shù)生長期的各組細(xì)胞于100mL培養(yǎng)瓶中，每組5瓶，培養(yǎng)24h后，參考該公司流式細(xì)胞檢測說明收集細(xì)胞，送北京鼎國生物技術(shù)有限公司進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)分析。

1．2．6　統(tǒng)計學(xué)處理

數(shù)據(jù)以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，兩組間比較用t檢驗分析，以P＜0.05判斷為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2．1　Western blotting篩選高表達(dá)KLF4的細(xì)胞克隆

采用脂質(zhì)體分別轉(zhuǎn)染KLF4的真核表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3.1-KLF4和空載體pcDNA3.1至Raw264.7和C2C12，細(xì)胞中，經(jīng)G418篩選后，利用KLF4多克隆抗體進(jìn)行Western印跡分析，鑒定高表達(dá)克隆，結(jié)果顯示，篩選到高表達(dá)克隆，在兩種細(xì)胞株中KLF4蛋白表達(dá)量較轉(zhuǎn)空載體組明顯增加(圖1)。

2．2　細(xì)胞生長情況

2．2．1　KLF4過表達(dá)對細(xì)胞形態(tài)的影響

KLF4過表達(dá)的Raw264.7細(xì)胞形態(tài)無明顯變化，C2C12空載體組貼壁細(xì)胞主要呈長梭形，極向或交叉排列，部分KLF4基因過表達(dá)的細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變，如細(xì)胞向多角形轉(zhuǎn)變，細(xì)胞形狀多樣等(見圖2)。

2．2．2　CCK-8法結(jié)果

Raw264.7的空載體組和KLF4組之間細(xì)胞增殖能力無明顯變化(p＞0.05)(表1)，C2C12的KLF4組與其空載體組相比較，細(xì)胞增殖能力降低(p＜0.05)(表2)。

2．2．3　流式細(xì)胞術(shù)分析KLF4對細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡的影響

利用流式細(xì)胞術(shù)檢測了Raw264.7-pcDNA3.1、Raw264.7-KLF4，C2C12-pcDNA3.1及C2C12-KLF4 4組細(xì)胞的周期分布及凋亡百分率，結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染空載體和KLF4過表達(dá)對Raw264.7細(xì)胞的細(xì)胞周期分布及細(xì)胞凋亡無明顯影響(P＞0.05)；與轉(zhuǎn)

空載體的C2C12相比較，KLF4過表達(dá)的C2C12細(xì)胞中處于S期的細(xì)胞減少，而G1期的細(xì)胞相應(yīng)增多(圖3)，凋亡細(xì)胞也增多(P＜0.05)(圖4)。

3　討論

KLF4是Kriippel樣鋅指轉(zhuǎn)錄因子家族的一個重要成員，小鼠KLF4蛋白全長包含483個氨基酸殘基，分子質(zhì)量為53kD，和人的KLF4蛋白具有90％的相似性，KLF4蛋白的羧基端具有3個連續(xù)的C2H，鋅指結(jié)構(gòu)，這3個鋅指的結(jié)構(gòu)均符合保守序列：CX2-4CX3FX5LX2HX3H；兩個鋅指結(jié)構(gòu)之間由一個7個氨基酸殘基的H/C連接序列連接，該連接序列為了GEKP(Y/F)X，KLF4能夠?qū)堑鞍?(keratin)、腸堿性磷酸酶(intestinalalkaline phosphatase，IAP)、鳥氨酸脫羧酶(omithine decarboxylase，ODC)、β鏈蛋白(β-catenin)、細(xì)胞周期蛋白D1(cyclin D1)和組氨酸脫羧酶(histidine decarboxylase，HDC)等多個啟動子的轉(zhuǎn)錄活性進(jìn)行調(diào)控，從而在機(jī)體的生長和發(fā)育過程中起著重要的調(diào)節(jié)作用，對KLF4的研究最初是從胃腸道開始研究的，它的表達(dá)在生長抑制的狀態(tài)下明顯增高：此后的研究發(fā)現(xiàn)，KLF4除了在腸的不同組織中表達(dá)外，還在表皮有高水平的表達(dá)并在皮膚表皮細(xì)胞分化晚期起重要作用；KLF4缺失能導(dǎo)致皮膚屏障功能障礙從而使新生小鼠在出生后短時間內(nèi)死亡，此外，最近的研究還表明，KLF4在細(xì)胞及其支持細(xì)胞的終末分化過程中出現(xiàn)高表達(dá)，這說明KLF4可能在哺乳動物發(fā)育過程中起到重要作用，但是，KLF4對Raw264.7細(xì)胞和C2C12細(xì)胞增殖的影響，目前尚未見報道。

為了闡明KLF4對Raw264.7細(xì)胞和C2C12細(xì)胞增殖的影響，本研究分別建立了KLF4過表達(dá)的Raw264.7和C2C12細(xì)胞株，并采用多種方法共同檢測了KLF4過表達(dá)對該兩種細(xì)胞增殖的影響，結(jié)果顯示，KLF4過表達(dá)對Raw264.7細(xì)胞的形態(tài)和增殖無明顯影響：而KLF4過表達(dá)的C2C12細(xì)胞株中，多角形的細(xì)胞增多，細(xì)胞周期中S期的細(xì)胞相對減少，細(xì)胞增殖速度明顯減慢，由此可見，KLF4對這兩種細(xì)胞增殖的影響具有顯著的細(xì)胞差異性。

表達(dá)志向的詩句范文第3篇

從《詩經(jīng)》到如今的現(xiàn)代詩,中國詩經(jīng)歷了幾千年的風(fēng)雨,歷久彌新。

“蒹葭蒼蒼,白露為霜,所謂伊人,在水一方”,樸素的詩句道出了樸素的感情?！俺蓑U驥以馳騁兮,來吾道夫先路也”,簡短的詩句表達(dá)了屈原對祖國的忠貞情懷。“老驥伏櫪,志在千里,烈士暮年,壯心不已”,曹操鏗鏘有力地說出了他老當(dāng)益壯的暮年志向?！安删諙|籬下,悠然見南山”,我們仿佛又看到陶淵明那份閑適與恬淡。

詩在唐朝達(dá)到了頂峰,內(nèi)容也更為多元化。

“海內(nèi)存知己,天涯若比鄰”,王勃站在岔口,告訴即將分別的朋友切勿“兒女共沾巾”?！盁o人信高潔,誰為表予心”,駱賓王身陷牢獄,只能望“蟬”興嘆?！鞍材艽菝颊垩聶?quán)貴,使我不得開心顏”,李太白一首《夢游天姥吟留別》將他不愿與權(quán)貴同流合污的志氣娓娓道來?！皣粕胶釉?城春草木深”,身處亂世的杜甫,只能空嘆國破家亡之恨。王維的“遙知兄弟登高處,遍插茱萸少一人”、李商隱的“春蠶到死絲方盡,蠟炬成灰淚始干”、杜牧的“南朝四百八十寺,多少樓臺煙雨中”……這舉不完的優(yōu)美詩句無不閃耀著中華文明的光輝。

來到宋朝,詩歌以詞的形式更加繁榮地發(fā)展。

蘇軾的“老夫聊發(fā)少年狂”開啟了豪放派的大門。李清照的“尋尋覓覓,冷冷清清”又為婉約派作出了詮釋。這兩派相映生輝,成就了宋詞的不朽地位。辛棄疾的“想當(dāng)年金戈鐵馬,氣吞萬里如虎”、柳永的“衣帶漸寬終不悔,為伊消得人憔悴”、晏殊的“昨夜西風(fēng)凋碧樹,獨上高樓,望盡天涯路”,又讓我們想起了那壯懷激烈、風(fēng)雨如晦的歲月。

接下來的元朝詩歌以“散曲”的形式著稱于世。

“枯藤老樹昏鴉,小橋流水人家,古道西風(fēng)瘦馬,夕陽西下,斷腸人在天涯”,馬致遠(yuǎn)將游子的思緒描繪得淋漓盡致。“興,百姓苦,亡,百姓苦”,張養(yǎng)浩又道出了百姓的苦難。

元朝以后,詩似乎逐漸走向沒落,但并未被人們遺忘。清朝時,龔自珍的《乙亥雜詩》更是讓我們看到了詩歌重生的希望。“我勸天公重抖數(shù),不拘一格降人材”、“落紅不是無情物,化作春泥更護(hù)花”,這些瑯瑯上口的詩句正表達(dá)著作者的心聲。

中國古典詩詞曾經(jīng)的輝煌是不可磨滅的,現(xiàn)代詩也正被更多的人推崇,我相信詩的將來會更加美好。

表達(dá)志向的詩句范文第4篇

關(guān)鍵詞：觀書有感;古詩;自主學(xué)習(xí);教學(xué)策略

語文教師應(yīng)充分認(rèn)識到古詩詞教學(xué)的重要性，但在過去的具體教學(xué)過程中，我們在操作時往往急于求成，會步入以下幾個學(xué)詩的誤區(qū)：（1）教師為了趕進(jìn)度，不考慮學(xué)生的認(rèn)知水平和接受能力，天天要求背誦一首。（2）教師沒有精心備課，指導(dǎo)時隨意提幾個問題，草草了事。（3）為了節(jié)省時間，教師一講到底，學(xué)生沒有自主學(xué)習(xí)思考的時間。（4）教師僅把詩歌大意告訴學(xué)生就算完成任務(wù)。這些方法僅僅滿足于語義的疏通和詩句的積累，學(xué)生難以從根本上體會詩歌最美的情感。我將以《觀書有感》一詩的教學(xué)為例，談一談如何在教學(xué)過程中滲透自主學(xué)習(xí)古詩的方法，讓學(xué)生能掌握學(xué)習(xí)古詩的方法，展開想象，體會詩歌蘊(yùn)藏的美感，感悟詩歌要表達(dá)的道理，做到舉一反三，提高古詩學(xué)習(xí)的興趣，做學(xué)習(xí)的主人。

《觀書有感》是六年級上冊第七單元《古詩兩首》中的一首。作為六年級的學(xué)生，已經(jīng)掌握一些自學(xué)的方法，比如認(rèn)識生字詞，用工具書查閱疑難字詞的意思。因此在學(xué)習(xí)之前，首先布置學(xué)生預(yù)習(xí)古詩，自讀古詩，把詩中生字的讀音掌握，一些不明白的字詞自己查字典弄懂，并在書上對仍然不懂的地方做一些標(biāo)注。

在教學(xué)一開始，就讓學(xué)生回顧過去學(xué)習(xí)古詩的方法，然后加以總結(jié)并板書，讓學(xué)生明白學(xué)習(xí)古詩的一般方法是先讀一讀，再把不明白的地方弄懂，然后對古詩所表達(dá)的情感、志向進(jìn)行感悟，最后拓展與本詩有聯(lián)系的詩歌，并加以背誦記憶。當(dāng)學(xué)生明白學(xué)習(xí)古詩原來是有“法”可循時，對于學(xué)習(xí)古詩也就不再有畏難情緒。在課堂上，我們就可以用這樣的方法指導(dǎo)學(xué)生學(xué)習(xí)古詩《觀書有感》。

一、讀。讀準(zhǔn)字音，讀出韻味

學(xué)生在課前已經(jīng)做了預(yù)習(xí)，這部分的學(xué)習(xí)，只要對重點字詞的讀音加以點撥，如“徘徊”“渠”這兩個詞語的讀音常常會讀錯，必須在課堂上提出來，讓學(xué)生知道正確的讀音，并且讀準(zhǔn)，才能讓學(xué)生有深刻的印象。在課堂上，教師應(yīng)當(dāng)把更多的精力放在讓學(xué)生讀出韻味這一部分，通過出示已經(jīng)畫好停頓的句子：“半畝/方塘/一/鑒開，天光/云影/共/徘徊。問渠/哪得/清/如許？為有/源頭/活水/來?！敝笇?dǎo)學(xué)生讀出節(jié)奏，讀出韻腳以及合適的聲調(diào)，如：“問渠哪得清如許？”要讀出疑問的語氣來。當(dāng)然，這里的韻味還只是淺薄地讀出了詩歌的“抑揚(yáng)頓挫”，還需要通過第三部分的學(xué)習(xí)，讓學(xué)生感受到詩中的景色，想象畫面，讀出詩中的畫面，領(lǐng)悟詩歌的道理，才能進(jìn)一步讀出韻味。

二、解。解決字詞，理解詩句

有了學(xué)生課前的預(yù)習(xí)，可以節(jié)約很多的課堂時間，在理解字詞時，教師可以教給學(xué)生一些學(xué)習(xí)方法，比如聯(lián)系生活，聯(lián)系上下文，給生字組詞等。在本詩中，“鑒”是鏡子的意思，大多數(shù)學(xué)生通過查字典理解了這個詞語，但是字典上對于“鑒”有四種解釋，這里就要告訴學(xué)生，遇到不理解的生字，不僅要查字典，還需要聯(lián)系上下文來理解。“渠”在詩中是代詞“它”，指代詩中的方塘。而在過去的教學(xué)中，發(fā)現(xiàn)學(xué)生的作業(yè)中常常有學(xué)生把渠理解成“水渠”。在這節(jié)課的教學(xué)中，先讓學(xué)生給“渠”組詞，學(xué)生會組詞“水渠”“渠道”“溝渠”等，這時告訴他們這些詞語中的“渠”意思是“人工水道”，而我們詩中講的是一塊半畝大小的方形池塘，并不是“水渠”，由此告訴學(xué)生“渠”在詩中的意思是代詞“它”，同時聯(lián)系我們過去學(xué)習(xí)過的“家祭無忘告乃翁”中的“乃”是第二人稱代詞，指代“你，你的”?！拔峒蚁闯幊仡^”中的“吾”是第一人稱代詞，指代“我，我的”。通過對以前學(xué)過的古詩的回顧，加深“渠”的意思的印象。

理解了詞語的意思，就可以讓學(xué)生嘗試著理解詩句的意思，讓學(xué)生先自己嘗試著說一說，在學(xué)生說之前，教給學(xué)生“連詞成句，調(diào)換詞序，添加詞語”的方法，讓學(xué)生能夠用完整通順的句子表達(dá)出詩意。有了方法的指導(dǎo)，學(xué)生就能輕而易舉地將詩句的大概意思說清楚了。

三、悟。感受詩景，悟出詩志

《觀書有感》一詩，前兩行寫景，后兩行寓理。感受詩中的景色，悟出詩人通過詩歌所要表達(dá)的情感、志向是學(xué)習(xí)古詩的重點也是難點。在過去的教學(xué)中，教師往往會流于形式，用自己的理解和感悟強(qiáng)加于學(xué)生，學(xué)生也是一知半解，全盤照收，以能回答作業(yè)中的問題為目標(biāo)，死記硬背，并不能做到真正的感悟。

詩是通過意境來反映生活，表達(dá)感情的。意境就是詩中所描繪的畫面和作者的思想感情交融而成的藝術(shù)境界的美，也即“詩情畫意”的美。古詩詞教學(xué)中只有喚起學(xué)生情感體驗，產(chǎn)生移情和共鳴，讓學(xué)生展開想象，引起聯(lián)想，由此及彼，調(diào)動自己的生活經(jīng)驗，來再現(xiàn)作品中的形象，才能入境悟情。

在理解了詩句意思后，先讓學(xué)生反復(fù)誦讀《觀書有感》前兩行，想象詩人所看到的畫面，學(xué)生一般都會想象到“有一塊不大的方形池塘，池中的水清澈明凈，好像一面打開的鏡子，倒映著天上的云朵，水面波光粼粼，天空的倒影在隨波移動?！碑?dāng)平面的詩句通過學(xué)生的想象生成為一幅幅鮮活的畫面，一幕幕立體的場景時，學(xué)生才能投身其中，感詩人所感，想詩人所想。有了想象，再來指導(dǎo)學(xué)生邊想象畫面邊誦讀詩句，這時學(xué)生在“意象”的召喚和引領(lǐng)下詩句背后的情味和意蘊(yùn)，于是，朗讀時的情感就能噴涌而起，一瀉千里，真正做到讀出詩歌的韻味。

詩歌中的情感要靠“意象”去顯現(xiàn)，《觀書有感》借半畝方塘中清澈明凈的“水”這一意象，引發(fā)詩人的疑問――“問渠哪得清如許？”繼而詩人通過思考得出“為有源頭活水來”的答案。在教學(xué)過程中，先讓學(xué)生去想象“源頭活水”從何而來，思考怎樣的水才是“源頭活水”？沒有了“源頭活水”方塘里的水會怎樣？通過想象和思考，讓學(xué)生明白“源頭活水”對于方塘的重要性。詩句中簡單的一問一答，道出一個深刻的道理，只有博覽群書，博采眾長，才能讓自己的心智保持如水般的明凈。道理很淺顯，要讓學(xué)生明白，卻非易事。常言道“學(xué)貴有疑”，在學(xué)生領(lǐng)悟了詩歌的意象以后，讓學(xué)生聯(lián)系詩歌的題目提出問題，善于發(fā)現(xiàn)的學(xué)生就會產(chǎn)生疑問“為什么全詩一字未提‘書’，題目卻是《觀書有感》？”再讓學(xué)生通過對整首詩歌的理解來明白“方塘”就好像是人的心智，“源頭活水”就是讓心智保持明凈的源源不斷的知識。最后加以總結(jié)，讓學(xué)生知道要想明白詩歌所要表達(dá)的情感、志向、道理，需要在閱讀時，多提幾個“為什么”，將“學(xué)”與“問”切實結(jié)合起來。

四、拓。拓展閱讀，活學(xué)活用

古詩詞語言凝練，用詞精妙，講究音樂美、意象美、建筑美。將古人流傳下來的經(jīng)典文字埋藏在記憶里，既能提高一個人的語感，又能提高人的內(nèi)在修養(yǎng)。這也是古往今來，人們閱讀、記憶古詩的主要目的。對于小學(xué)生而言，學(xué)完一首古詩，不僅要把這一首古詩記住，還需要延伸該詩人的作品，延伸同類型的作品，這樣做不僅增加學(xué)生對不同語言風(fēng)格的感受力，還能加深學(xué)生對本詩內(nèi)容的理解和對該作者寫作風(fēng)格的把握。

以《觀書有感》為例，在學(xué)完這首詩后，教師出示朱熹的《觀書有感（其二）》，讓學(xué)生用課堂一開始所提出的方法，小組合作學(xué)習(xí)第二首古詩，學(xué)生很快就能通過合作交流，將第二首詩中的疑難問題弄懂，如“艨艟”一詞的讀音和意思，“向來”“中流”的意思。接著用連詞成句、調(diào)換詞序、添加詞語的方法說一說每句詩的意思，由于課堂時間有限，對于《觀書有感（其二）》詩歌中的意象及詩歌表達(dá)的道理，則通過比較閱讀的方法加以學(xué)習(xí)，讓學(xué)生比較這兩首古詩，說說這兩首詩歌的異同，通過比較，學(xué)生不難發(fā)現(xiàn)，這兩首詩相同之處很多，題目、作者是相同的，讀音上都有押韻的特點，都運(yùn)用了比喻等修辭，同樣都是通過景物來表達(dá)一個關(guān)于讀書的道理等等。不同之處在于詩歌借助的景物是不同的，一個是“方塘”，一個是“艨艟巨艦”;還有表達(dá)的道理也有所不同，一個是說“要多讀書，多汲取知識，才能保持心智的明凈”，另一首則表達(dá)了“要多積累，當(dāng)積累到了一定的程度，基本功扎實了，藝術(shù)的創(chuàng)作自然能水到渠成、流暢自如。

有了兩首詩的比較學(xué)習(xí)，學(xué)生也自然對作者的創(chuàng)作風(fēng)格有了一定的了解，明白朱熹是宋代的理學(xué)家，也是一個善于借助一般景物來闡述深刻道理的詩人，由此可以引發(fā)學(xué)生對朱熹，對說理詩的興趣，從而在課后對朱熹的其他古詩文、說理詩進(jìn)行誦讀與積累。

當(dāng)今的課堂教學(xué)，學(xué)生的學(xué)習(xí)方式正在悄悄地發(fā)生著變化，課堂是向兩頭開放的，學(xué)生帶著問題、信息走進(jìn)課堂，一堂課上好后，學(xué)生帶著許多新的問題離開課堂，課堂教學(xué)結(jié)尾變成了問號式，省略號式，這不僅僅是知識的延伸，更是情感的延續(xù)。

《義務(wù)教育語文課程標(biāo)準(zhǔn)》指出：學(xué)生是語文學(xué)習(xí)的主體，教師是學(xué)習(xí)活動的組織者和引導(dǎo)者。語文教學(xué)應(yīng)激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，培養(yǎng)學(xué)生自主學(xué)習(xí)的意識和習(xí)慣，引導(dǎo)學(xué)生掌握語文學(xué)習(xí)的方法，應(yīng)尊重學(xué)生的個體差異，鼓勵學(xué)生選擇適合自己的學(xué)習(xí)方式。根據(jù)綱要的精神，傳統(tǒng)的學(xué)習(xí)方式應(yīng)當(dāng)改變而且也必須改變，這里所說的改變并不是說將以往的教育方式進(jìn)行全盤否定，而是在分析學(xué)習(xí)內(nèi)容的基礎(chǔ)之上對教育教學(xué)方式進(jìn)行恰當(dāng)調(diào)整，將那些不適用的學(xué)習(xí)方式調(diào)整為采用自主學(xué)習(xí)的方式學(xué)習(xí)，通過這種方式增加學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性，讓學(xué)生學(xué)會學(xué)習(xí)，學(xué)會交際，學(xué)會生活，學(xué)會生存，讓他們樂學(xué)、會學(xué)、善學(xué)，使學(xué)生主動適應(yīng)而不是被動接受學(xué)習(xí)內(nèi)容，發(fā)揮自身的優(yōu)勢和特長。

參考文獻(xiàn)：

表達(dá)志向的詩句范文第5篇

【教學(xué)設(shè)想】古詩作為中華民族的文化瑰寶，其意境美，語言美、人格美的特點不僅能給人以藝術(shù)的熏陶，更能啟迪人的智慧，陶冶人的性情。根據(jù)《墨梅》題畫詩的特點、本課的教學(xué)目標(biāo)和學(xué)生的已有的知識水平，采取自主、合作、探究的學(xué)習(xí)方法，引領(lǐng)學(xué)生憑借語言文字，誦讀感悟詩意　，品讀領(lǐng)悟詩情，思讀探索詩的外延。

【教學(xué)目標(biāo)】

知識與技能：

1、能有感情的朗誦詩歌，并理解詩意。

2、感受詩人借詠梅貞潔自守，淡泊清高的情操。

過程與方法：

1、以讀感悟，體會詩情。

2、文圖合并，感受情操

情感、態(tài)度、價值觀：

1、體會詩人借墨梅自喻，表達(dá)其淡泊名利、清雅高潔的高尚追求。

2、激發(fā)學(xué)生愛梅的情感，學(xué)習(xí)梅花的品格。

【教學(xué)重點】

理解詩句的意思，體會詩中梅的特點和品性。

【教學(xué)難點】

體會詩人借墨梅自喻，表達(dá)其淡泊名利、清雅高潔的高尚追求。

【教學(xué)過程】

一、導(dǎo)入新課

1、同學(xué)們，梅花歷來是詩人們吟誦的對象。你知道哪些寫梅花的詩呢？（指名朗誦）無論誰贊頌梅花，都不能同李清照的詩。而說到畫梅那就要數(shù)畫梅圣手----王冕。王冕愛梅花，在隱居九里山時，他植樹千株，自題所居為“梅花屋”，自號“梅花屋主”。他善畫墨梅，萬蕊千花，自成一家。所作的“墨梅圖”與“墨梅”詩均名揚(yáng)天下。他的“墨梅”，可用“神韻秀逸”四字來概括。

（出示王冕的《墨梅圖》）

2、同學(xué)們今天老師帶來了一幅，我們來一起欣賞欣賞，你覺得畫得怎么樣，畫中的梅花給了你什么樣的印象？說說你的感受，注意把話說完整。

3、一枝墨梅橫斜，畫中無論是開著，還是未開著，雖然沒有顏色，但透著勃勃生機(jī)，這是王冕的墨梅畫一組畫其中的一幅，是王冕最喜愛的一幅，就連唐寅也題了詩，王冕自己也題了一首，就是我們今天要學(xué)習(xí)的七言題畫詩——《墨梅》。看著題目，你知道了什么？還想知道什么？（墨梅有什么特點，詩人為什么要寫《墨侮》這首詩？要表達(dá)自己什么樣的感情？）

二、初讀古詩，讀準(zhǔn)古詩

1、自讀古詩。要求：讀準(zhǔn)，讀通順，讀出詩的節(jié)奏。學(xué)寫生字

2、指名讀，讀正確。

3、指導(dǎo)誦讀讀。誰愿意來試著讀一讀？在吟讀古詩詞的時候，我們一定要注意它的節(jié)奏、韻律，這是一首七言詩，你覺得怎樣停頓比較好呢？

4、學(xué)生自由練習(xí)朗讀。指名讀、齊讀，讀出節(jié)奏來。

5、說說你有沒有難寫的字。

6、現(xiàn)在請同學(xué)們拿出抄寫本，端端正正地把古詩抄寫一遍。做到美觀大方。誰能到黑板上來寫。

三、品古詩、明詩意

1、指名讀，出示古詩。畫出帶點的字詞，讓學(xué)生說自己的的理解。

吾、洗硯池、淡墨痕、清氣、乾坤

2、根據(jù)你對以上這些詞的理解，你能用自己的話說說詩句的意思嗎？

3、聯(lián)系古詩，想想、說說王冕筆下的這株梅花究竟有什么特點呢？

生交流，出示：

生長地點——洗硯池頭 形態(tài)——個個花開

顏色——淡墨痕 氣味——清氣

4、賞《墨梅》畫，在交流中理解古詩。

“吾家洗硯池頭樹，個個花開淡墨痕”

（1）王冕為什么要強(qiáng)調(diào)“吾家”呢？這句詩中包含什么樣的典故？那么從這句詩中你讀出什么？（王羲之有“臨池學(xué)書，池水盡黑”的傳說。這里化用這個典故。讀出王冕學(xué)畫的勤奮。）

（2）請同學(xué)們欣賞著墨梅畫，說說你對個個花開淡墨痕的理解。

（3）指導(dǎo)朗讀，表現(xiàn)出墨梅花開色淡如墨痕的樣子

（一株墨梅臨立于硯池旁，每天耳濡目染王冕是那樣勤奮地讀書學(xué)畫，墨梅也是那樣的飄逸灑脫、清新自然，不流于世俗。誰能讀出墨梅花開色淡如墨痕的樣子。）

（4）墨梅的飄逸灑脫、清新自然，不流于世俗還表現(xiàn)在哪兒？指名說，出示

“不要人夸好顏色，只流清氣滿乾坤”

（1）請同學(xué)們一邊欣賞著墨梅畫，細(xì)細(xì)品品這兩句詩想想從中你還讀出墨梅的什么？說說你的理解。

討論交流。

（2）同學(xué)們，想想假如你置身于這株墨梅前，我想問問大家，你聞到的又是怎樣的梅香？（在交流中理解“清氣”，聯(lián)系其他植物的香，比較體會其中那種淡淡的、幽幽的、靜靜的特點，并能用“清”來組詞，如“清幽、清淡、清雅”等來形容梅香。）

（3）從“滿乾坤”這個詞你又讀出什么？這又是一種什么樣的意境？請發(fā)揮你的想像描繪一下的你的感受。（在對話中體會“滿乾坤”中無處沒有，無人不知的意蘊(yùn)，無論何時，無論何處，每個人都能聞到那梅花的香味。

（4）那么詩人為什么不用清香而用清氣呢，從中你又讀出什么。（清氣給人一種清香流動的感覺，讓我們感受到墨梅讓自己的清香彌漫于人間，給人類送去它的清香，更讓我們感受到它的那種不向世俗獻(xiàn)媚的高貴、高潔、，不在意別人的夸耀，更不需要別人的奉承的清正的氣節(jié)。）

（5）師指導(dǎo)說出自己的感情，并感情朗讀。（重點讀出“清氣”和“流”的動態(tài)美。）

（6）指導(dǎo)朗讀。朗讀表現(xiàn)梅香清雅的特點。（這株墨梅受主人的熏陶，它是這樣的淡泊，不圖人們夸贊它顏色的鮮艷，只求清香充滿人間。請同學(xué)們帶著你的感受朗誦這兩句詩。）

（7）指名讀，評議。齊讀。

5、指導(dǎo)朗讀全詩。

讀著這首詩，想著畫中的梅花，你看到這株梅花了嗎？喜歡這株梅花嗎？請根據(jù)自己的感受朗讀全詩。

四、賞墨梅，悟詩情，品人格

1、同學(xué)們，畫是無聲詩，詩是無聲畫。讓我們再來欣賞王冕的墨梅畫和官梅的區(qū)別。王冕想通過這畫告訴人們什么呢？是如何通過畫表現(xiàn)出來的？

補(bǔ)充王冕的生平資料。

交流感知王冕的“淡泊”與“清高”之意。。

2、討論不同版本的墨梅之間的區(qū)別。

（1）出示

墨梅

吾家洗硯池頭樹，朵朵花開淡墨痕。

不要人夸好顏色，只留清氣滿乾坤。

（2）孩子們，“個”與“朵”，“流”與“留”你覺得哪一個好？

（“個”可以理解為個人，詩中有詩人的情操，“朵朵”有官梅之嫌，“個個”讓我們感受到野梅的含苞欲放地洋溢著蓬勃的生氣，令人感到清新，自然?！傲鳌弊屆坊ǖ母邼?，流到很遠(yuǎn)的地主，似乎梅花的清香、詩人的品質(zhì)永遠(yuǎn)流在人們的心中，流在我們的心目中，流淌到的每個人的心中，源遠(yuǎn)流長，在人世間傳誦。）

3、再讀古詩，讀出王冕的志趣和高貴的品質(zhì)。

4．墨梅寄托著王冕的情懷，訴說著王冕的志向，表面寫某一事物，其實是在寄托自己的志向，這種手法叫——托物言志。

五、拓展延伸

1、王冕人稱“梅花屋主”一生寫了一百多首梅花詩，你還收集了那些？

2、學(xué)生匯報，并集體誦讀

3、讀著這一首首描寫梅花的詩，我們眼前仿佛有一束盛開的繁梅，正敖立于風(fēng)雪之中，幽幽的散發(fā)著它的清香。它就像王冕一樣，面對人生的不如意，面對世俗的誘惑，都保留著一種清高的氣節(jié)，擁有一顆清亮的心靈。愿同學(xué)們都有一顆高尚的心靈。

六、作業(yè)

搜集有關(guān)梅花的詩句，辦一期以“詠梅”為主題的小報

板書設(shè)計：

墨梅

王冕